1.湖南省宜章县中医医院 424200；2.湖南省宜章县中医医院 424200；3.湖南芷江侗族自治县中医医院 419100
【摘 要】目的 探究参芪益智组分中药的质量标准。方法 通过鉴别参芪益智组分中药中的淫羊藿总黄酮，并以淫羊藿总黄酮作为试验品与朝藿定A对照品进行含量测定、精密度、稳定性、重复性与加样回收率比较，探究参芪益智组分中药中各组分质量标准及高效液相色谱法的测定要求。结果 试验品淫羊藿苷与对照品朝藿定A精密度实验峰面积ＲSD为0.16%与0.10%，稳定性实验峰面积ＲSD为1.8%与1.3%，加样回收率为98.65%与98.79%，RSD＜3%，试验品与对照品比较无统计学意义（P＞0.05）。结论 经鉴别，参芪益智组分中药含有4种黄酮成分，通过以其中的淫羊藿总黄酮试验品与对照品朝藿定A进行高效液相色谱法比较测定，可分析出黄酮成分线性方程、精密度、稳定性、重复性与加样回收率符合高效液相色谱法测定要求。高效液相色谱法具有较高的稳定性、精密度、重复性等，可作为芪益智组分中药的质量控制标准。
【关键词】参芪益智组分中药；质量标准
参芪益智组分中药主要用来对老年痴呆治疗的临床经验为主，把天麻素等成分对老年痴呆的疗效与作用机制的不同，将中药成分的不同根据统计学原理设定整合成的新型组分中药[1]。
1 仪器与试药
1.1 仪器
旋转蒸发仪、超声波提取器、三用紫外分析仪、高效液相色谱仪以及分析天平的型号分别为EYELA SB-2000、KQ-250B型、QY-20型、Aglientl200型以及AUY220其中高效液相色谱仪配有光二极管阵列检测器，电热恒温水浴锅选择北京中西集团公司。
1.2 试药
淫羊藿苷、朝藿定A、阿魏酸等都来自成都曼斯特生活科技有限公司，纯度超过98%，实验室自制的参芪益智组分中药。氧化铝由上海新诚精细化工有限公司，大孔吸附树脂（型号为D101），采用蒸馏水，其余试剂为分析纯。
1.3方法
1.3.1薄层鉴别
鉴别以阿魏酸与淫羊藿总黄酮测量为例，描述鉴别方法与过程，同理鉴别参芪益智组分中药中的其他组分，进一步进行质量标准研究。
（1）阿魏酸
选择0.53g参芪益智组分中药，加入适当剂量的甲醇溶解，利用超声提取半小时，滤过，利用旋转蒸发仪将滤液挥干，用甲醇将残渣定容到5ml，得到供试品溶液，按照顺序制取三批供试品溶液。利用相同方法制取阿魏酸阴性样品。衬得适量阿魏酸，利用甲醇溶解将其制成1.0g/L的对照溶液。吸取以上溶液各5μL，点在相同硅胶G板上，根据正己烷：氯仿：冰醋酸=8：8：1作为展开剂，完成展开、取出以及晾干等工作。在紫外灯下进行检视。供试品色谱中，在和对照品色谱相对处，呈现一样颜色的荧光斑点，阴性样品没有干扰。
（2）淫羊藿总黄酮
和上述薄层鉴别方法相同制取三批供试品溶液与缺淫羊藿总黄酮的阴性样品，称取适当的淫羊藿总黄酮，利用甲醇溶解将其制成1.0g/L的对照溶液。吸取上述溶液各5μL，点在相同硅胶G板上，按照氯仿：乙酸乙酯：甲醇：水=15：40：22：10，在3~10℃中的下层溶液作为展开剂，完成展开、取出以及晾干等工作。将10%的磷钼酸乙醇溶液喷洒并晾干，用105℃烘干到斑点清晰。供试品色谱中，在和对照品色谱对应处，呈黄色斑点，阴性样品没有干扰。
1.3.2含量测试
对照品：准确称取适量朝藿定A与淫羊藿苷对照品，分别与416 mg/L与320mg/L混合配置对照溶液。供试品：准确称取组分中药，利用五号筛取0.2g，放在100ml的量瓶中，加入适当剂量的70%甲醇，利用超声辅助溶解，定容到指定刻度，摇晃并过滤，选择续滤液通过0.45μm微孔滤膜就可得到。阴性对照溶液：根据组分中药处方比例，配制不含淫羊藿总黄酮的阴性样品，根据供试品溶液的制定方法对阴性对照溶液制定。选择适当剂量的朝藿定A与淫羊藿苷对照品溶液，放入适量甲醇，配制成质量浓度不同的混合对照品溶液，测定液相色谱，在测谱条件下对峰面积测定。
1.4统计学方法
本次研究数据采用统计学软件SPSS19.0进行分析处理，计数资料组间比较采用X2检验，以P＜0.05表示差异存在统计学意义。
2.实验与结果
精密度：混合对照品溶液准确吸取，五次进样，获取朝藿定A与淫羊藿苷的峰面积RSD为0.10%与0.16%，差异不存在统计学意义（P＞0.05），但说明仪器具有较好的精密度。稳定性：选择相同的供试品溶液，在3、6、12、24h各个时间点进样，获取样品中朝藿定A与淫羊藿苷的RSD为1.3%与1.8%，n为5，差异不存在统计学意义（P＞0.05），但说明供试品溶液在24h内具有较好的稳定性。重复性：选择相同批次组分中药分为五份，根据供试品溶液的制定方法配置，进样分析黄酮成分含量，获取朝藿定A与淫羊藿苷的平均含量为7.79mg/g与26.20mg/g，差异不存在统计学意义（P＞0.05），但RSD都不足2%，n为5，说明此色谱法具有较好的重复性。加样回收率：选择知晓含量的相同批次组分中药0.1g，分为3份，相同比例加入到朝藿定A与淫羊藿苷对照品中，根据供试品溶液的制定方法进行平行试验，由表2可知：朝藿定A与淫羊藿苷的品均回收率为98.79%与98.65%，差异不存在统计学意义（P＞0.05），但RSD都不足3%，n为3，平均回收率较高。
线性回归分析峰面积（P）与混合对照品溶液浓度（Q），如表1，说明具有较好的线性关系。
3讨论
有研究[2]显示，参芪益智组分中药能够改善痴呆大鼠的记忆能力，对胆碱能功能的衰退有保护和治疗效果，使老年痴呆大鼠海马、皮质中兴奋性谷氨酸的含量明显降低，对谷氨酸介导的神经毒性有拮抗作用，使衰老与防治老年痴呆症状延缓。本研究为了对参芪益智组分中药中的质量标准有效控制，采用薄层色谱鉴别以及含量测定的方式深入研究，取得了显著效果。
总之，所建立的方法有操作便捷、灵敏性高、专属性强等多种特点，对参芪益智组分中药的质量控制效果较好。
参考文献：
[1]严红梅，贾晓斌等.多孔淀粉作为淫羊藿总黄酮固体分散体载体的研究[J].中国中药杂志，2015，40（9）：1723-1726.
[2]林思文，殷嫦嫦，殷明等.淫羊藿总黄酮与吡柔比星联合抗人骨肉瘤的作用机制[J].中国医院药学杂志，2015，35（2）：108-112.
[3]吴迪，陈冠婕，彭正午等.天麻素对脑缺血再灌注模型小鼠大脑及纹状体髓鞘的保护作用[J].中华行为医学与脑科学杂志，2015，24（3）：198-200.
论文作者:曾燕,曾云生,姚冬云
论文发表刊物:《航空军医》2016年第8期
论文发表时间:2016/6/21
标签：组分论文; 溶液论文; 中药论文; 淫羊藿论文; 统计学论文; 黄酮论文; 阴性论文; 《航空军医》2016年第8期论文;