湖北省武汉市普仁医院 湖北武汉 430081
摘要：目的 探讨肝脏疾病时精氨酸代琥珀酸裂解酶（argininosuccinate lyase，ASL）分泌及与肝病相关血清学指标的关系。方法 随机选择102例明确诊断的肝病患者，测定血清ASL、甘氨酸胆酸（GCA）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST），与71例非肝病患者以及40例健康体检者（健康对照组）进行对照比较。结果 肝病组血清ASL水平显著高于非肝病组和健康对照组（均P<0.01），而非肝病组和健康对照组间无显著性差异；GCA、ALT和AST三组间均有显著性差异（均P<0.01）。受试者工作特征曲线（ROC Curve）显示ASL诊断肝病疾病的诊断效率高于GCA、ALT和AST，相关性分析显示肝病患者血清ASL水平与GCA、ALT、AST呈正相关性（r=0.618，P<0.01；r=0.473，P<0.01；r=0.433，P<0.01）。结论 ASL是反映肝脏疾病的灵敏指标，与常见的肝病血清学诊断指标有关联性，且诊断效率最高，适合临床开展。
关键词：精氨酸代琥珀酸裂解酶，肝病，血清
[Abstract]Objective：To investigate the relationship between argininosuccinate lyses（ASL）and other liver related serum markers on patients with liver disease.Methods：102 patients with liver diseases，71 patients with non-liver diseases and 40 healthy controls were recruited for this study and their serum ASL，GCA，ALT and AST were detected.Results：The level of serum ASL in liver disease group was significantly higher than that in non-liver disease group or healthy control group（all p<0.01），and there were no significant difference between the non-liver disease group and healthy control group.The results of serum GCA，ALT and AST revealed significant difference among these three groups（all p<0.01）.Receiver operating characteristic（ROC）curve analysis showed that ASL is superior to other serum markers in diagnosing liver disease.Furthermore ASL showed a positive correlation with GCA，ALT and AST（r=0.618，p<0.01；r=0.473，p<0.01；r=0.433，p<0.01）.Conclusion our date suggest that ASL is superior to those GCA，ALT or AST，and ASL is a more valuable serum marker for diagnosing of liver diseases.
[Key words]argininosuccinate lyase，liver disease，serum
肝脏疾病在我国的疾病谱中占有很大比例，每年因肝病死亡的人数居高不下，早期的诊断和治疗对于肝病的控制极其重要。血清学诊断是最方便、快捷的肝病诊断手段，目前广泛应用于临床的肝脏损伤标志物多为谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和甘氨酸胆酸（glycocholic acid，简称GCA）等，但这些指标对于肝病的诊断缺乏特异性，在鉴别诊断中的应用受到限制。近年来，国外一些学者研究发现在肝脏中催化合成尿素的一系列酶中精氨酸代琥珀酸裂解酶（（argininosuccinate lyase，ASL）对于诊断肝病具有独特的优势[1]。本研究通过对肝病患者血清ASL的检测，结合GCA、ALT和AST，明确ASL诊断肝病的价值以及与常见肝病诊断指标的关联性。
1.对象与方法
1.1 研究对象 选取2009年2月-2010年1月我院门诊或住院依照各自诊断标准明确诊断为肝病的患者102例（肝病组），包括病毒性肝炎67例、肝硬化19例和肝癌16例，其中男性61例，女性41例，年龄15-72岁，平均年龄51.2岁；非肝病组71例，为根据临床体征、病史、实验室以及影像学检测无肝脏疾病，且疾病治疗中未使用肝毒性药物的其它疾病患者，包括呼吸道感染11例、胃溃疡10例、肝外恶性肿瘤13例、心绞痛7例、糖尿病12例、高血压9例、胆肾结石6例、脑梗死3例，其中男性38例，女性33例，年龄12-79岁，平均年龄54.7岁。健康对照组选取健康体检人员40例，体检健康，无器质性、神经性、内分泌性及其它疾病，其中男性25例，女性15例，年龄18-72岁，平均年龄49.5岁。
1.2 研究方法 所有研究对象均于清晨空腹一次性抽取静脉血5ml，2小时内分离血清，留取200μl于-70℃冰箱保存（用于检测GCA），其余血清用于检测ASL、ALT和AST浓度。ASL、ALT和AST均采用速率法测定，在7600型全自动生化分析仪（日本Hitachi公司产品）上完成，ASL试剂盒由福建克里贝尔生物科技有限公司提供；ALT，AST由上海科华公司提供；GCA采用放射免疫分析法（RIA）测定，试剂盒购自北京原子能研究院同位素研究所，在SN-695B型γ记数仪上测定。具体操作按照仪器及试剂盒说明书进行。
1.3 统计学处理 检测数据以x¯±s表示。应用SPSS10.0统计软件，对同一指标样本均数间比较采用单因素K水平设计资料的方差分析；对均数的两两比较，采用成组设计资料的t检验；依据诊断试验的敏感性和特异性，绘制受试者工作特征曲线（ROC Curve）；应用积矩相关系数（Pearson相关系数）作线性相关分析。所有假设检验的假设水准定为α=0.05，以P<0.05有统计学意义。
2.结 果
2.1不同实验组血清ASL、GCA、ALT和AST水平比较 肝病组血清AST水平显著高于非肝病组和健康对照组（均P<0.01），但非肝病组和健康对照组间无显著性差异（P>0.05）；肝病组血清GCA、ALT和AST水平显著高于非肝病组和健康对照组（均P<0.01），但非肝病组和健康对照组间均有显著性差异（均P<0.01）。具体见表1。
2.2相关性分析 肝病患者血清ASL水平与GCA呈正相关性（r=0.618，P<0.01）（图1）；与ALT呈正相关性（r=0.473，P<0.01）（图2）；与AST呈正相关性（r=0.433，P<0.01）（图3）。
2.3 ROC曲线分析 根据诊断试验的敏感性和特异性，绘制ASL、GCA、ALT和AST诊断肝病的ROC曲线。ASL诊断肝病的ROC曲线下面积为0.995（95%可信区间0.989-1.002），大于GCA的0.955（95%可信区间0.928-0.982）、ALT的0.818（95%可信区间0.754-0.881）、AST的0.786（95%可信区间0.721-0.850）、（见图4）。
图4 ASL、GCA、ALT和AST的ROC曲线下面积比较
3 讨论
精氨酸代琥珀酸裂解酶是肝脏合成尿素的重要中间酶之一，在肝细胞内催化精氨酸代琥珀酸裂解为精氨酸和延胡索酸，联系生化反应中的三羧酸循环与尿素循环，其主要存在于肝细胞细胞质中，但在小肠、肾、心、肺和脾等组织也有极微量的表达[2]，属肝特异性酶。而目前广泛应用于临床的ALT和AST均为非肝特异性指标，虽然ALT在肝脏中含量最高，但肾、骨骼肌、肺、胰腺等组织器官中均含量较多，AST心肌中含量最高，肝脏其次，其它多种器官中也多有表达，导致这些指标诊断肝病的特异性不理想。GCA在肝内合成，胆囊中贮存，肠道内重吸收，再经门静脉被肝摄取，当肝组织发生病变或胆汁瘀滞时，血清中GCA含量增加[3]。
我们的研究发现，肝病组血清ASL水平显著高于非肝病组和健康对照组（均P<0.01），而非肝病组和健康对照组间无显著性差异（P>0.05）；对于传统的肝病诊断常用的血清指标GCA、ALT和AST，其肝病组水平也显著高于非肝病组和健康对照组（均P<0.01），但非肝病组和健康对照组间均有显著性差异（均P<0.01）。在我们观察的非肝病组与健康对照组间，只有ASL无明显改变，而肝病组患者均显著声高，并且与健康对照组无重叠。说明ASL的肝特异性表达，其它组织的表达量不能影响其血清学水平。而GCA、ALT和AST则不能表现出肝特异性，其在肝病的鉴别诊断中作用受限。相关性分析显示，肝病患者血清ASL水平与GCA、ALT和AST均呈正相关性，相关系数分别为（r=0.618，r=0.473，r=0.433，），且与GCA的相关性最高。说明在肝细胞损伤的病理表现中，ASL与GCA、ALT以及AST具有协同一致性，且GCA与ASL的协同性更好。诊断性分析显示ASL的ROC曲线下面积最大，达到0.995，与文献报告基本一致[4]说明ASL相较于GCA、ALT以及AST具有更好的肝病诊断价值，预示了很好的诊断应用前景。人体内几乎所有的尿素都在肝脏产生，肝功能受损势必影响尿素的合成。因此，理论上低血尿素浓度可用来指示肝功能受损，然而影响血尿素的因素很多，如肾小球滤过及肾小管的重吸收功能等，故肝功能损害时临床很难发现低血尿素浓度。但是作为尿素生成的鸟氨酸循环的重要酶，ASL则有较高肝特异性。目前ASL已逐步应用于临床，有研究认为ASL浓度与肝病理组织学炎症活动度计分呈正相关（r=0.498，P<0.01），可用于肝炎的活动度评估[5]。在方法学的研究上，也认为速率测定法在精密度、回收率、稳定性、最低检测限、线性范围以及抗干扰上明显忧于ELISA方法[6]。
综上所述，ASL与现临床常用的肝病诊断指标ALT、AST和GCA相关，但ASL的临床诊断价值更好，更适合肝病的鉴别诊断，并灵敏的反映肝细胞损伤。
参考文献：
[1]MorrisSM.Enzymes ofarginine metabolism.J Nutr，2004，134（10Suppl）：2743-27847
[2]Stephenne X，Najimi M，Sibille C，et a1．Sustained engraftment and tissue enzyme activity after liver cell transplantation for argininosuccinate lyase deficiency．Gastroenterology，2006，130（4）：l3l7一l323.
[3]熊彬，魏任雄。亮氨酸氨基肽酶等4项指标在肝病诊断中的意义和临床评价[J]。实用医学杂志，2009，25（6）：973-974。
[4]陈婷梅，俸家富，王箭，等。慢性肝病患者血清精氨[基]琥珀酸裂合酶的变化[J]。临床检验杂志，2007，25（6）：422-424。
[5]俸家富，陈婷梅，涂植光.血清精氨酸代琥珀酸裂解酶的测定在肝病诊断中的意义[J].中华肝脏病杂志，2007，15（7）：521-524.
[6]俸家富，陈婷梅，余晓林，等.血清精氨酸代琥珀酸裂解酶速率测定法的建立及初步临床应用[J].中华检验医学杂志，2009，32（2）：217-221.
论文作者:宋七咏
论文发表刊物:《健康世界》2014年24期供稿
论文发表时间:2016/4/6
标签：肝病论文; 血清论文; 琥珀酸论文; 特异性论文; 肝脏论文; 对照组论文; 相关性论文; 《健康世界》2014年24期供稿论文;