1.承德医学院附属医院 河北承德0670002；2承德医学院河北承德0670002
摘要 目的 研究补阳还五汤联合活血利水中药在大鼠脑出血后脑水肿中的应用价值。方法 将健康SD大鼠制成右侧纹状体出血模型。然后选取雌雄各半共60只脑出血模型鼠，采用随机数字表法，随机将其平均分为实验组（N=30）、对照组（N=30）。对照组活血利水中药对鼠进行治疗，实验组采用补阳还五汤联合活血利水中药治疗脑出血鼠。于治疗后6h、12h、1d、3d、7d对各组大鼠进行神经功能评分，并每个研究点取6只大鼠处死，取脑组织进行含水量的测定。结果 治疗后6h、12h、1d时两组鼠脑组织含水量差异无统计学意义（P＞0.05），而治疗3d和7d后差异有统计学意义（P＜0.05）；比较治疗后6h、12h、1d、3d的NIHSS评分，差异无统计学意义（P＞0.05），治疗7d天后两组NIHSS评分比较，差异具有统计学意义（P＞0.05）。结论 补阳还五汤联合活血利水中药比单独利用活血利水中药治疗脑水肿效果好，可更好改善预后。
关键词 中药；脑出血；补阳还五汤；脑水肿
【中图分类号】R547.2【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)09-0129-01
本研究通过联合活血利水中药，探究补阳还五汤在大鼠脑出血后脑水肿的治疗中的应用取得一定成果。现报告如下：
材料和方法
实验动物及预处理
本次研究所用的SD大鼠共60只，鼠龄在3~4月之间，体重约250~300克，由南方医科大学动物实验中心提供。实验前一周领取大鼠饲养，饲养期为一周，使大鼠完全适应实验室环境，排除新环境对实验结果造成影响。实验前统计各组大鼠鼠龄、体重、性别等数据并进行分析，差异无统计学意义（P＞0.05），数据具有可比性。
脑出血模型鼠制备
制备方法参考Rosenberg等报道[1]方法。先用10%水合氯醛（按350mg/kg计算），采用腹腔注射麻醉后常规备皮、消毒，俯卧位固定在定位器上。调节定位器高度，使前囟、后囟处于同一水平，做头皮正中切约10mm切口，用30%双氧水腐蚀颅骨上腱膜及颅骨外膜，暴露前囟。取前囟前0.2mm，中线向右3mm处钻一直径1mm小孔，缓慢进针直到尾壳核位置（约5.5mm）。用温水浴尾巴10分钟后取出擦干，酒精消毒，断尾通过尾静脉取血50μl并压迫止血，用微量进样器3~4分钟内以2μl/min缓慢注入，注血结束后留针10分钟后缓慢退针，骨蜡封闭钻孔，缝合皮肤。所有操作均无菌，术毕将大鼠放回饲养笼。
实验分组
采用随机数字表法将所有大鼠随机分成两组，对照组和实验组各30只，共60只。
实验和评估方法
实验方法
本次研究中实验组予补阳还五汤+活血利水中药灌胃，对照组予活血利水中药灌胃，均于造模前3天开始。建模成功后，分别于治疗后6h、12h、1d、3d、7d分批处死大鼠，每组每次处死6只，进行脑组织含量测定。
神经功能缺损评分（NIHSS评分）
评分参照Longa EZ NIHSS评分标准[5]对实验大鼠进行神经功能评价，共分为五个等级：0分，正常，无神经体征；1分，不能完全伸展左前肢；2分，行走时向左侧转圈；3分，行走时向左侧跌倒；4分，不能行走且意识水平下降。
脑组织含水量测定
各组每个研究时间点分别取6只大鼠，冰块上迅速取脑，去除血凝块后将左右两侧大脑放在湿润培养皿中，用电子天平测其湿重（精确到0.001g），然后置于100℃烤箱烘烤至恒重，并记录干重。大脑组织含水量计算采用干湿法：含水量=（湿重-干重）/湿重x100%。
统计和分析
计量资料用（+s）表示，组间比较采用t检验，计数资料比较用χ2检验，使用IBM SPSS 21软件进行统计学分析，取p<0.05认为差异有统计学意义。
结果
两组大鼠脑组织水含量比较
分别在实验进行的不同阶段对两组大鼠脑组织水含量进行比较，发现在治疗后6h、12h、1d时两组间脑组织水含量差异无统计学意义（P＞0.05），3d和7d的含水量差异具有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。
讨论
脑出血后脑水肿导致的高致残率和死亡率一直是困扰众多学者的问题。尽管目前对于脑出血后脑水肿的发生机制尚无完全统一的观点，但研究者已经就下列一些机制达成了一些共识[3, 4]：（1）脑出血后脑水肿的产生是一个多因素共同作用的结果，其中血肿占位、出血时间和出血部位是主要的因素。也有研究表明[5]，男性、低发病年龄、高血糖状态也会对脑水肿的发生产生促进作用。（2）凝血级联反应发生和凝血酶的形成，包括基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、水通道蛋白4（AQP4）[9]、MMP-2等。（3）红细胞裂解因素，使得血红蛋白及其代谢产物的毒性作用，认为可能是血红蛋白及其降解产物释放出的铁离子和血红素能够诱导自由基的产生，从而加速脑细胞的破坏，促进脑水肿的发生。（4）其他原因，如脑出血局部的炎症反应，使得补体系统被激活，形成膜攻击复合物（membrane attack complex, MAC）引起炎症和脑细胞溶解，血-脑脊液屏障被破坏，加重脑水肿的发生[6]。最新研究发现，粒细胞集落刺激因子（G-CSF）[7、8]可减轻脑出血致脑水肿，推测机制可能与其抑制MMP-9表达有关。
古文《医林改错》记载，补阳还五汤有补气、活血、通络功用，主治中风之气虚血淤症，如半身不遂、口角流涎、遗尿失禁、脉缓无力等症。随着近些年传统医学的发展，补阳还五汤等传统中药的应用得到了很好的发展。 现代药理学研究表明，补阳还五汤在提高脑缺血组织微血管抗损伤能力、缓解血管痉挛、增加微血管密度等方面具有比较确切的疗效，能够通过改变脑血流量来改善脑微循环障碍，从而促进血肿的吸收和脑水肿的消除及脑神经功能的恢复。这为本研究提供了坚实的理论基础。本研究发现补阳还五汤联合活血利水中药治疗脑出血后脑水肿比单独运用活血利水中药具有更好的疗效，推测其机制可能与抑制大脑组织AQP4的表达和促进神经功能恢复有关。
综上所述，补阳还五汤联合活血利水中药比单独使用活血利水方剂更好的治疗脑出血后脑水肿，对临床用药及治疗脑出血水肿具有指导作用。
参考文献
[1]Rosenberg G A, Mun-Bryce S, Wesley M, et al. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats[J]. Stroke, 1990,21(5):801-807.
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论文作者:1孟杰,2刘云霞,2吴晓光
论文发表刊物:《中国医院药学杂志》2016年9月
论文发表时间:2016/10/31
标签：脑出血论文; 大鼠论文; 水肿论文; 后脑论文; 水中论文; 统计学论文; 组织论文; 《中国医院药学杂志》2016年9月论文;