（长江航运总医院神经内科 430010）
摘要：目的 观察癫痫病人脑脊液和血清中S100B蛋白的表达。方法 选取患者49例癫痫病人为观察组，49例基本资料相近的健康人为对照组，两组均进行半定量RT-PCR法和Western印迹法检测光密度的比值。结果 癫痫病人发作之后其脑脊液和血清中的S100B蛋白的表达明显高于正常的健康人群。结论S100B蛋白在血清和脑脊液中的表达能够说明癫痫病发作之后脑部损伤。
关键词：S100B；癫痫；脑脊液；血清
癫痫[1]是神经系统中常见的一类慢性的脑补疾病，引发该疾病的原因有很多种，常见的有脑部的外伤、脑部的肿瘤、卒中、颅内的感染（例如脑膜炎、脑炎等等）S100B蛋白[2-3]是一种结合蛋白广泛存在于人的大脑当中，能够在大脑进行活动的过程中来调控多种生物学功能，为进一步研究S100B蛋白在癫痫病人脑脊液及血清中的表达和意义，特做报告如下：
1资料与方法
1.1患者资料
选取2015年6月—2017年4月期间我院接收就诊的49例癫痫的患者为研究对象作为观察组的患者，男25例，女24例，年龄在24-71岁之间，平均（43.5±3.8）岁。纳入标准：（1）患者为癫痫症的患者；（2）患者签署相关同意书；排除标准：（1）患者有相关的精神病史或者有精神病、肿瘤性疾病等病症（2）患者心肺等重大脏器功能障碍。
对照组：共49例患者，年龄在23-72岁之间，平均（44.7±4.9）岁，为与癫痫病患者年龄、性别等相匹配的正常健康人。纳入标准：（1）为正常健康人；（2）患者签署相关同意书；排除标准：（1）患者有相关的精神病史或者有精神病、肿瘤性疾病等病症（2）患者心肺等重大脏器功能障碍。
1.2方法
于癫痫病患者发病后的3天之内提取并留存3ml患者的脑脊液和5ml的外周静脉血，在得到标本的6个小时内对其进行离心操作，离心机设置：3000r/min，离心10min。离心结束后，用移液枪吸取上清液300μL放置在EP管内，冻存在-80℃的冰箱当中。
1.2.1半定量RT-PCR法
解冻上清液，从中抽取RNA后，吸取5μL的RNA稀释成500μL的溶液并在紫外分光光度计波长为260和280nm处测定吸光度；逆转录得到cDNA，并进行AWM一步法RT-PCR检测；然后进行电泳，检测S100B蛋白待测基因和β-actin光密度比值。
1.2.2Western印迹法
解冻上清液，提取总蛋白，测定蛋白的含量；进行凝胶电泳后转膜后进行免疫反应，4℃下杂交过夜，用TBST液洗膜后用HRP标记进行二抗杂交，杂交后再用TBST液洗膜30min。
1.3观察指标
（1）半定量RT-PCR法：比较S100B待测基因/β-actin值。
（2）Western印迹法：比较待测基因/GAPDH值。
1.4统计学方法
数据采用SPSS20.0软件进行统计和分析，采用t检验，差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。
2结果
2.1半定量PCR结果
对照组的脑脊液中S100BmRNA/β-actin 灰度值为0.078±0.125，而血清中的为0.012±0.102，观察组的脑脊液中S100BmRNA/β-actin 灰度值为0.326±0.081，而血清中的为0.115±0.121，P＜0.05，详见表1。
3讨论
近年来对癫痫病的发病机制方面的研究增多，癫痫病在发作过程中会损伤脑部的神经元，不仅会有反应性的胶质增生现象，还会发生炎症反应[4]。其主要症状为抽搐、肢体以及脸部肌肉的僵硬或者抽动，患者会神志不清，痉挛，感觉到异常等，长期发作频繁会影响到患者的身心和智力发展。S100B蛋白其主要是在调节内皮细胞稳定性和血脑屏障渗透性之间发挥着重要的作用。S100B能够促进神经生长以及修复损伤的神经元，但是浓度过高的S100B却会使神经发生退化，诱导神经胶质细胞的凋亡，影响机体的健康[5]。
本次研究表明，在癫痫病人发作之后其脑脊液和血清中的S100B蛋白的表达明显高于正常的健康人群，这可能是应为癫痫发作时的炎症反应使血脑屏障受到损伤，大量的星形胶质细胞遭到了破坏，这就导致细胞内原本的S100B蛋白大量的分泌到脑脊液和血清当中，一旦S100B蛋白的浓度过高时就会使得神经胶质细胞被激活并得到增生，从而刺激到自身以及小胶质细胞的产生大量的炎性因子和一氧化氮，同时也会参与神经炎性反应损伤，最终导致患者的神经元功能发生障碍。
总之，血清以及脑脊液中的S100B蛋白的表达水平可以作为反映癫痫病发作后脑部损伤早期的生化指标之一，临床上的实用价值较高。
参考文献
[1]邓向红，刘迪辉，罗向阳，等．BDNF在癫痫儿童的表达及意义[J].临床医学工程，2010，17（2）：15-16．
[2]赵丽梅，赵玉萍，高翠红，等．热性惊厥患儿血气指标变化与 BD-NF、NSE、S100B 表达水平的相关性分析[J].热带医学杂志，2015，15（7）：920-921．
[3]张艳丽，杨晓华，臧兆萍，等.脑卒中后癫痫患者血清脑源性神经营养因子、S100B和神经元特异性烯醇化酶表达及相关性[J].中国老年学杂志，2018，38（7）：1540-1542．
[4]邹 蓉，戴永萍，赵合庆．抗癫痫药物对卒中后癫痫患者血清同型半胱氨酸、叶酸、B 族维生素水平的影响[J].临床神经病学杂志，2017，30（2）：93-97．
[5]王晶，殷亮，吕涌涛，等.S100B在癫痫患者脑脊液和血清中的表达[J].实用医学杂志，2016，32（20）：3422-3424．
论文作者:涂文仙
论文发表刊物:《航空军医》2018年20期
论文发表时间:2018/12/4
标签：脑脊液论文; 癫痫论文; 血清论文; 患者论文; 蛋白论文; 胶质论文; 脑部论文; 《航空军医》2018年20期论文;