（双鸭山双矿医院检验科 155100）
乙型肝炎是发病率较高的传染病，中国是HBV的高流行地区，一般人群HBsAg携带率高达7.18%；现有慢性HBV感染者约9300万人，占全世界的1/4。实验室的诊断对于判断病毒复制程度、监测抗病毒治疗效果以及评估预后至关重要。随着人们对乙型肝炎病的认识的提高，越来越重视乙肝两对半的检测。在近几年的检测工作中我们发现，乙型肝炎标志物乙肝表面抗原（HBsAg）的酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测中，S/CO值（S标本的吸光度值、CO临界值）小于5的标本出现的比率越来越多。说明在我国的乙型肝炎病毒（HBV）感染人群中，有相当一部分血清HBV表面抗原（HBsAg）呈低水平存在。目前人们主要研究和治疗HBsAg阳性患者，而对于HBsAg弱阳性的研究及报道比较少[1].。由于HBV的感染率总体上呈下降趋势，因此对于HBsAg低浓度人群的发现和确诊有重要的流行病学意义和临床意义[2]。为此我们选用上海科华生物股份有限公司生产的ELISA检测试剂盒（灵敏度为0.50ng/ml），将2014年1月至2016年3月随访资料详细的102例HBsAg低值弱阳性乙肝患者的标本。做了乙肝两对半、核心抗体-IgM、HBV DNA含量、ALT和AST水平间的分析研究。研究机体针对HBV的免疫反应强度、HBV复制程度及肝细胞损害程度三者之间的关系，帮助临床医生更准确的诊断该疾病，并进一步判断患者病情、预后及指导抗病毒药物的合理应用。
1.材料与方法
1.1标本来源
102例HBsAg弱阳性试验标本，筛选自2014年1月-2016年6月本院门诊及住院的患者。年龄26到81岁，平均年龄50.15岁，其中男性63例，女性39例。
1.2试剂
试剂采用上海科华股份有限公司生产的乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝核心抗体、抗HBcIgM、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）检测试剂盒；HBV DVA集合酶链反应（PCR）检测试剂采用北京博北京博晟时代科技有限公司生产的试剂；所有试剂均在有效期内严格按照标准操作规程进行检测。HBsAg质控品（2ng/ml）由黑龙江省临床检验中心购入。
1.3仪器
试验中所用全自动酶联免疫分析仪为瑞士生产的帝肯RMP150型。基因扩增仪为FQD-66A型；全自动生化分析仪为日本东芝120型。
1.4方法
采用ELISA方法，在门诊及住院患者免疫常规中检测HBsAg含量S/CO值（其中S为样本A值，CO为试剂盒提供的CUT-OFF值，S/CO>≥1.00的样本判断为阳性，S/CO<1.00判断为阴性）。收集得到弱阳性标本102份（初测得到弱阳性标本，需经再次复核仍为弱阳性的标本）。平均年龄50.15，男63人，女39人。对弱阳性标本进行两对半及抗HBc IgM检测（采用ELISA法）；HBV DNA PCR定量检测；同时检测ALT，AST的值。
2、结果
2.1在HBsAg的ELISA法日常检测中，有时会遇到少许标本的S/CO值为小于5的标本，其中部分患者因血清纤维蛋白收缩差异，在标本首次检测时（即血液离体约1小时），结果为弱阳性，但再次复查时，结果为阴性。但另有部分标本，经多次复查，HBsAg的S/CO一直在1-5，此即为真HBsAg弱阳性[3]。目前，人们主要研究和治疗HBsAg阳性患者，而对HBsAg弱阳性的研究和报道较少，这应引起临床医师的重视。
2.2 102例低水平HBsAg阳性试验标本的两对半、抗HBC-IgM、HBVDNA、ALT、AST检测结果见表一
2.3 HBsAg弱阳性谱型以A型小三阳为主，占80.39%（82/102）。表示处于乙肝慢性期，病毒复制（繁殖）弱，传染性低；102例HBsAg弱阳性患者首次检测抗HBC-IgM阳性率为8.8%（9/102）。5例患者在2-4个月后复查，HBsAg为阴性，其他项仍为阳性；B型12例为HBsAg弱阳性、抗HBc阳性，肝功能一半正常，表明患者携带乙肝病毒，处于乙肝急性早期，传染性低；6例HBV-DNA异常患者，有3例是肝癌患者，且均具肝病（肝硬化、肝腹水或肝癌）家族史。6例HBV-DNA阳性占5.88%（6/102）；肝功异常占16.67%（17/102）。
3、讨论
血清中HBsAg呈低浓度存在，其原因可能是多方面的。有报道认为，HBsAg低值弱阳性的HBV感染，可能与HBsAg低水平表达、HBV的整合、含HBV循环复合物的形成等有关，并与来自宿主方面的诸多因素有关[4，5]。但主要因素是大多数HBV感染患者随着年龄增长，HBV逐渐清除，HBsAg逐渐下降，并伴有血清学转换。本实验的102例HBsAg低值患者平均年龄大于50岁，有60%以上患者有肝炎史或接触史。
在急性肝炎恢复期和慢性迁延型肝炎患者中出现抗HBc IgM，说明部分患者病情尚未完全恢复或稳定，仍有少量病毒复制。HBV复制与肝癌发生发展有关，不能低估肝癌患者中低低度HBsAg的价值。无症状携带者中的HBsAg低含量携带者，可能为整合于肝细胞中残余的HBsAg基因片段的低度表达。慢性乙肝宿主由于细胞免疫功能处于抑制状态而对HBV的免疫应答减弱，临床上很少有病例能达到临床治愈标准。HBV感染者血清的感染性与Dane颗粒的多少有关。一般情况下HBsAg滴度越高HBV感染可能性越大，其传染性越强。但随着分子生物学技术的发展以及基因突变，发现乙肝病毒血清标志物的检测结果和HBsAg滴度的高低不能准确反应体内病毒复制的状况及其传染性。近年的研究发现，低滴度的HBsAg甚至HBsAg阴性者血清中检测出HBV DNA已不是罕见的现象，在我国高达3%。[6]只是复制减缓和部分出现病毒基因变异。这样的感染更易造成伤害，严重者可发展为肝硬化和肝癌。因此，在临床工作中，不仅要应用乙肝血清标志物来判断HBV是否在体内复制，更要结合PCR检测技术来测定HBV-DNA含量，以准确判断HBV在体内的存在情况。本实验中病毒复制者6例占5.88%，按此比例分析：表面抗原弱反应者也应受到重视。应对HBsAg弱阳性者进行随访，并加做两对半、抗HBc IgM、HBV DNA 和肝功能检测，以便及早防治、阻止病情发展。
参考文献
[1]姜玉章，余亚新。HBsAg低值弱阳性的检测及其临床意义[J].中华微生物和免疫学杂志，2001，21（3）：310.
[2]楼 滨，周志东，范 剑，等。血清乙型肝炎病毒表面抗原检测弱反应结果的确认方法及其评价[J].检验医学，2005，20（6）：543-546
[3]岳希全，石 宏，李 迎。ELISA法检测HBsAg影响结果的重要因素的分析【J】.中国试验诊断学，2007，11（2）：213-215.
[4]Hou J，Wang I，Cheng J，et al.Prevalence of naturally oc-curring surface gene variants of hepatitis B virus in nonim munized surface antigen nehative Chinese carriers[J].Hepatology，2001，34：1027-1034.
[5]Coursagct P，Yvoonnet B，Bourdil C，et al.HBsAg positive reactivity in man not due to heapttis B vitus [J].Lancet，1987，12：1350-1358.
[6]姚桢。分子乙型肝炎病毒相关病学[M]。北京：医药科技出版社，1998.22-55.
论文作者:刘亚军
论文发表刊物:《航空军医》2018年6期
论文发表时间:2018/6/12
标签：乙肝论文; 标本论文; 患者论文; 血清论文; 阳性论文; 弱阳性论文; 乙型肝炎论文; 《航空军医》2018年6期论文;