食品沙门氏菌检测论文_苟丽华

食品沙门氏菌检测论文_苟丽华

苟丽华

阆中市疾病预防控制中心 四川南充 637400

沙门氏菌为肠道细菌科,即引发食物中毒细菌。根据既有研究结果表明,因沙门氏菌导致的食物中毒病例占比较高,所以对食品中沙门氏菌检测的重要性逐渐突显出来,并且备受关注。而对食品沙门氏菌的检测需从多个角度展开分析,以解决食品安全问题。

1 沙门氏菌有哪些生物学特性?

沙门氏菌会对人和动物的健康带来严重危害,是十分常见的致病菌。此病菌的型别诸多且抗原复杂,其对于外界环境的抵抗性较为明显,而且能够在食品中存活较长时间,在粪便内的存活时间达到1-10个月之久。

沙门氏菌的传播路径一般包括肉产品、禽和蛋等,在身体状况的基础上,还和菌株血清型存在一定关联,会严重危害老人与孩童,或者是免疫有缺陷的人。所以说,有必要对容易被污染的食品进行分类型地管理,以免沙门氏菌对我们的身体健康造成负面影响。

2 检测沙门氏菌的国标方法如何?

现阶段,根据国家规定对沙门氏菌进行检测的方法被称作是国标方法。而这种检测方法的步骤较为繁杂,需经过增菌→增菌→分离→生化试验→血清学检定等多个环节完成。正是因为国标检测沙门氏菌的程序复杂,所以需要耗费较多的时间与精力,一般在4-7天之间才能够获得所要的检测结果。

3 采用分子生物学方法检测沙门氏菌

第一种,扩增片段长度多态性技术的应用。这种对沙门氏菌进行检测的技术相对便利且快速,可以获得稳定且可靠性较高的结果,因而在检测微生物方面的应用较为常见。在众多研究中,针对沙门氏菌株展开了扩增片段长度多态性指纹分析,并了解到血清型的差异所获得的扩增片段长度多态性指纹图也有所差异,具有较高的分辨率,进而对不同的菌株进行有效地区分。

第二种,聚合酶连反应技术的应用。聚合酶连反应技术本身敏感性与特异性较为突出,且应用十分便捷,同样被使用在检测微生物方面。大部分研究者通过对聚合酶连反应技术的合理运用,开展了沙门氏菌的检测工作。在对聚合酶连反应技术进行应用的过程中,对食品中的沙门氏菌进行检测,在和增强化学发光反应相互结合的基础上,即可实现交杂扩增产物的目的,最终实现了检测方法的成功研发。

第三种,核酸探针技术的应用。在成功克隆特异性探针的基础上,被应用在检测食品沙门氏菌的过程中。其中,选择使用的探针具有较高的敏感性,并且在增菌两天以后,每毫升所能够检测到的细菌数量已经达到了108个。然而,所使用的探针在放射性同位素标记后,要求在特定实验室内才能够顺利开展,因而使得此检测技术的应用受限。基于核酸杂交所产生的比色计技术所具备的敏感性和放射性同位素检测方法是一致的,且不存在辐射问题。

第四种,基因芯片技术的应用。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆通过对寡核苷酸芯片方法的运用,对沙门氏菌的致病性展开系统分析,并发现在对细菌毒力因子进行运用的基础上,可以对致病菌进行必要地检测。而且,在对基因芯片技术应用过程中,检测未知菌属的时间只要3个小时。

第五种,噬菌体裂解技术的应用。对于噬菌体而言,能够实现对细菌特异性裂解的目的。通过对沙门氏菌噬菌体的运用,可以完成未知细菌裂解试验,且沙门氏菌裂解率远远高于其他细菌。

4 采用免疫学方法检测沙门氏菌

免疫学方法同样是对细菌进行有效鉴别的常用方式,一般会借助特异性抗原抗体反应达到检测目的。该检测方法的灵敏度相对较高,且抗体与抗原结合反应的时间不长,所以被广泛应用于食品微生物的研究以及检测过程中。

第一种,免疫荧光标记技术的应用。此检测方法根据抗原抗体特异性反应的基本原理,在已知抗体或者是抗原中标记荧光素并获取荧光抗体。将其当做探针对相应抗体亦或是抗原展开系统检测。在此基础上,基于激发光照射的条件下,荧光素就会产生明亮的荧光。在这种情况下,即可使用显微镜对含有荧光所产生的组织细胞进行观察,进而对抗体亦或抗原进行准确定位,在定量分析的基础上,就能够对沙门氏菌的实际含量进行确定。目前阶段,很多食品采用这一技术都检测出沙门氏菌。而根据具体的检测结果,可以证实此检测技术获得的结果具有较高的准确率且可靠,便于操作,不会出现假阴性和假阳性的反应。

第二种,自动酶标免疫技术的应用。该技术检测和鉴定的结果已经趋于成熟,并且获得了美国部门认同。在我国,对该技术进行运用的基础上,可以在较短的时间内对食品当中所含致病沙门氏菌进行检测。并根据检测的结果证实,这一检测技术具有很高灵敏度,且操作相对方便,检验与分析样品的周期明显缩短,适用于检验食品沙门氏菌。

第三种,免疫磁性技术的应用。如果食品当中所含致病菌量不多,仅采用常规方法很难将其分离出来。所以,在应用免疫磁性技术的过程中,即可在短时间内有选择性地在悬液中分离目的菌。在肉制品、蔬菜以及乳制品中引入免疫磁性技术,可以成功分离出其中所含的沙门氏菌。较之于常规的方法,免疫磁性技术不仅可以将致病的沙门氏菌分离出来,而且可以对受损把细菌成功捕获,这是常规法无法实现的。

第四种,斑点酶联免疫技术的应用。通过对该技术的使用,可以对抗体或者是抗原展开定量与定性检测,不仅方便快捷,同样具有一定的特异性与灵敏性,更容易检出阳性反应。在操作的整个过程中,无需选择特殊仪器设备,可在短时间内完成检测,一定程度上增强了检测工作质量与效果,人力资源与物力资源节省效果明显,具有较高的推广应用价值。

第五种,酶联免疫技术的应用。对于酶联免疫的基本原理而言,主要是在固相载体表面实现抗体或者是抗原结合的目的,随后将酶标记抗体或抗原、试样等加入其中,确保混合物能够和结合后的抗体、抗原复合,最终形成复合物。在洗涤的作用之下,去除反应液当中的其他物质。在底物加入以后,在酶的催化作用下变色,在对有色物进行分析的基础上,就可以对物质含量加以确定。

第六种,斑点免疫金渗滤方法的应用。这种方法的标记物是胶体金,在对抗体标记后结合纤维膜样品。若样品当中含有沙门氏菌,则会出现金标抗原和抗体复合物,并在硝酸纤维膜上滞留且显色。这样一来,即可保证检测结果的准确性。这种检测操作的方法在实际使用中,不会对仪器提出特殊性的要求,而且检测速度较快,不需要掌握较强的操作技能。

因沙门氏菌会引起严重的食物中毒问题,所以要想保证食品安全且健康,有必要给予其检测工作高度重视。只有这样,才能够使我们的生活更健康。

论文作者:苟丽华

论文发表刊物:《中国蒙医药》2019年第4期

论文发表时间:2019/8/8

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