【关键词】 乙型肝炎病毒；两对半；HBV-DNA
[Abstract] Objective To explore the relationship between two half tests of hepatitis B virus and HBV-DNA. Methods 125 patients with hepatitis in our hospital from 2011 to 2012 were selected. The serum samples of the patients were used to detect the markers of hepatitis B virus by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and "two and a half" method. At the same time, the HBV-DNA of the patients was quantitatively detected by fluorescent polymerized chain reaction. Compare the two results. Results 80 cases of HBV-DNA were detected as positive by fluorescence polymerized chain quantitative method, and the detection rate was 64.0%. The detection rate of HBsAg, HBeAg, anti HBC markers was the highest, followed by HBsAg, anti HBC, and anti Hbc. Conclusion HBV-DNA is related to the activity and infectivity of the virus. The determination of HBV-DNA can be used to understand the replication and infection of hepatitis B virus. It can be used as an auxiliary test for different clinical types of hepatitis patients, and it can be used as a new standard to judge whether the virus in the patients with HBV infection has activity and greater infectivity.
[Key words] hepatitis B virus; two and a half; HBV-DNA
乙型病毒性肝炎， 简称乙肝， 是一种由乙型肝炎病毒（HBV）感染机体后引起的疾病[1]。在临床实践中， 往往采用血常规“两对半”检查， 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗原抗体（抗-HBeAg）、乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）[2]， 但是， 常规的“两对半”检测的并不能特异性的诊断乙肝病毒在患者体内的复制及传染的状况。本研究对河南省安阳市中医院的肝炎病毒患者进行“两对半”与HBV-DNA定量检测对比分析， 探讨HBV-DNA定量检测对乙型肝炎病毒活动度及传染性的状况。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 选取本院2017～2019年收治的乙型肝炎患者， 共125例。其中男75例， 女50例；平均年龄为（47.7±6.3）岁。采取患者的血清学标本。其中由血液传播的人数为110例， 医源性传播的人数为1例， 母婴传播的人数为2例， 性传播的人数为12例。
1. 2 方法 ①乙肝两对半定量检测：采用CMIA法， 试剂购自美国Abbott公司。仪器为美国Abbott公司生产的Architect i2000 SR全自动化学发光免疫分析仪。阳性标准：HBsAg>0.11 IU/ml；抗-HBsAg>9.99 mIU/ml；HBeAg>0.99 S/CO；抗-HBe>0.99 S/CO；抗-HBc>0.99 S/CO。②HBV-DNA含量：检测所用仪器系德国Roche公司生产的LightCycler自动荧光PCR仪；HBV-DNA FQ-PCR试剂盒由深圳匹基生物工程公司提供。严格按试剂说明书操作。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆HBV-DNA<5.0×102copies/ml者为阴性， HBV-DNA>5.0×102copies/ml者为阳性。
1. 3 观察指标 对血清学模型与HBV-DNA定量结果两两比较及e抗原与HBV-DNA定量结果的比较数据处理。
1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计软件对本次研究所取得的数据进行分析， 计数资料采用χ2检验， 计量资料采取t检验， 以均数± 标准差（ x-±s）的形式对数据进行表示， 以 P<0.05代表差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 HBV-DNA和乙肝两对半检测结果 经荧光聚合链定量检测法检测有80例患者HBV-DNA定量为阳性， 检出率为64.0%， 其中HbsAg、HbeAg、抗-HBc标志物阳性的HBV-DNA的检出率最高， HbsAg、抗-HBc次之， 抗-HBc最低。
2. 2 e抗原与HBV-DNA定量检测结果 e抗原与HBV-DNA定量检测结果e抗原大于1000模式与e抗原小于1000模式HBV-DNA定量结果之间， P<0.05， 差异具有统计学意义。
3 讨论
乙型病毒性肝炎是由于乙型肝炎病毒（HBV）感染所致。乙型肝炎病毒（HBV）属嗜肝DNA病毒科， 基因组长约3.2 kb， 为部分双链环状DNA[3]。HBV进入机体后， 侵入人体的肝细胞， HBV进入肝细胞后， 就会以HBV- DNA为模板进行复制， 合成新的HBV颗粒并释放入血液。同时可激起机体的免疫反应， 从而产生不同的血清免疫学标志物。目前认为乙肝的发病机制与机体的免疫应答密切相关。患者常常表现为体力不支、疲惫、没精神、食欲不振、厌油、恶心、腹胀、黄疸等。
现今我国临床上常采用“两对半”检测方法进行对乙型病毒性肝炎的检测， 其中HBeAg是临床判定乙型肝炎病毒的复制情况， 是判断患者乙型肝炎的病情状况及其患者的传染状况的重要指标之一。但在临床实践过程中， 往往会出现HBeAg阴性患者乙肝病毒的复制仍存在且复制程度并未减弱。经过研究发现， 出现此种现象， 是由于在HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者中， HBV基因前C区或是CP区变异， 导致HBeAg合成障碍。因此， HBeAg阴性并不能作为HBV复制终止或是减弱的判断依据。此时， 对乙肝病毒的DNA定量检测可确切地反映乙型肝炎病毒活动度及传染性状况。
用于乙肝病毒基因检查的方法主要有：荧光PCR法、竞争PCR法、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记法和PCR酶联化学发光等方法。这些方法可以对HBV-DNA进行定量， 对诊断病毒复制与否及判断抗病毒治疗的疗效均有价值。但这些方法各有优缺点， 所使用的仪器设备、试剂品质源于不同的国家和地区， 设立的标准曲线以及标准荧光等各不相同， 得出的数值左右漂浮， 偏差很大， 得出的检测范围也不相同。本次实验检测所用仪器系德国Roche公司生产的LightCycler自动荧光PCR仪；HBV-DNA FQ-PCR试剂盒由深圳匹基生物工程公司提供。检测标准为HBV-DNA<5.0×102copies/ml者为阴性， HBV-DNA>5.0×102copies/ml者为阳性。
本组实验结果为：经荧光聚合链定量检测法检测有80例患者HBV-DNA定量为阳性， 检出率为64.0%， 经过数据处理， 将实验“两对半”与HBV-DNA定量检测结果相比较。其中HbsAg、HbeAg、抗-HBc标志物阳性的HBV-DNA的检出率最高， HbsAg、抗-HBc次之， 抗-HBc最低。由此可推断， HBV-DNA与“两对半”检测相关联， 能有效的反映HBV在人体的复制状况， 能给HBV防治工作提供确凿的数据， 给临床诊治带来了巨大的帮助。
综上所述， HBV-DNA与病毒感染和活动性复制有密切关系， 对进一步全面了解乙型肝炎病毒的复制和传染性及不同临床类型肝炎患者的辅助诊断具有一定的临床意义， 可作为判断HBV感染者病毒是否有活动和较大传染性的新标志， 是乙型肝炎早期诊断、疗效评估的可靠指标。
参考文献
[1] 翁彬，王雷萍，方红辉.乙型肝炎病毒前S1蛋白与HBV-DNA及HBeAg相关性分析.广东医学， 2006，27（6）：884.
[2] 唐永明，许为民.慢性乙型病毒性肝炎中HBV-DNA含量与IL-17/IL-18及前s2抗体水平的关系.现代检验医学杂志， 2006，21（6）：13.
[3] 王中兴，朱小琼，李敬元.乙型肝炎病毒前s1蛋白、前s2蛋白、乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎病毒标志物的检测及其意义.临床荟萃， 2006，21（16）：1203.
论文作者:焦德明,贺亮，王鹤，李秀芹，权莉
论文发表刊物:《世界复合医学》2020年2期
论文发表时间:2020/5/6