冀恒涛(河南郑州大学第二附属医院检验科 450002)
【摘要】目的 通过对女性乳头瘤病毒高危的检测结果进行分析，探讨女性乳头瘤病毒高危型的感染情况，旨在更准确的检查使患者尽早治疗。方法 选择2012年1月-2013年12月在我院接受检查的乳头瘤病毒高危型检测的320例患者，采集患者宫颈内棉拭子为标本，提取DNA后进行适当的处理后应用定量聚合酶链式反应对320例患者进行检测，并通过试剂盒将乳头瘤病毒进行分型。结果 320例女性宫颈标本中乳头瘤病毒高危型感染46例，阳性率为14.375%，且人乳头瘤病毒高危感染类型主要为16、18、52亚型，其次感染类型为31、33、45。结论 目前人乳头瘤病毒高危检测的阳性率有所提高，通过试剂盒对高危型进行进一步分型能确定检查的准确性，通过定期女性进行检查能及时发现宫颈癌，尽早接受治疗提高女性健康水平。
【关键词】人乳头瘤病毒 高危型 检测分析
【中图分类号】R730.261 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）40-0124-01
人乳头瘤病毒是从宫颈癌组织从提取发现的，目前大量研究显示人乳头瘤病毒高危型是导致宫颈癌及癌变的必要条件[1]。近年来宫颈癌的发生率和死亡率均有明显的上升趋势，因此对人乳头瘤病毒高危的检测有着重要的意义，本研究通过对临床标本进行检测并且分析检测结果，旨在为临床更准确的检测提供理论依据。
1 资料与方法
1.1一般资料
选择2012年1月-2013年12月在我院接受人乳头瘤病毒高危检测的女性患者320例，其中年龄为28-59岁，平均年龄为36.56岁。
1.2方法
采集样本：检查者3天内禁止使用阴道内药物或洗液冲洗阴道，24小时内禁止性行为且非经期，首先用无菌棉球蘸取无菌生理盐水对检测者宫颈外分泌物进行冲洗，然后用无菌棉拭子插入检测者宫颈内约2cm处，停顿5s后旋转棉拭子收集宫颈内分泌物，将棉拭子放入无菌管中，作为标本进行检测[2]，对每名检测者做好标本标记。
试剂与仪器设备：PCR荧光分析器选择为日本DA7600，HPV分型检测试剂盒、细胞裂解液。
标本处理：向标本试管中加入1ml已经灭菌的生理盐水，将试管充分震荡，将棉拭子上的宫颈分泌物充分溶入生理盐水中，将液体全部移至离心管中，12000rpm离心5min后弃去上清，将沉淀用1mL生理盐水悬起混匀，12000rpm离心5min弃去上清，向沉淀中加入50μlDNA提取液将其充分混匀，在100℃恒温箱中保存10min，12000rpm离心5min，保存备用[3]。
PCR扩增：将PCR Mix、Taq酶和DNA模板按下列要求混匀，扩增反应体系为25μl/反应，混匀。扩增程序为95℃ 9min，95℃ 20sec，55℃ 30sec，72℃ 30sec，72℃ 5min，反应30个循环。
结果判断：分析PCR曲线，如果增长曲线不足S型曲线或Ct值= 0，则判样品乳头瘤病毒DNA总含量＜5.0×102为阴性结果。如果增长曲线呈S型曲线且Ct值＜30，判断方法为：当样品C＜5.00E+002，则样品的乳头瘤病毒DNA含量＜5.0×102，为阴性结果；当样品的5.00E+002＜C≤5.00E +006，则该样品的乳头瘤病毒DNA总含量=C基因拷贝，为阳性结果；当样品C＞5.00E+006，则该样品的乳头瘤病毒DNA 总含量为＞5.0×106基因拷贝，为强阳性[4]。
2 结果
检测的320例样本中人乳头瘤病毒高危型感染46例，阳性率为14.375%，且人乳头瘤病毒高危感染类型主要为16、18、52亚型，其次感染类型为31、33、45，具体数据见表一。
表一 人乳头瘤病毒高危感染情况
3 讨论
宫颈癌是全球女性患者最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康甚至患者生命，研究表明人乳头瘤病毒感染是导致宫颈病变的重要因素，目前研究表明人乳头瘤病毒具有高度组织和宿主特异性，可导致人类皮肤和粘膜组织的异常增生，引起宿主组织病变长生乳头状瘤进而导致宫颈内皮瘤变导致宫颈癌的发生。目前已知约40种不同基因型的人乳头瘤病毒感染生殖道，其中至少有12种与宫颈上皮内瘤变密切相关被认定为高危型，低危型可引起肛周皮肤和阴道下部的外生性湿疣类病变、扁平湿疣类病变[5]。人乳头瘤病毒感染女性后并不产生显著的临床症状，只有感染高危型病毒时容易引发宫颈癌，因此对人乳头瘤病毒高危检测的检测结果分析显得极其重要。本研究通过定量PCR方法检测样本并通过试剂盒对病毒进行亚型分析，发现阳性率为14.39%，并且亚型较高为16、18、52，因此通过对妇女进行定期检查可以尽早发现、及时治疗，将宫颈癌在早期得到治疗，提高女性患者的健康水平。
参考文献
[1]郭玉妹,孙捷,陈亚丹,等.HPV检测及其在宫颈癌诊断中的意义[J].中国实验诊断学,2009,13(9):1306－1308.
[2]彭秀红,毛玲玲,罗喜平,等.人乳头瘤病毒检测对宫颈病变的诊断价值[J].中国基层医药,2009,16(5):775－776.
[3]陈韩园,侯文静,朱华.上海市奉贤区妇女子宫颈HPV感染的检测[J].中国妇幼保健,2010,25(34):5017－5019.
[4]伊玉萍,伊兰花.HPV16,18型检测在宫颈癌及宫颈上皮内瘤样病变筛查中的价值[J].中华实用诊断与治疗杂志,2008,22(10):765-767.
[5]杨英捷,赵健,李雪倩,等.2285例女性下生殖道人乳头状瘤病毒感染筛查结果分析[J].中国实用妇科与产科杂志,2006,22(6):444-445.
论文作者:冀恒涛
论文发表刊物:《中外健康文摘》2013年第40期供稿
论文发表时间:2014-4-25
标签：病毒论文; 乳头论文; 宫颈癌论文; 宫颈论文; 人乳论文; 标本论文; 样品论文; 《中外健康文摘》2013年第40期供稿论文;