科美600测量乙肝标志物可疑结果探讨论文_郜 斌

郜 斌(宁夏第五人民医院检验科 宁夏 石嘴山 753000)

【中图分类号】R575.1【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2015)07-0425-01科美(CHEMCLIN)600

全自动化学发光仪对乙肝标志物进行定量检测,检测过程中常会遇到一些可疑结果,包括表面抗原“灰区”结果,“矛盾”结果及少见横式。虽然“灰区”是乙肝定性检测中的术语,但在乙肝定量检测中也常出现参考值上限“临界浓度”周围的检测值,可称为临床诊断“灰区”,所谓“矛盾”结果就是抗原与相应的抗体同时阳性的结果,由于可疑结果可能导致误诊及医患纠纷,因此对科美600定量检测乙肝标志物时出现的可疑结果进行了分析探讨。1、材料与方法: 1)材料,为了便于表述,定义HBsAg为1,HBsAb为2,HBeAg为3,HBeAb为4,HBcAb为5,阳性用“+”表示,阴性用“-”表示,例如:“1+5+”表示HBsAg和HBcAb为阳性,其他两对半指标均为阴性,以此类推。

收集乙肝标志物(HBsAg)定量检测中表面抗原测定值0.50ng/L~2ng/L范围内的标本52例,其中灰区阳性23例,灰区阴性29例[“矛盾”结果标本61例,其中“1+2+”52例,“3+4+”9例,罕见模式标本41例,包括:“2+4+5.”29例,“2.4+5.”12例、2)方法:(1)表面抗原灰区标本的检测。用中和试验将表面抗体中和液与表面抗原灰区标本等量混合,37℃孵育过夜,中和前后标本使用ELISA方法测量,标本被中和前后的A值差≥50X,为阳性,否则,判为阴性。

同样方法将“矛盾”结果确认。

(2)罕见模式标本的检测。用ELISA进行双孔复查,质控品五点定标,操作及结果判断严格按说明书进行.对复查后仍罕见模式标本的各阳性指标及双孔复查结果一阴一阳的指标,参照中和实验确认。2、结果1)、ABsAg灰区标本检测结果HBsAg灰区阳性标本经中和试验确认HBsAg阳性22例,阳性率95.65%,表面抗原灰区阴性标本有2例HBsAg经中和试验确认阳性;灰区阳性有1例经中和实验确认为阴性见表1表1HBsAg灰区标本中和实验确认结果

3讨论对表面抗原弱反应性的确认实验是中和实验,如采用ELISA法测定中和前后中和液的OD值变化,由于表面抗原“灰区”结果浓度较低,处于临界值附近, OD值变化较小,可能无法准确质量分析及客观判断,而采用科美600准确的确认表面抗原阴阳性,抗原灰区标本中和实验结果表明,科美600具有较高的灵敏度(95.65%)。2种方法检测HBsAg的灵敏度依次为科美600(0.3ng/ml)>ELISA法(0.5ng/ml),因此本实验HBsAg灰区标本用中和实验法检测检出率较低,用于复查标本易导致漏检,因此,只能用于复查HBsAg强阳性的可疑结果。

“矛盾”结果标本的中和实验结果表明:“1+2+”标本中确实同时存在HBsAg和HBsAb,据文献报道,交叉反应可致抗原抗体双阳性,试验中用中和实验加以确认的排除此类情况。以往观念认为同时检出抗原与相应的抗体是矛盾的,但有研究证明有多因素可致HBsAg和HBsAb同时阳性。1)乙肝病毒感染初期,体内免疫应答产生HBsAb,此时游离的HBsAg,HBsAb及其免疫高全物同时存在,但这种情况往往是一过性的。2)慢性乙肝患者体内HBV野毒株在被动免疫(注射疫苗或HBIG)压力FS基因突变,在产生HBsAb情况下,变异株仍能免疫逃逸; 3)野毒株感染痊愈或被动免疫的,再次感染S区基因突变的变异株,由于变异株S区抗原性的改变,使原有的HBsAb不能发生中和,而e抗原和e抗体同时阳性的标本经中和试验确认,HBeAb均为假阳性。

对于HBsAg和HBsAb同时阳性的情况,有学者以抗原为阴性报告,以免引起纠纷,应据实出具报告。同时加强对临床医生和患者的相关知识宣传,这对临床医生了解患者体内HBV变异状况及调整治疗方案均有帮助。

论文作者:郜 斌

论文发表刊物:《健康必读》2015年第7期供稿

论文发表时间:2015/8/17

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