(四川劳研科技有限公司,四川 攀枝花 617067)
摘 要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较，分析葡萄糖氧化酶法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。对本实验室使用的血糖测定参考方法HK法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求，且与HK法相关性良好。
关键词：GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言
。血糖测定是诊断糖尿病的重要依据，血糖的准确测定对诊断和处理高血糖和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法，而酶法有分为葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK法。酶法中的GOD-POD法，因具有操作简单，无毒、无害，试剂已商品化、易于质控、价格低等优点，现已广泛用于临床。为此，将GOD-POD法与血糖参考方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较，现报告如下：
2 材料与方法
2.1仪器与试剂
己糖激酶试剂盒 四川迈克生物科技有限公司 批号：20110310
葡萄糖氧化酶试剂盒 四川迈克生物科技有限公司 批号：20110310
胆红素校准品（430 umol/l）四川迈克生物科技有限公司 批号：20101120
血糖中值质控品（4.80 mmol/l）四川迈克生物科技有限公司 批号：20101008
血糖高值质控品（11.20mmol/l）四川迈克生物科技有限公司 批号：20101008
日立-7180全自动生化分析仪
2.2方法
按试剂盒使用说明设置参数和操作。
2.2.1重复性试验 取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次，计算批内误差。另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次，累计20个结果，计算天间误差。
2.2.2回收试验 取若干健康体检人群血清混合，分装，按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液，用两种方法分别测定，每种方法的每一浓度平行测定三次，分别计算回收率。
2.2.3 干扰试验 取胆红素含量为43.00umol/L左右的血清用两种方法分别测定血糖浓度，比较胆红素对两种方法的干扰。
2.2.4方法比较实验 用两种方法分别测定100例体检人员血清中的血糖浓度（每天测20份，共做5天），进行相关和回归处理，观察两方法的相关性。
2.2.5 统计学方法 D检验、T检验、F检验
2.3 GOD-POD法、HK法检测依据：根据《全国临床操作规程》第三版中的糖类测定执行。
3 结果
3.1 重复性试验
结果见表1和表2。
在两试剂盒共同线性范围0.02-22.30mmol/L范围内，线性相关结果y=0.8668x+0.4842，相关系数r=0.9038有一定相关性，作两样本均数t检验t值为2.16（查表P＜0.05），说明两组试剂盒测定结果在统计学上有一定差异性。
4 讨论
重复性实验是反映精密度大小，精密度是在一定条件下进行多次检测所得检测结果彼此之间符合程度，它是检测结果中随机误差分散程度大小的反映，一般实验室要求批内CV<3%，批间CV<5%，葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法的检测结果均符合以上要求，批内CV均在1%左右，批间CV均在2.4%左右，并且两种试剂盒都很接近。如此说明两种试剂盒的影响因素相近，随机误差较小且较恒定。
回收实验是比较两种分析方法系统误差的有效评价方法，一般检验方法要求回收率在95%—105%。因HK试剂盒已开瓶一个多月，试剂稳定性有一定影响，平均回收率在105.19%，因时间的限制，在以后的工作中在做进一步求证。而葡萄糖氧化酶法是新开瓶试剂盒，在中、高值都能达到要求。
干扰实验是用于检测某方法特异性，也用于检测干扰物质对方法干扰作用，以评价分析方法准确性，一般试验要求干扰率<5%。理论上，葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生的过氧化氢要与还原性物质如胆红素、尿酸、抗坏血酸等反应，从而使检测值偏低，而己糖激酶法不受还原性物质的影响。表4显示，葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法的检测结果均明显高于一般实验要求，但室内质控均在在控状态。分析其原因可能与我们使用的成品胆红素标准品的基质效应有关，通过与厂家联系，标准品中使用的是猪胆红素
方法比较显示，做回归分析回归系数r=9038 ,表明两种方法有一定相关性，但同我们实验室要求r=0.99有差异，再对两种方法的检测结果做两样本均数t检验，结果显示t=2.16（查表P＜0.05），表明两种方法的测定均数在统计学上有一定的差异。但t检验不能给出总体参数间的差别大小，总体参数间的差别的推断需计算95%可信区间[1]。做两样本均数差的95%可信区间为[0.0213，0.3672]，满足CLIA’88[2] (美国在1988年提出的临床试验室改进修正案)对临床实验室的要求，血糖的允许误差范围±7%。所以葡萄糖氧化酶法试剂盒的检验结果是符合实验室要求的。
5 结论
GOD-POD法试剂盒的的检测结果在重复性、稳定性方面均与HK法相近，特异性均满足一般临床实验室要求，与HK法相关性良好，且具有操作简单、快速，试剂盒较HK法便宜等优点，通过多年试剂厂家不断改进和完善，现已适宜推广和使用。日立-7180全自动生化分析仪、试剂、校正品和质控品构成标准的检测体系，其中任何一要素的改变均可以认为是不同检测体系，均可影响检测结果。因此，在日常的工作中，选择与仪器匹配的试剂极其重要，评价的目的在于确定两种试剂盒的检测结果在允许范围内是否可靠，其结果有无可比性。
参考文献:
[1]颜虹.医学统计学.北京.人民卫生出版社.2005：92
[2]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.第4版.北京.人民卫生出版社.2015：1014
论文作者:邹平
论文发表刊物:《医师在线》2018年1月上第1期
论文发表时间:2018/5/14
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