（黔东南州天柱县疾病预防控制中心 贵州 黔东南 556600）
【摘要】 痰涂片检查是肺结核诊断的金标准，而且符合国家关于结核病控制中的成本-效益原则，本文主要研究结核病痰涂片抗酸染色检查方法，结合具体的工作经验，对痰涂片检查工作中容易出现问题的部分，提出一些自己的体会，希望能够实际的痰涂片检查工作，提供一定的参考。
【关键词】结核病；痰涂片；检查方法
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）18-0195-02
随着近些年经济的发展、人们生活水平的提高，结核病的发病率越来越高，很多地区都将结核病作为重点的检查对象，目前对于结核病的检查，痰涂片检查是主要的方式，通过有效的痰涂片检查，能够发现传染性的肺结核，为了控制结核病的情况，我国卫生部制定了《乡镇卫生院结核病痰涂片检查点设置及实验室操作规程》。结核病的致病因素主要是结核分枝杆菌，利用抗酸染色，染色原理：分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的.其他的物质会变成蓝色，使致病菌在形态上和颜色上表现出来，受到设备和技术水平的限制，形态学检查是微生物检测的常用方法。
1.结核病痰涂片抗酸染色检查方法
1.1 采集标本
在标本的采集中，首先要让患者了解到痰标本的重要性，适当的指导患者如何咳痰，考虑到结核病具有一定的传染性，在标本采集时，要远离人群，尽量在空旷的环境中进行，通常情况下，采集痰液4毫升左右即可。利用市面上的项目痰盒，表明痰液所属患者的姓名、采集时间，采集的痰液应该是患者深呼吸后，从肺部深处咳出的痰液，一份合格的痰液标本，应该包括血痰、粘液痰、干酪痰，相关的研究表明，干酪痰的阳性率检测可以达到66%左右，血痰的阳性率在35%左右、粘液痰的阳性率为11%左右。根据痰液采集的时间，痰液标本可以分成三个类别，包括即时痰、晨痰、夜间痰，即时痰就是患者在就诊时，深呼吸后咳出的痰液，晨痰是患者早上漱口后，咳出的痰液，夜间痰是患者在检查前晚上咳出的痰液。
1.2 痰涂片制作
在痰涂片制作之前，要准备好干净的玻璃片，并且按照实验室的标准进行标号，按照一定的序列放置，然后打开痰液标本盒，操作过程中应该注意，不要产生气溶液等，确认标本可以使用后，用竹签等挑取一部分，放到玻璃片上涂抹均匀，形成痰膜后等待痰液自然干燥，用火焰固定，之后就可以进行染色检查。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆对于检测完的痰涂片，应该保留一段时间，如果因为染色情况较差导致的检查效果较差，可以直接再次进行涂片或染色，保证检查结果的准确性。
1.3 染色
痰液涂片干燥后，可以放入到染色架中，不同涂片之间的距离应该保持在1厘米左右，然后用滴管等加入石炭酸复红进行染色，注意滴加的液体盖满痰液，然后用火加热，直到出现水蒸气，保持五分钟左右的时间，确保染色的充分，如出现了染色液不足等情况，可以适当的继续滴加。在火焰加热的过程中，要严格控制断火的时间，防止液体沸腾，充分染色后，要冲洗玻璃片，用脱色剂脱色一分钟左右，如果一次脱色的效果较差，可以多次进行脱色，然后再次冲洗玻璃片，去掉脱色液。最后滴入亚甲蓝复染液，时间在半分钟至1分钟左右，然后用水冲洗，就完成了痰涂片的染色工作，可以进行显微镜的观察。
1.4 镜检
在实际的显微镜观察中，通常选择10倍的双目镜进行观察，将处理好的痰液涂片放到显微镜的载物台上，用卡尺进行固定，注意要痰膜朝上，先用四十倍的物镜，调整好光线后，控制焦距到能够观察到细胞形态，然后滴入2滴镜油，用一百倍的油镜仔细观察痰液涂片。在实际的观察过程中，应该由左至右观察，移动涂片到上端时，换视野由右至左的观察，通常情况下，需要五分钟左右的时间才能够观察三百个视野，在油镜的观察下，结核菌大多为杆状弯曲，染色情况较好的样本中，菌体会呈现出鲜红色。
结核病涂片的检查，需要形成完整的检查报告，为病情的诊断提供参考，同时了解病情的程度和传染性等，因此必须重视检查报告的填写工作，根据不同的分级报告标准，详细的记录观察到的各项内容。如萎腻式染色镜检结果分级报告标准如表1所示，对于检查完的痰涂片，要用二甲苯脱油，涂片干燥后放在标本盒中，放置在适宜的环境中。
表1 萎尼式染色镜检结果分级报告标准
报告内容菌数分级
抗酸杆菌阴性（-）300个视野内没有抗酸杆菌
报告抗酸杆菌菌数300个视野内发现8条以下的菌数
抗酸杆菌阳性（1+）100个视野内发现3条到9条菌数
抗酸杆菌阳性（2+）10个视野内发现1条到9条的菌数
抗酸杆菌阳性（3+）一个视野内发现 1条到9条菌数
抗酸杆菌阳性（4+）一个视野内发现10条以上的菌数
2.工作体会
2.1 痰涂片检查中需要注意的问题
通过多年的结核病痰涂片检查工作，发现标本的采集非常重要，很多患者首次检查时，不懂得如何咳痰，经常会将唾液和口水等，当作痰液的样本，从而严重的影响检查结果，出现了很多不合格的痰液标本，因此医护人员在痰液采集时，应该用肉眼或显微镜对痰液进行初步的判断，确定上皮细胞和白细胞的数量，保证痰液样本可用。
痰涂片检查的过程中，容易出现假阳性、假阴性、量化误差等，如染液中的沉渣和结晶等，容易被误认为结核杆菌，在初次检查之后，已经被染色的杆菌会出现褪色等，都会导致出现假阳性，要想避免这个问题，要提高操作人员的专业素质，加强技术人员的复训工作，对于假阳性的涂片要进行重新染色，然后进行相应的复检
【参考文献】
[1] 张泽尧,贾茂.90张痰涂片检查质量结果分析[J].实用预防医学. 2005(02):369.
[2] 韩晓蓉.肺结核痰涂片检查在控制项目实验中的探讨[J].中国社区医师(综合版). 2007(24):142-143.
[3] 李红梅,李芳,杜寿益.12973张结核病痰涂片检查结果分析[J]. 公共卫生与预防医学. 2009(06):74-75.
论文作者:吴梅芝
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第18期供稿
论文发表时间:2015/9/15
标签：涂片论文; 结核病论文; 杆菌论文; 标本论文; 阳性论文; 视野论文; 患者论文; 《医药前沿》2015年第18期供稿论文;