黄金芬
（广西贵港市妇幼保健院优生遗传科 537100）
【摘要】地中海贫血是我国临床中最常见的遗传病之一，本文主要针对α地贫进行研究，重型α地中海贫血多会导致在妊娠末期胎死宫内，或出生后数分钟内死亡，具有严重的危害性。本文综述产前α地中海贫血的基因诊断进展，探讨在产前诊断地中海贫血的有效措施，做好产前诊断预防工作，降低地中海贫血患儿的出生率，全面了解产前地中海贫血的基因诊断现状。
【关键词】α地中海贫血 诊断进展 基因诊断 产前地中海贫血
【中图分类号】R394 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）36-0056-02
α地中海贫血作为世界上最常见的血液系统遗传病之一，多是由于人体内α珠蛋白基因缺失以及功能障碍而导致α珠蛋白肽链合成受阻造成的疾病[1]。由于地中海贫血的基因具有种族以及地理分布特征，而我国南方作为地中海贫血的高发地区，做好产前检测工作，针对高风险胎儿进行产前基因诊断，可在产前发现中重型地中海贫血胎儿，并进行选择性流产，可以有效降低地中海贫血患儿的出生率及死亡率。以下综述当前在产前地中海贫血中基因诊断的进展。
1 α地中海贫血病因
α地中海贫血是由于在人体的α珠蛋白基因，主要是位于第16号染色体的短臂末端[2]，由于此基因簇中有2 个重复的α基因、一个胚胎期类α基因、三个假基因以及一个功能未名的基因，其中若是缺失两个α基因，就将会严重影响α珠蛋白肽链合成，从而产生地中海贫血。我国最常见的地中海贫血基因为--SEA、-α3.7、-α4.2缺失型突变与 Hb CS、Hb QS、Hb WS 点突变[3]，对于非缺失型 HbH地中海贫血患者，其大多数临床症状比缺失型 HbH 患者更严重。以下针对缺失型α地中海贫血与非缺失型α地中海贫血的基因诊断方法进行综述。
2 缺失型α地中海贫血基因诊断
2.1限制性内切酶谱结合Southern 印迹分析 在针对缺失型地中海贫血基因诊断中，采用Southern 印迹杂交技术，分析基因的大片段缺失以及重复突变情况。采用这种方法诊断地中海贫血，需用放射同位素费时费力，但是由于该种方法检测结果可靠，稳定性高因此依然是基因诊断地中海贫血的好方法。
2.2溶解曲线结合多重 PCR分析 根据双链 DNA结合荧光染料 SBR-GreenⅠ与不同双链 DNA不同解链温度的特点，运用PCR集合溶解曲线的方法[6]，将单管与多重 PCR 后产物进行溶解曲线分析，也可鉴定出患者是否存在产前α地中海贫血症状。
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2.3片段大小结合缺口PCR分析 在产前α地中海贫血的基因诊断中，也可以采取缺口PCR与片段大小分析相结合的方式，设计好引物同缺失序列两侧翼序列互补[7]，根据长度片段分析是否患有地中海贫血。采用这种基因诊断方法，可以根据扩增片段的大小，很好地去区分正常杂合子同纯合子个体，检测出基因大片段的缺失。
2.4多重连接酶结合探针扩增技术 在产前α地中海贫血基因诊断方法中，应用MLPA 技术，对待测核酸中靶序列进行定性以及定量分析，并采用杂交、连接以及PCR 扩增反应[8]，检测核苷酸序列拷贝数的变化，这种基因诊断方法不仅具有很好的重复性，且特异性高，可以同时检测出已知、未知的大片段缺失以及重复突变[9]，可以检测出11种新的缺失型地中海贫血基因，具有很好的临床诊断疗效。
3 非缺失α地中海贫血基因诊断
3.1限制性内切酶酶谱结合PCR分析 对于非缺失α地中海贫血产前的基因诊断中，可以采用此种方法进行诊断，不仅可直接根据观察条带长度的差异[10]，使用此方法还具有简便、快捷的特点，主要针对已知的非缺失α地中海贫血。
3.2多重扩增不应突变系统 对于产前α地中海贫血的基因诊断中，可以采用ARMS，针对各突变位点设计出相应引物，然后通过扩增突变的特异性长度片段[11]，根据产物片段的大小来分析各突变情况，也是针对已知的地中海贫血。
3.3基因芯片技术 采用基因芯片及DNA微阵列技术[12]，将大量已知的序列探针集成在基片上，然后可以通过检测杂交信号，对生物细胞以及组织中的基因信息去进行分析，采用这种基因诊断方法，不仅具有高度的并行性、微型化[13]，还具有多样性以及自动化的优点。
3.4变性高效液相色谱技术 这种基因诊断技术，主要应用在未知型非缺失产前α地中海贫血产前诊断中，可自动检测出单碱基替代以及在小片段内核苷酸的插入、缺失[14]，敏感性较高，是高性价比的基因检测技术。
3.5基因测序技术 对于非缺失型产前α地中海贫血产前诊断中，采用基因测序方式进行检测基因突变[15]，具有很好的临床应用效果。
综上所述，在临床诊断产前地中海贫血中，可以采用基因诊断的方法，对产前α地中海贫血做出更加全面、简捷的诊断治疗，但各方法各有利弊，应根据需要选择适应范围好、灵敏度高的基因诊断方法，以提高临床诊断的有效率，降低地α中海贫血患儿的出生率，提高出生人口质量。
参考文献
[1] 宋春林,陈淑芬,范菊花,李相新.佛山地区地中海贫血的产前筛查和产前基因诊断[J].中国优生与遗传杂志，2012，07(18)：41-42.
[2] 黄海龙,徐两蒲,林娜,何德钦,钟海萍,李英,李丽英,林元.福州地区153例地中海贫血基因突变类型、频率及产前诊断研究[J].海峡预防医学杂志，2009，11(02)：82-87.
[3] 龙凤,马燕.地中海贫血的无创性产前诊断研究进展[J].中国妇幼保健，2012，09(14)：65-66.
[4] 罗世强,蔡稔,唐宁,许泽辉,杨金玲,韦小妮.地中海贫血的产前诊断分析[J].中国优生与遗传杂志，2011，14(12)：76-77.
[5] 黄淑帧,曾溢滔,仇效坤,陈美珏,黄荷菊,丛建平,赵久乔,董金瀚,王爱丽,陆丽珍.β-地中海贫血的产前诊断——Ⅱ.产前基因诊断结果的验证[J].上海医学，2010，21(14)：56-57.
[6] 林希平,赵应斌,苏承武,梁荣,梁徐;13例重型β地中海贫血的临床观察和基因分析[J];临床儿科杂志.2003(01)
[7] 林伟雄,龙桂芳,李卫;2例假性HbE纯合子的实验室鉴别诊断[J];广西医科大学学报，2012，17(06)：76-82.
[8] 西;毛炜;吴洁;黄琼莲;;非基因法检测地中海贫血现状[J];中国优生与遗传杂志，2011，06(34)：45-46.
[9] 陈智;杨侃;覃靖;杜娟;蒙达华;;广西883例轻型β地中海贫血基因型别分析及预测性产前诊断[J];华夏医学，2012，11(17)：65-67.
[10] 张庆华;地中海贫血的实验室诊断技术进展[J];广西医学，2012，16(54)：48-52.
[11] 赵永忠;α-地中海盆血分子诊断技术、基因缺陷及其流行病学调查研究[D];第一军医大学，2011，23(24)：96-97.
[12] 赵应斌;我国地中海贫血基因缺陷的杂合、复合状态[J];华夏医学，2010，18(09)：98-100.
[13] 唐清,张思仲.遗传病产前基因诊断的方法与进展[J].国外医学.妇产科学分册，2011，11(19)：23-24.
[14] 吴晶晶,梁驹卿,马瑞娟,郭浩,郭艳霞,赵丹曦.地中海贫血高风险胎儿的产前基因诊断[J].中华围产医学杂志，2012，3(23)：35-37.
[15] 万淑梅,余艳红,苏桂栋,张燕.280例β-地中海贫血高风险患儿的产前基因诊断分析[J].现代妇产科进展，2011，11(03)：76-78.
论文作者:黄金芬
论文发表刊物:《医药前沿》2013年第36期供稿
论文发表时间:2014-3-12
标签：地中海论文; 基因论文; 产前论文; 缺失论文; 产前诊断论文; 方法论文; 突变论文; 《医药前沿》2013年第36期供稿论文;