生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析论文_陈红芸1,王文新2

生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析论文_陈红芸1,王文新2

(1新疆和田地区皮山县人民医院 新疆和田 845150)

(2新疆喀什地区疏勒县人民医院 新疆喀什 844200)

【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2015)11-0207-02

近年来,酶循环法测定血清总胆汁酸(TBA)已经被临床广泛采用,该法适合于全自动生化分析,操作简便、快速,且检测准确率高,具有灵敏度高、对仪器管道无污染等优点,是应用最广的血清TBA检测方法。但是应用循环酶法检测血清TBA时,与生化试剂接触后,易产生交叉污染,而导致检测结果的准确率降低。本试验通过分析其干扰因素及寻求消除干扰的有效措施。现总结实验结果报告如下:

1.资料与方法

1.1 标本来源

选取血清TBA作为研究项目,血清标本中无溶血、黄疸及脂血。

1.2 仪器

选择全自动生化分析仪(贝克曼AU5800)。

1.3 检测试剂

检测试剂为澳林常规生化试剂,ALT、GGT、TP TG、UA、TP、LDL-C。

1.4 方法

1.4.1仪器准备 先浸泡清洗好全自动生化分析仪的配套工具,如对比色杯、搅拌棒、试剂针,并对仪器进行校准,及时更换或调整仪器以达到标准使用要求,以排除仪器本身原因对结果的影响。

1.4.2标本 随机收集当天新鲜标本,并制成混合血清,对每一份均进行5次血清单独连续5次TBA测定。取混合血清,分别各项组合项目UA/TBA,TG/TBA,LDL-C/TBA等组合,各进行5次测定,最后测定TBA水平。然后对反应杯、试剂针和搅拌棒等进行清洗,按规范要求设置特殊清洗程序。选择300mlHCL(1M)→300mlNaOH(1M)作为反应杯、试剂针及搅拌棒等用具的清洗,尽可能减少污染。然后将UA、TG、LDL-C试剂作为标本重新测定TBA,同样为5次,再按特殊清洗程序对各项组合项目进行重测,同样各测定5次,取平均值,做好测定值结果的记录,计算相应的平均值。

1.5 统计学处理

本实验数据应用SPSS17.0软件进行统计学分析,计量资料用(x-±s)表示,用t检验计量资料,用χ2检验计数资料,P<0.05,差异具有统计学意义。

2.结果

测定混合血清中血清TBA含量,其平均值为(8.16±0.01)μmol/L。

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2.1 未处理前各项组合项目的测定结果

未处理前测ALT、GGT、TP、TG、UA、TP、LDL-C项目中的血清TBA进行检测的结果与正常单独测定的TBA的结果有明显的差异,有统计学意义(P<0.05)之外,存在系统误差;TG、CHOL项目试剂对测定TBA结果有均统计学意义(P<0.05),其余项目无统计学意义(P>0.05)。各项检测值结果以及与单独测定的血清TBA数值之间的统计学处理结果:①UA/TBA,检测血清TBA均值473±10.4μmol/L,t值12.7,P值<0.05;②TG/TBA,检测血清TBA均值218.57±6.44μmol/L,t值8.0,P值<0.05;③LDL-C/TBA检测血清TBA均值185.01±5.16μmol/L,t值6.6,P值<0.05;④ALT/TBA检测血清TBA均值8.16±0.04μmol/L,t值1.3,P值>0.05;⑤GGT/TBA检测血清TBA均值8.17±0.06μmol/L,t值1.4,P值>0.05;⑥TP/TBA检测血清TBA均值8.15±0.08μmol/L,t值6.6,P值>0.05;

2.2 特殊冲洗后各项组合项目的检测结果

三项具体结果:①UA/TBA血清TBA均值8.24±0.01μmol/L,t=1.61,P值>0.05;②TG/TBA血清TBA均值8.21±0.02μmol/L,t=1.57,P值>0.05;③LDL-C/TBA检测血清TBA均值8.18±0.01μmol/L,t=1.52,P值>0.05;差异显示无统计学意义。

3.讨论

总胆汁酸(TBA)是胆固醇代谢的产物,其生成和代谢与肝脏关系十分密切,血清中TBA水平是反映肝实质损伤的一项重要指征,血清TBA测定对慢性肝病、肝硬化、酒精肝以及胆汁淤积的诊断、预后和疗效评估方面经常优于多项肝酶学指标,因此具有重要的临床应用价值。当前酶循环法则测量血清TBA已经被大众所知,且也被广泛应用了。

3.1 干扰因素

在使用全自动生化分析仪过程中,不同的试剂会存在着相互干扰的现象,不同品牌的试剂对某个项目的干扰并不一致,这可能与不同品牌试剂本身成分或含量不一致有关。携带污染通常来源于试剂针和反应杯的残留物,用常规的清洗程序,难以彻底清洗干净某些特殊试剂的化学成分,测定TBA就是一个明显的实例。如果前一分析项目的试剂成份中含有对后一分析项目中有干扰的成分,而待测项目的浓度与之相比又很微量时,极易造成分析项目之间的携带污染,干扰检测结果 通过以上研究结果也证明了这一点。通过试验研究结果可知,常见的澳林生化试剂UA、TG、LDL-C是干扰循环酶法测定血清TBA结果的重要因素。但在进行血清TBA测定时,难免会接触到这些常规生化试剂若,处理不当则易是,污染物质渗入,而产生交叉污染现象,干扰测定结果。

3.2 改进措施

为保证测定结果不受干扰,提高测定的准确性,从最大程度上减少和避免出现测定值偏高的情况,应采取一下有效的改进措施:①应对反应杯、试剂针、及搅拌棒进行认真彻底清洁,力求从源头上控制干扰因素。例如研究中使用的碱性清洗液能有效清除干净这些用具上的残留物,可借鉴使用;②对对各检测项目的先后顺序应进行科学、合理调整,即设置合理的特殊冲洗程序。这要求检测人员必须熟练掌握各种试剂的化学成分以及成分之间的化学反应作用,避免出现前后两种成分发生作用而对检测结果产生干扰的情况。

综上所述,在实际的检测过程中,易出现交叉错位污染的情况,检测人员应严格按照规范流程进行各项检测工作。

论文作者:陈红芸1,王文新2

论文发表刊物:《心理医生》2015年11期

论文发表时间:2016/3/14

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生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析论文_陈红芸1,王文新2
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