湖南中医药高等专科学校附属第一医院（湖南省直中医医院） 湖南株洲 412000
【摘 要】目的：建立熄风活络胶囊的质量控制方法。方法：用薄层色谱法对熄风活络胶囊中的丹参、三七、大黄、马钱子、地龙进行定性鉴别。结果：薄层色谱中斑点清晰，易于识别。结论：本方法简便，灵敏度高，可有效地控制熄风活络胶囊的质量。
【关键词】熄风活络胶囊；薄层色谱法；丹参；三七；大黄
ABSTRACT：OBJECTIVE：To establish a method for quality of Xifenhuoluo Jiaonang.METHODS：Salvia miltiorrhiza Bge、Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen、Rheum palmatum L、Strychnos nux-vomica L.、Pheretima aspergillum（E.Perrier） was identified by TLC. RESULTS：The spots in TLC were clear and well distinguished.CONCLUSIONS：The method is silple，sensitive and accurate.It can be used to control the quality of Xifenhuoluo Jiaonang.
KEY WORDS：Xifenhuoluo Jiaonang；TLC；Salvia miltiorrhiza Bge；Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen；Rheum palmatum L.
熄风活络胶囊是由丹参、三七、大黄、马钱子、地龙等20味中药组成的医院自制制剂。功能熄风豁痰，活血通络；主治中风病早、中期。原质量标准比较简单。为更好地控制该品种的质量，特对其所含的主要成分丹参、三七、大黄、马钱子、地龙共5味中药进行薄层色谱鉴别，以保证药品的质量。
1 仪器与试药
KQ-50型超声波清洗器（昆明市超声波仪器厂）；UV-1型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂）；AG-135型电子分析天平（梅特勒）。试验中使用的对照品及对照药材均由中国药品生物制品检定所提供，丹参素钠（批号：110855-201313供鉴别用），地龙（批号：120987-201107供鉴别用），人参皂苷Rb1（批号：110704-201424供含量测定用），人参皂苷Rg1（批号：110703-201530供含量测定用），三七皂苷R1（批号：110745-201318供含量测定用），士的宁（批号：110705-201306供含量测定用），马钱子碱（批号：706-8501供含量测定用），大黄（批号：120902-201311供鉴别用）。熄风活络胶囊（批号：150415，150318）为医院自制；硅胶G、硅胶GF254（青岛海洋化工厂），其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 丹参的薄层色谱鉴别[1]：取本品内容物8g，加水30mL，超声处理20分钟，用稀盐酸调节pH至1～2，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取丹参素钠对照品，加无水乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。取阴性对照样品（缺丹参）8g，按供试品溶液的制备方法制备，作为阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述供试品溶液、阴性对照溶液各10μL、对照品溶液5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-丙酮-甲酸（25∶10∶4）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。（图1）
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1.阴性对照 2.丹参素钠 3.4.样品
图1 丹参的TLC
2.2 三七的薄层色谱鉴别[2]：取本品内容物6g，加水饱和的正丁醇30mL，超声处理30分钟，滤过，加3倍量以正丁醇饱和的水，摇匀，放置使分层，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1mL各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。取阴性对照样品（缺三七）6g，按供试品溶液的制备方法制备，作为阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷－甲醇－水（13∶7∶2）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷以硫酸溶液（1→10），在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯（365nm）下检视，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。（图2）
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1.阴性对照 2.人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1及三七皂苷R1对照品 3.4.样品
图2 三七的TLC
2.3 大黄的薄层色谱鉴别[3]：取本品内容物4g，加甲醇20mL，浸泡1小时，滤过，取滤液5mL，蒸干，残渣加水10mL使溶解，再加盐酸1mL，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加二氯甲烷1mL使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g，自“加甲醇20mL”起同法制成对照药材溶液。取阴性对照样品（缺大黄）4g，按供试品溶液的制备方法制备，作为阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶5∶0.2）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，显相同颜色的荧光斑点。置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。阴性对照无干扰。（图3）
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1.阴性对照 2.大黄对照药材 3.4.样品
图3 大黄的TLC
2.4 马钱子的薄层色谱鉴别[4]：取本品内容物10g，加二氯甲烷-乙醇（10：1）混合溶液20mL与浓氨溶液2mL，密塞，振摇5分钟，放置2小时，滤过，滤液蒸干，加二氯甲烷-乙醇（10：1）混合溶液2mL使溶解，作为供试品溶液。另取士的宁对照品、马钱子碱对照品，加三氯甲烷制成每1mL各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。取阴性对照样品（缺马钱子）10g，按供试品溶液的制备方法制备，作为阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－丙酮－乙醇－浓氨溶液（4∶5∶0.6∶0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰。（图4）
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1.阴性对照 2.士的宁、马钱子碱对照品 3.4.样品
图4 马钱子的TLC
2.5 地龙的薄层色谱鉴别[5]：取本品内容物2g，加二氯甲烷20mL，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1mL使溶解，作为供试品溶液。另取地龙对照药材0.5g，自“加二氯甲烷20mL”起同法制成对照药材溶液。取阴性对照样品（缺地龙）2g，按供试品溶液的制备方法制备，作为阴性对照溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－丙酮（9∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。（图5）
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1.阴性对照 2.地龙对照药材 3.4.样品
图5 地龙的TLC
3 讨论
实验过程中，对水蛭、白芷进行的TLC中，水蛭、白芷对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，但阴性对照溶液有干扰；当归、川芎的TLC中，在与对照药材色谱相应的位置上，未显相同颜色的荧光斑点，故未列入质量标准。最终结果表明，TLC法测定熄风活络胶囊中丹参、三七、大黄、马钱子、地龙，具有专属性好，灵敏度高，操作简便的特点。故作为熄风活络胶囊质量控制标准。
参考文献：
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[2] 郭丽红，郑国钧，郭琪，杨莹.三七消痔栓的薄层色谱鉴别研究[J].中国药事.2009（12）
[3] 中国药典[S].2005版.一部.P22.
[4] 代雪平，宋汉敏，李振国.伸筋活络丸质量标准修订研究[J].中医研究.2011（02）
[5] 中国药典[S].2005版.一部.P113.
论文作者:龙欢周1,胡雪来2
论文发表刊物:《航空军医》2016年第25期
论文发表时间:2017/1/9
标签：溶液论文; 薄层论文; 阴性论文; 地龙论文; 色谱论文; 熄风论文; 马钱子论文; 《航空军医》2016年第25期论文;