曹阳虎1黄良永2
1湖北江汉油田总医院药学部湖北潜江433124；
2湖北医药学院附属太和医院药学部湖北十堰442000
【关键词】绵茵陈；配方颗粒；绿原酸；含量测定
【中图分类号】R912
【文献标识码】B【文章编号】16748999(2013)12013001
茵陈为菊科植物滨蒿 Artemisia scoparia Waldst. et Kit. 或茵陈蒿 Artemisia capillaris Thunb.的干燥地上部分。春季幼苗高 6 10cm 时采收的习称“绵茵陈”；味苦、辛，微寒；归脾、胃、肝、胆经；具有清湿热，退黄疸之功效，临床常用于黄疸尿少，湿疮瘙痒和传染性黄疸型肝炎的治疗［1］。现代药理研究发现茵陈主要具有: 利胆，保肝，调脂降压及降血糖，抗动脉粥样硬化，抗肿瘤，抗病原微生物，细胞保护，解热镇痛抗炎，耐缺氧，抗氧化等作用［2］。文献报道［3］，绵茵陈有效成分主要是绿原酸和对羟基苯乙酮。而绿原酸是绵茵陈的主要生物活性成分之一［4］。所以药典以绿原酸为含量测定指标控制绵茵陈的质量。绵茵陈配方颗粒是以绵茵陈为原料，经水煎煮提取、浓缩、喷雾干燥而制成的颗粒；临床已广泛用于配方。本文以绿原酸为指标，采用高效液相色谱法测定绵茵陈及配方颗粒中绿原酸的含量，比较二者含量高低，考察从药材到配方颗粒的转移率，为改进绵茵陈配方颗粒的生产工艺和提高临床疗效提供依据。
1仪器与试药
戴安 Ultimate3000高效液相色谱仪(美国戴安公司，低压四元梯度泵、自动进样器、多波长紫外检测器、柱温箱)；变色龙色谱工作站（美国戴安公司）； TP150超声清洗机(北京天鹏电子有限公司)；GWA10超纯水机（北京普析通用）；AUW120D电子天平(十万分之一，日本岛津)；甲醇为色谱纯；水为超纯水；其它试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件及样品的制备［1］：对照品储备溶液的制备：精密称取绿原酸对照品（置五氧化二磷干燥器中，减压干燥12h）164mg，置100ml棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀；即得（每1ml中含绿原酸164μg，在10℃保存）。
供试品的制备：取绵茵陈和其配方颗粒在60℃干燥至恒重，研细(过二号筛)，取绵茵陈粉末和配方颗粒粉末各1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇 50ml，称定重量，超声处理（150W，50HZ）30 分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，过滤（045μm滤膜），精密量取续滤液5ml，置10ml 棕色量瓶中，加 50%甲醇至刻度，摇匀，即得。
22标准曲线及线性关系： 精密吸取绿原酸对照品储备液05、10、20、50、10、15、20ml置20ml棕色量瓶中，加50%甲醇定容至刻度，制成浓度分别为41、82、164、41、82、123、164μg.ml1的绿原酸对照品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以绿原酸的浓度(X)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标，绘制标准曲线；Y=06246+06226X（r=09999，n=7）。
23精密度考察：分别取标准曲线项下82μg.ml1绿原酸对照品溶液，重复进样5次，每次10μl，测定峰面积，计算RSD为0021%，精密度良好。
24加样回收率试验：取已知含量的配方颗粒粉末05g（批号1112001S）和绵茵陈粉末065g（批号20111101）各6份，精密称定，分别精密加入绿原酸对照品贮备液（临用新配1512mg. ml1）2mL，按“27”样品测定的方法，分别测定绵茵陈和配方颗粒的加样回收率，得平均回收率分别为9782％（RSD118％）和9831％（RSD048％），结果见表1。
3讨论
31绿原酸为绵茵陈的主要生物活性成分，药典规定绵茵陈中的绿原酸的含量按干燥品计算不得低于05%。由表2含量测定结果可知，绵茵陈的平均含量为064%，符合规定；而配方颗粒中绿原酸的平均含量按原药材换算仅为0051%，含量只有药材含量的十二分之一，与其标示的浓缩倍数（10倍）不符，转移率很低。
32绿原酸是一种有机酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物；在水中的溶解度为 4%，易溶于乙醇、甲醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂；由于绿原酸的性质决定了其可以利用乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂从植物中提取出来，但是由于绿原酸结构的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热。原配方颗粒生产工艺［5］是经水煎煮提取、浓缩、喷雾干燥而制成；煎煮和浓缩过程的高温对绿原酸的含量影响较大，可能是转移率很低的主要原因之一。文献报道［6,7］，茵陈药材产地不同、采集时间和贮藏方法不同，致绿原酸的含量高低相差较大。不同的提取方法也直接影响绿原酸的提取率；采用50%甲醇超声提取的方法，绿原酸的提取率最高［8］。所以，若要提高配方颗粒中绿原酸的含量，必须在严格控制原材料的来源的同时，改进配方颗粒的生产工艺，制定配方颗粒的质量控制标准。
参考文献
［1］ 中国药典［S］，2010年版，一部，205
［2］孙涛，陈炜. 茵陈药理作用研究进展［J］.中药与临床.2010,1(3):5961
［3］常新全，丁丽霞.中药活性成分分析手册［M］.北京：学苑出版社.2002,16231624
［4］胡彦武，关颖丽，姚慧敏等.野生绵茵陈和花茵陈中绿原酸含量比较［J］.中国实验方剂学杂志.2011,17(9):7880
［5］陈培胜，刘法锦，郭用庄.新技术在中药配方颗粒生产中的应用［J］.世界科学技术中药现代化.2002,4(5):66
［6］赵祥军，马艳芹，黄正明.高效液相色谱法测定不同产地茵陈中绿原酸的含量［J］.解放军药学学报.2007,23(6):466470
［7］宋小军，张永欣，张颖等.绵茵陈药材中绿原酸定性定量方法研究［J］.中国中药杂志.2002,27(4):267269
［8］刘影，于治国，袁璐等.茵陈药材中绿原酸的含量测定［J］.西北药学杂志.2006，21(5):207209
论文作者:曹阳虎1黄良永2
论文发表刊物:《中医学报》2013年12月第28卷供稿
论文发表时间:2014-3-21
标签：茵陈论文; 颗粒论文; 配方论文; 含量论文; 甲醇论文; 精密论文; 干燥论文; 《中医学报》2013年12月第28卷供稿论文;