柴月阳
（浙江大学医学院附属第二医院滨江院区急诊科 310000）
【摘要】 目的：研究球囊损伤联合高脂喂养小型猪动脉粥样硬化模型的建立，检测HRV指标，观察这些指标在动脉粥样硬化形成过程中的变化，探讨恩度治疗是否对以上指标有影响，并了解相关机制。方法：雄性巴马小型猪18只，普通饲料喂食，按体重及血脂水平分为3组：模型组、药物治疗组和空白对照组，模型组和药物治疗组采取高胆固醇饮食+球囊损伤内膜的方法建立动脉硬化模型，造模12周后药物治疗组给予恩度静脉注射，注射时间为6周，于0周、8周、14周、18周检测HRV相关指标。结果：三组小型猪造模前SDNN、SDANN均无显著性差异(P>0.05)；造模后模型组与给药组SDNN、SDANN等指标明显低于于空白组有显著差异 (P<0.05) ；给药后给药组SDNN、SDANN与模型组无明显差异，但两组均低于空白组(P<0.05)。结论：内皮抑素对心律变异性相关指标无明显影响。
【关键词】 恩度；小型猪；心律变异性
【中图分类号】R541.4 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）30-0140-02
动脉粥样硬化（AS）及其并发症是发达国家发病与死亡的首要原因，其不良结局也逐渐在全球欠发达地区出现。根据世界卫生组织的报告，每年全球因冠心病和卒中死亡的人数约为1750万，在每3个死亡的人中就有1人死于心血管疾病，居死因的首位[1]。炎症因子呈网络状相互作用，参与炎症的级联放大效应[2]，可进一步促进单核细胞、巨噬细胞在血管壁黏附、聚集、迁移及促进内膜下平滑肌细胞迁移和增殖。
心率变异性(HRV)是指窦性心率在一定时间内周期性改变的现象，是反映交感-副交感神经张力及其平衡的重要指标。测量HRV最重要的临床意义是对冠心病特别是对心肌梗死后危险分级和预后评定[3]，众多临床报道表明，自主神经功能紊乱、HRV降低，是AMI后启动室性心动过速性心律失常、最终导致猝死的重要原因。但HRV与冠心病患者预后之间关系的机制尚未明了。
1.试验方法
1.1 模型的制备
取体重为10-15 kg雄性巴马小型猪18只，随机分为空白对照组(A组，n＝6)、模型组(B组，n＝6)、模型+rES干预组(C组，n＝6)。A组始终饲喂基础饲料。B、C组术前12h禁食，不禁水，称体重。球囊损伤术造模。术后B、C组高脂饲喂养，造模成功(约12周)后， B组给予1ml/kg/d 生理盐水连续耳缘静脉注射6周，C组以7.5 mg/m2/d rES连续耳缘静脉注射6周。
1.2 HRV相关指标测定
造模前、后每隔1月进行24小时心电遥测，进行软件分析后得出观察指标为:①SDNN:24 h所有窦性R-R间期的标准差。②SDANN index:24 h内每5min节段平均窦性R-R间期标准差。
2.实验结果
三组小型猪0周、8周、14周和18周心律变异性相关指标的变化见表1。如表示：三组小型猪0周时SDNN、SDANN无显著性差异(P>0.05)；造模后模型组与给药组SDNN、SDANN等指标明显低于空白组有显著差异 (P<0.05)；给药后给药组SDNN、SDANN与模型组无明显差异，但两组均低于空白组(P<0.05)。
表1.心率变异性SDNN和SDANN的变化
*表示与空白对照组比较差异显著（P<0.05），
**表示与模型组比较差异显著（P<0.05）
3.分析和讨论
内皮抑素(Endostatin， ES)是一种内源性的强效血管生成抑制剂，由哈佛大学O’Reillly[4]等于1997 年首次从小鼠血管内皮瘤中分离纯化获得，是一种分子量约20kDa的蛋白质，含184个氨基酸，其N端第1、3、11位3个组氨酸及第76位的天冬氨酸残基组成的锌离子结合位点，是胶原XVIII羧基末端裂解片段，分布在许多血管壁内和其它一些基底膜区域，是血管壁弹力纤维的重要成分[5]，同时也位于一些胞内细胞器中(肝细胞内质网、高尔基复合体)，通过不同的方式和胞外基质结合而发挥其生物学功能。ES通过基质金属蛋白酶、弹性蛋白酶和组织蛋白酶裂解胶原XVIII产生，而这些酶在AS的细胞中非常丰富，并与斑块破裂和急性事件有关，也参与了斑块的血管新生。因此，ES作为一种强有效的血管新生抑制剂，可能对抑制AS有一定的作用。Moulotn[6]等从动物实验中发现ES可以防止冠状动脉积聚脂肪块，减慢心脏AS，长时间治疗可在不影响血浆胆固醇水平的情况下，明显抑制AS斑块的进一步发展，斑块增长减慢85%，内膜血管明显减少，但不会影响泡沫细胞和早期的纤维肌性斑块，也不影响平滑肌细胞的含量。
rES是采用大肠杆菌作为蛋白表达体系，在ES母体上创造性的添加了9个氨基酸的新型ES，含有193个氨基酸，纯度高，基于抗血管生成的抑瘤活性是ES的2倍以上，成为被美国FDA批准的第一个抗血管生成药物，目前临床上主要用于非小细胞肺癌等恶性肿瘤的治疗和研究。
通过本实验的研究我们可以观察到，造模后HRV指标显著降低，与空白组相比较有显著差异，给予内皮抑素治疗后，给药组与模型组未见明显统计学差异，提示内皮抑素对HRV的影响不大。
【参考文献】
[1]Ross R, Glomset JA. Atherosclerosis and the arterial smoothmuscle cell:proliferation of smoothmuscle is a key event in thegenesis of the lesions of atherosclerosis.[J].Science,1973,180(93):1332-1339.
[2]Yamagami H, Kitagwaw K, et al. Associations ofserum IL-18 levels with carotid intima-media thickness [J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2005,25(7):1458-1462.
[3]Pitzalismv,Mastropasquaf,Massarif,eta1.PacingClinElectrophysiol,1998,21(3):559-567.
[4]O’Reilly MS, Boehm T, Shing Y, et al. Endostatin: an endogenous inhibitor of angiogenesis and tumor growth. Cell,1997, 88∶277-285
[5]Miosge N，Sasaki T，TimPl R. Angiogenesis inhibitor endostatin is a distinct component of elastic fibers invessel walls. FASEB J，1999，13:1743一1750.
[6]Moulton KS，Heller E，Konerding MA，et al. Angiogenesis inhibitors endostatin or TNP一470 reduce intimal neovascularzation and plaque growth in apolipoprotein E-deficient miece [J].Circulation，1999，99(13):1726-1732.
论文作者:柴月阳
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第30期供稿
论文发表时间:2016/1/22
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