黑龙江省哈尔滨市香坊区成高子镇中心卫生院 150039
摘要：目的：探讨丹参素对高脂血症大鼠脂代谢的影响。方法：选用清洁级雄性SD大鼠60只，随机选取12只为基础对照组，饲以普通饲料，其余大鼠饲以高脂饲料，造模成功后随机分为高脂对照组和注射低、中、高（10，20，40mg·kg-1·d-1）剂量丹参素溶液（溶解于生理盐水）的试验组，2个对照组腹腔注射等体积生理盐水，每天腹腔注射1次，连续30d。检测血清TG，TC，HDL-C及LDL-C含量及肝脏ACC1，FAS，HMGR，CPT-I的mRNA表达水平。结果：注射丹参素后，大鼠血清中TG，TC，LDL-C含量降低，肝脏FAS和HMGR的mRNA表达水平显著降低。结论：丹参素通过降低TC含量，抑制LDL-C水平，及时清扫多余的胆固醇，有效调节高脂血症大鼠血脂水平；通过降低FASmRNA表达减少脂肪酸的合成，抑制HMGRmRNA表达来减少内源性胆固醇的合成。
关键词：丹参素；高脂血症大鼠；血脂水平；mRNA表达水平
根据《中国营养与健康现状（2012年）》报道，我国成人高血脂症的患病率为20%，估计患病人数为1.6亿人，同时高血脂症也是高血压、糖尿病、冠心病、脑卒中的重要危险因素，长期的高血脂可导致动脉粥样硬化，增加心脑血管的发病率和死亡率[1-2]。高脂血症是由于全身脂肪代谢或运行异常，使得血浆中的脂质高于正常范围的一种全身性疾病，脂代谢紊乱是诱发高脂血症的关键原因，因此维持血脂代谢平衡对预防高脂血症的发生具有重要意义。
目前调节血脂所用的药物如羟甲基戊二单酰辅酶A还原酶抑制剂、烟酸类等均存在一定的副作用，如肝脏功能损害、胃肠功能紊乱等，而中医药以其深厚的理论和灵活多变的组方在高脂血症的治疗中起到了重要的作用。中医药治疗高脂血症有其独特的优势：药源丰富，毒副作用小等。近年来，许多学者对丹参及其制剂的复杂组分进行体内外定性或定量分析，尤其是对脂溶性成分进行了大量的研究，发现丹参酮ⅡA具有增加冠脉血流量、改善缺氧心肌的代谢紊乱、提高心肌耐缺氧能力、抑制血小板集聚及抗血栓形成等作用。然而中医传统用药方法是用其水煎剂，即丹参的水溶性部位，所以研究丹参的水溶性成分更有意义。丹参水溶性成分的药理作用广泛，以往主要集中在循环系统上，近年来的研究表明丹参素具有降脂的功效。丹参素是1980年从丹参中分离出的一种酚性芳香酸类化合物，常作为丹参原药材和丹参制剂质量控制的指标成分，具有很强的抗脂质氧化、抗肝纤维化、改善尿毒症、改善肾功能等作用。孙锡铭等发现丹参素具有抑制细胞内源性胆固醇合成和抗脂蛋白氧化作用，从而防止氧化脂蛋白对细胞的损伤。丹参素在降脂方面发挥着重要的作用，但目前国内外有关丹参素如何调节血脂代谢的研究甚少，在高脂血症动物模型上的实验没有任何报道。 为研究丹参素对高脂血症大鼠脂代谢的影响，本试验以高脂血症大鼠为模型，通过给予不同剂量的丹参素，阐述丹参素对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及其作用机制，为丹参素作为一种降脂有效成分在中药的开发与应用中提供理论基础和新的研究思路。
1材料
1.1动物清洁级雄性SD大鼠60只，由浙江中医大学动物实验研究中心提供，初始体重差异均不显著。试验用基础饲料由实验中心提供，高脂饲料购自江苏省协同医药生物工程有限责任公司，配方为基础饲料68%，猪油10%，蛋黄粉10%，蔗糖10%，胆固醇2%。丹参素钠（CAS：67920-52-9）购自上海源叶生物科技有限公司，纯度≥98%。
1.2仪器及试剂日立7020全自动生化分析仪；ABI（ABI7500）实时荧光定量PCR仪。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆RIzolReagent（Invitrogen，15596026），PlatinumSYBRGreenqPCRSuperMix-UDG（Invitrogen，11733-038），dNTP（Takara，D4030RA），RNaseInhibitor（Takara，D2313A），M-MLV（Takara，D2639A），甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固（LDL-C）试剂盒均购自上海申能-德赛技术诊断有限公司。
2方法
2.1试验处理选用清洁级雄性SD大鼠60只，适应性饲养观察1周，根据大鼠的初始体重随机选取12只为基础对照组，饲以普通饲料，其余大鼠饲以高脂饲料，每天12h光照维持，昼夜循环，自由饮水进食。于第6周末夜间禁食12h后眼眶采血检测血脂水平，血脂含量升高并与基础对照组差异显著的大鼠作为成功高脂模型纳入试验。选取造模成功的大鼠按血脂水平随机分为高脂对照组和腹腔注射低、中、高（10，20，40mg·kg-1·d-1）3个剂量丹参素的实验组。各实验组大鼠腹腔注射丹参素溶液（溶解于生理盐水），注射量为10mL·kg-1，2个对照组腹腔注射等体积生理盐水，每天腹腔注射1次，连续30d。腹腔注射实验期间，除基础对照组外其余各组大鼠均饲以高脂饲料，自由进食、饮水。
2.2样品采集丹参素腹腔注射30d后，大鼠禁食12h，腹主动脉取血，收集血液3000×g离心15min，分离血清，-20℃保存备用；取适量肝脏组织，液氮保存，即刻存入。
2.3血清生化指标检测全自动生化分析仪检测造模后及注射丹参素后大鼠血清TG，TC，HDL-C，LDL-C的含量。
2.4数据统计与分析数据以±s表示，用SPSS18.0软件对试验数据进行One-WayANOVA方差分析。
3结果
3.1大鼠体重各组大鼠初体重无差异。6周后各试验组（饲喂高脂饲料）大鼠体重均显著高于对照组（饲喂基础饲料）（P<0.05），且组间无差异。实验结束后，低、高剂量组大鼠体重和对照组及高脂对照组均无明显差异。
3.2丹参素对高脂血症大鼠血脂代谢的影响造模后各组大鼠血清TG，TC和LDL-C含量显著高于对照组（P<0.01），提示造模成功。各剂量组与高脂对照组水平无差异，提示分组合理。
与高脂对照组相比，丹参素降低高脂血症大鼠血清TC，LDL-C含量（P<0.05），血脂水平趋于正常。和对照组相比，高脂对照组HDL-C显著降低（P<0.01），注射丹参素可以升高高脂血症大鼠血清HDL-C含量（P<0.05）。
3.3丹参素对高脂血症大鼠肝脏脂代谢关键因子mRNA表达水平的影响与对照组相比，丹参素显著降低了FAS，HMGR和CPT-I的mRNA表达水平（P<0.01），与模型组相比，丹参素降低了HMGRmRNA水平（P<0.05），升高了CPT-ImRNA表达水平（P<0.05）。
4讨论
丹参素对高脂血症大鼠血脂的影响高脂饮食诱导大鼠高脂血症模型是目前研究高脂血症及其并发症的理想动物模型，经研究报道，其可能的机制是：①血中游离脂肪酸（FFA）增多，肝脏的FFA也增多，肝脏合成及释放TG增多；②脂蛋白脂酶活性下降，使VLDL，TG清除率下降；③HDL水平下降的原因可能与载脂蛋白向VLDL转移以及HDL与VLDL交换有关[15]。本试验利用高脂饲料造模后发现，大鼠血清TG，TC，LDL-C含量均明显升高，提示造模成功。
丹参素通过降低高脂血症大鼠TC含量，抑制LDL-C水平，及时清扫多余的胆固醇，有效调节高脂血症大鼠血脂水平；通过抑制高脂血症大鼠肝脏FAS和HMGR的表达减少脂肪酸和内源性胆固醇的合成，通过促进CPT-I的表达加速脂肪酸的氧化分解，在降脂方面有一定成效。丹参素作为中药有效成分，其在脂类代谢相关疾病上的研究和具体作用机制有待进一步深入研究。
参考文献：
[1]朱绍玲.高血脂症的社区预防与用药指导[J].中国社区医师，2013，15（3）：149.
论文作者:王晓华
论文发表刊物:《健康世界》2015年8期供稿
论文发表时间:2015/11/10
标签：丹参论文; 大鼠论文; 高脂血症论文; 对照组论文; 水平论文; 血脂论文; 血清论文; 《健康世界》2015年8期供稿论文;