(2苏州吴中区木渎镇卫生院药剂科 江苏 苏州 215000)
【摘要】 目的:分析探究在中药鉴定中生物工程技术所发挥的具体作用,促进中草药鉴别领域的技术进步。方法:选取同属而不同科目的中药材,运用各种现代化生物工程技术技术(如电泳技术、生物免疫技术等)进行实验,同时结合相关文献资料对实验结果进行分析,以完成此次研究。结果:运用现代化的生物工程技术鉴别各中草药与肉眼直接区别各种药材的方式相比具有显著的优势,其差异与统计学意义相匹配(P<0.05)。结论:现代化的生物工程技术在中医药鉴别领域的应用实现了区别对各中草药技术的质的发展,增强了研究结果的准确度,应该得到推广运用。
【关键词】现代生物技术;中药鉴定
【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752(2016)27-0308-02
中医药作为华夏民族的瑰宝,蕴含了历代人无穷的智慧,是几千年来人们探索、实践的成果,是历史的积淀。中药的种类非常多,每一种药材的功效同它的品质之间是紧密联系在一起的;为了确保药材在使用的过程中的可靠性并发挥其最大的功效,我们需要制定严格的标准,在筛选过程中对它的真假好坏情况严格把关。进行判定的中草药样本主要包括整株的中药以及块状或碎末状,其形态较为复杂。性能及状态的鉴定、对出产地的鉴定以及运用显微镜对其进行判定等方式为比较普遍的鉴定手段,它们在确保中草药使用过程中的安全性和有效性上发挥了巨大的作用,在促进中医药鉴定学的进步方面具有非凡的意义。最近几年,当代生物工程科技不断完善,催生了很多新的科学理论知识和实验方式,并在中医药的鉴定上得到普遍的运用。本文主要针对不同的生物工程技术展开研究和讨论,详情如下:
1.电泳技术的运用
1.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)
中草药主要是由蛋白质、多种人体所需的氨基酸、生物性碱以及不同种类的酶等集中成分所组成,这些组成要素的电荷及分子的性状与数量不尽相同。通过电场力的催化,在一段时间后,不同成分的电泳方向、时速及里程也会发生不同程度的变化,此时多使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法对蛋白质的谱带具体数量、宽度情况、位置信息和经染色后的着色深浅状况进行仔细的分析从而得到关于该药材的详细资料以便完成对其的鉴别。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆部分研究人员通过聚丙烯酰胺凝胶电泳这一科技,针对几种外观近似而药性不同的苋科类中药展开了可溶蛋白电泳情况的探究实验,实验结果表明蛋白质谱带性征差异显著(P<0.05),有利于精确判定各中苋科类的草药。对中药中蛋白质的电泳图的分析通常采用直接观察对照的方式,会对探究结果的精确度产生一些干扰。
1.2 高效毛细管电泳技术( HPCE)
高效毛细管电泳技术是最近几年兴起的一种物质分离的方法,主要用于生物活性物质的分离。这种技术具有高效快捷、灵活度好、识别率高等特点,药材鉴定中普遍用于检测生物性碱等有机化合物。相关研究表明高效毛细管电泳技术能有效区别中药榧子。随着高效毛细管电泳技术的运用,中药鉴别技术有了进一步的发展。
2.生物免疫技术的运用
生物免疫技术是指通过抗原抗体的特异性相结合而生成的抗原抗体化合物来检查中药药品中的特异性蛋白从而分辨中药的真假的技术。各种药材中都含有数量众多的抗原大分子物质,生物免疫技术则是通过这些大分子物质制备特异性抗体来对药材中的各种成分进行鉴别。有研究者据此采集鹿身上的样品进行了研究分析,该研究发现抗梅花鹿血清与其他鹿的心脏组织之间无凝聚现象发生,且鹿的样品在经过小于80摄氏度的高温之后依旧不会对辨别的结果产生影响,这种方式还具有用时短、精确度高等特点。
3.DNA分子遗传标记技术的应用
学术界人士对生物分子学领域的相关研究表明,中草药自身基因的复杂程度同与之相关的生物多态性之间存在异常紧密的联系。在很小的标准下查出基因的多种形状,这种方式比在形状、小的部位和化学方面观察基因更科学。而基因多态性可在分子水平上检测,它比在形态、组织和化学水平上检测更能代表其变异类型的遗传标记。DNA分子遗传标记技术主要是针对物种的基因进行检测,因此很大程度地降低了外界条件、药材的产出地及样本自身条件等因素对判定结论的干扰,从而保证了鉴定结果的可信度。
3.1 限制性片断长度多态性分析技术(RFLP)
不同的植物具有不同的DNA,哪怕是一个极其细小的差异也会使不同植物的基因产生巨大变化。实验中,我们先使用限制性的内切酶对各药材的DNA进行分解,然后展开实验并仔细研究实验结果,从而分辨出不同于其他植物的性征。部分学者通过限制性片断长度多态性分析的方式针对不同产地的人参的基因展开研究,发现了它们的特殊征象。另外,其他国家利用此项科技鉴别其他植物也取得了显著成效。
3.2 多聚酶链反应测序技术(PCR)
多聚酶链反应测序技术是指在人造自然条件下基因复制中外界酶促进机体合成特异性核酸片断的技术。以即将分裂的DNA做模型,介质为非自然存在的寡核苷酸,运用聚合酶促使其发生化学反应,于外部环境中完成分裂增生。该方法高效方便、灵活性好。DNA在草药生产和保存中容易失去,而这一手段刚好可弥补因组分流失而影响检测结果的问题。
3.3 随机引物PCR技术(RAPD)
将未经检测的DNA为原型,任意选取一组寡核苷酸为介质,开展多聚酶链反应,因为原型与介质嵌合位置的差异,使得增生后的基因数量和长短不一。实验集取5种真假混合的同属药植,通过随机引物方式找出了他们之间明显的不同。随机引物PCR技术(RAPD)能够独立的检验出各种DNA的不同形态,特别是在当今社会,仍然有相当大一部分的中草药的基因排列方式没有被人类研究所发现,尤其在对药材的种类的探究领域,随机引物PCR技术相较于其他的分子遗传标记方式拥有显著的优势,值得我们推广使用。
3.4DNA序列标记技术
因为PCR的DNA最先选择的检查顺序的方式的检查顺序的引出物是用PCR增加的产物,大大的增加了DNA顺序排列判断的功效。现在用在DNA检查顺序的基因,大多都是植物的叶绿体中的各种基因。动物的线粒体中的各种基因。研究人员采用专一的引出物对各种药物的种子中的核糖核苷酸的顺序排列中转录隔出来的地方用来增长PCR,还可以检查增长出来的产物的碱基顺序,最后的顺序展现了药物种子核糖RNA基因中转录隔出来的地方的碱基顺序有很大的不一样,不一样的中药的种子的核糖RNA基因中的转录隔出来的地方碱基的顺序可以在很小的方面拿来判断。但是只有在知道原有的DNA的顺序排列的状况下才可以完成一般的DNA,这种状况就让不知道顺序的基因的增长的受到了很大的影响。
综合上述的各项研究可得出,各种现代化的生物工程科技的持续性发展及其在医药鉴别行业当中的推广和使用,这些条件强有力地促进了国家药材鉴别领域的方法的革新。在中药学进步的过程里,人们运用不同的鉴别方式,对中草药的相关知识有了更多的了解,增加了对药材真假优劣的判定能力,推进了国内中医药事业和中草药鉴别技术的发展。我们既要不断推进各种新兴手段的发展,也要吸收原有的判定方法的长处,把两者结合起来。
【参考文献】
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论文作者:周辰杰1,韩炜蔚2
论文发表刊物:《医药前沿》2016年9月第27期
论文发表时间:2016/10/9
标签:技术论文; 电泳论文; 基因论文; 药材论文; 中药论文; 鉴定论文; 中草药论文; 《医药前沿》2016年9月第27期论文;