（1南充卫生学校附属医院 四川南充 637000）
（2川北医学院附属医院 四川南充 637000）
【摘要】目的：探究儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规的相关性。方法：选取40例再生障碍性贫血患儿和40例确定无再生障碍性贫血的健康体检儿童分别作为观察组与对照组，对其外周血淋巴细胞亚群指标进行对比，并分析与血常规的相关性。结果：观察组儿童的各项指标与对照组相比，均存在显著性异常(P＜0.01)；观察组儿童淋巴细胞中CD3+CD8+所占百分比与HB计数水平均呈正相关，CD3+CD4+/CD3+CD8+与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(P＜0.01)。结论：AA患儿的淋巴细胞亚群比例失调，细胞免疫系统异常，且与部分同期血常规检测指标存在一定相关性。
【关键词】再生障碍性贫血；淋巴细胞亚群；血常规；相关性
【中图分类号】R556 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）23-0025-02
Study?on?the?regeneration?of?children?practice?part?of?the?project?correlation?between?anemia?and?lymphocyte?subsets?in?blood
Zhang?Lin?1,?Li?Ying?2,?beam?2,?Qi?Liu?Wen?2.?
1?Affiliated?Hospital?of?Nanchong?health?school?Sichuan?637000,China??
2?Affiliated?Hospital?of?Chuanbei?Medical?College?Nanchong?637000,China?
【Abstract】Objective To explore children aplastic anemia blood lymphocyte subsets and the conventional correlation. Methods 40 cases of children with aplastic anemia and 40 cases of aplastic anemia checkup children as observation group and control group respectively, the index of peripheral blood lymphocyte subsets were compared, and the correlation analysis and routine blood. Results Compared with control group, the various indexes of the observation group children have significant abnormal (P < 0.01); CD3 + CD8 + lymphocytes in observation group children percentage counting and HB levels were positively correlated, CD3 +, CD4 + / CD3 + CD8 + with HB, negatively correlated with the level of WBC, N count (P < 0.01). Conclusion The lymphocyte subsets imbalance AA children, abnormal cellular immune system, and routine blood test index over the same period of part there is a certain correlation.
【Key words】Aplastic anemia; Lymphocyte subsets; Routine blood; The correlation
再生障碍性贫血，一般简称为再障(AA)，是一类骨髓衰竭病症，主要发病特点为全血细胞不断减少，在临床上一般表现为机体贫血、感染、出血以及无肝脾淋巴结肿大等。其致病原因是多方面的，目前医学界认为免疫介导对造血功能的抑制为主要原因，其中T淋巴细胞的异常参与是发生AA的一项重要原因，不同亚群的淋巴细胞对细胞免疫调节发挥的作用存在较大差异，一旦失衡就会令细胞免疫过程出现异常，同时自然杀伤细胞(NK)与产生抗体的B淋巴细胞对造血干细胞的克隆形成具有抑制作用。本文对40例AA患儿的外周血淋巴细胞亚群的表达予以检测，并对其与相应外周血常规的相关性予以分析，进而探讨淋巴细胞亚群分布与功能对AA发病的影响。
1.资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1研究对象 从本院2013年1月—2015年12月间收治的AA患儿中随机选取40例作为观察组，均符合相关诊断标准。其中男22例，女18例；年龄3～12周岁，平均(6.5±0.8)周岁；重型AA患儿14例，非重型AA患儿26例。从同一时期于本院体检中心接受健康检查且确定无AA的儿童中随机选取40例作为对照组，其中男21例，女19例；年龄4～14周岁，平均(7.2±0.6)周岁。两组儿童的一般资料比较无显著性差异(P＞0.05)，故有可比性。
1.1.2主要仪器与试剂 流式细胞仪：美国贝克曼公司生产，型号Beckman Gallions；血细胞分析仪：美国贝克曼公司生产，型号COULTER LH780；淋巴细胞亚群试剂盒与血细胞试剂盒：均由美国贝克曼公司提供，试剂为鼠抗人单克隆抗体，编号为6607073，溶血素采用全血溶血试剂，编号为A11895；质控品：流式细胞仪用质控品由贝克曼公司生产，货号为6607077， 血细胞分析仪用质控品由山东卓越生物科技有限公司生产，批号为E5112。
1.2 方法
1.2.1淋巴细胞亚群的检测 对观察组患儿初次诊断之时与后期免疫治疗随访阶段的外周静脉血的血样予以检测，方法为：从患儿外周静脉血管处采集3mL血样，抗凝剂采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)，标记方法采用直接免疫荧光法，之后于流式细胞仪的作用下检查淋巴细胞亚群的表达情况，得出各淋巴细胞亚群的百分数。对照组儿童同样采取前述方法，于相同时期采集外周静脉血的血样予以检测，并对比分析两组儿童外周血淋巴细胞亚群的相关指标。
1.2.2血常规检测 对观察组患儿与淋巴细胞亚群检测同期的血常规指标予以检测，方法为：从AA患儿外周静脉血管处采集3mL血样，抗凝剂采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)，于血细胞分析仪(瑞典麦道尼克公司生产)中对各项血常规指标进行检测。判断观察组患儿外周血淋巴细胞亚群与同期血常规的相关性。
1.3 观察指标
外周血淋巴细胞亚群检测指标：T淋巴细胞CD3+，CD3+CD4+，CD3+CD8+，CD3+CD4+/CD3+CD8+；NK细胞CD(16+56)+和B淋巴细胞CD19+。
血常规检测指标：血红蛋白(HB)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(N)和血小板(PLT)计数水平。
1.4 统计学处理
将所得数据通过SPSS20.0统计软件进行处理分析，其中计量资料以(x-±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料以百分率(%)表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05视为差异具有统计学意义。
2.结果
2.1 组间外周淋巴细胞亚群检测指标比较
观察组患儿的CD3+CD4+，CD3+CD4+/CD3+CD8+，CD19+检测值均显著低于对照组儿童(P＜0.01)，同时CD3+CD8+与NK细胞CD(16+56)+检测值均显著高于对照组儿童(P＜0.01)；组间CD3+检测值比较无显著性差异(P＞0.05)。具体见表1。
2.2 观察组患儿的外周淋巴细胞亚群与血常规相关性
CD3+CD8+检测值与HB，WBC计数水平均呈正相关(P＜0.01)；CD3+CD4+/CD3+CD8+检测值与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(P＜0.01)。具体见表2。
注：*表示P＜0.01。
3.讨论
AA在低年龄段儿童中的发病率相对较高，在临床上主要表现为全血细胞减少。目前普遍认为AA的发病机制主要有以下几种：第一，机体造血干细胞本身存在缺陷；第二，造血微环境中的支持功能发生障碍；第三，免疫异常反应对造血干细胞造成损伤[1]。对绝大多数患者而言，其机体免疫调节系统都存在不同程度的紊乱，作为细胞免疫系统中的主要效应细胞，T淋巴细胞的异常是导致AA发病的重要因素。
有报道显示[2]，AA患儿体内的T淋巴细胞不仅存在数量异常现象，其亚群分布与功能也存在显著变化。由于所分泌的细胞因子不同，CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞可分为Th1，Th2与Tc1，Tc2两个亚群，T淋巴细胞通过不同亚群分泌不同的IL细胞因子介导各类免疫应答反应。其中Th1与Tc1亚群细胞主要分泌IL-2，IL-12，TNF-α及IFN-γ等细胞因子，Th2与Tc2亚群细胞则主要分泌IL-4，IL-5，IL-6及IL-10等细胞因子。另外，Th1亚群细胞主要参与调节和细胞毒性或局部炎症相关的免疫应答反应，Th2亚群细胞则主要参与调节相关的体液免疫反应。
随着研究的不断深入，人们发现CD4+Thl亚群细胞中存在着部分细胞毒性淋巴细胞(CTL)，具有明显的细胞毒作用，这类细胞会通过旁观者效应对靶细胞产生损伤。另外，有研究显示，AA患者的外周静脉血中Th1/Th2与Tcl/Tc2的比例均显著升高，由此说明AA患者体内的Th与Tc细胞亚群的平衡状态遭到破坏，致使分泌出的TNF-α与IFN-γ等造血负调节因子明显增多，同时对机体造血干细胞产生直接毒性作用[3]。此次研究以40例AA患儿为观察对象，对其外周淋巴细胞亚群相关指标予以检测，并与健康儿童进行比较，结果显示，AA患儿的CD3+CD4+，CD3+CD4+/CD3+CD8+，CD19+检测值均显著低于健康儿童，CD3+CD8+，CD(16+56)+检测值则显著高于健康儿童，但CD3+检测值与健康儿童无明显差异，该结果在一定程度上说明AA患儿体内的T细胞与NK细胞数量存在异常，同时T细胞亚群分布发生异常，与高泽莉等人的研究[4]结果一致。
另外，对AA患儿的外周淋巴细胞亚群与血常规相关性进行观察分析，发现其CD3+CD8+检测值与HB，WBC计数水平均呈正相关，CD3+CD4+/CD3+CD8+检测值与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(见表2)，与陶林静等人的研究[5]结果一致。经分析认为，CD3+CD4+细胞内可产生相对较高的造血负调控因子，令Th1所对应的表达显著升高，致使细胞毒性增加，最终对造血过程产生抑制。同时，为保持分布平衡，机体可能会以负反馈的形式调节Tc2亚群细胞水平。
人体内存在的可自主分泌抗体的唯一细胞是B淋巴细胞，它能够表达多种相关的CD抗原，其中所有B淋巴细胞的共同表面标志就是CD19+，但目前体液免疫对AA发病机制的影响尚无统一定论。有相关研究表示，B淋巴细胞自主分泌的抗体可通过对外周血中单个核细胞的刺激，促使其生成TNF-α与IFN-γ因子，但本文研究结果未显示二者的相关性。不过免疫系统的作用过程十分复杂，它是由多个反应、多种因素及多种物质相互作用、共同协调所形成的平衡网络。因而，B淋巴细胞对AA的影响还需深入研究。
自然杀伤细胞(NK)与B淋巴细胞、T淋巴细胞都不同，它可以直接对靶细胞产生损伤，对骨髓细胞的增殖与分化过程有一定的调节作用。本文的研究结果也显示NK细胞的数量与AA患者血细胞的减少具有一定相关性。
【参考文献】
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[2]高铁铭，付建珠，赵亚玲，等.再生障碍性贫血患者铜/锌比对淋巴细胞亚群的影响[J].南昌大学学报(医学版)，2015，55(3)：44-47.
[3]曹萍，蒋莎义，谢晓恬，等.儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规相关性的研究[J].同济大学学报(医学版)，2011，32(6)：70-73.
[4]高泽莉，汪宏云，叶梅，等.淋巴细胞亚群及血细胞抗体检测在再生障碍性贫血中的临床意义[J].重庆医学，2016，45(7)：903-905.
[5]陶林静.儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及其与血常规相关性的研究[J].中国实用医药，2014，9(35)：39-40.
论文作者:张琳,李英,梁琦,刘文
论文发表刊物:《心理医生》2017年23期
论文发表时间:2017/9/11
标签：淋巴细胞论文; 细胞论文; 患儿论文; 相关性论文; 儿童论文; 血细胞论文; 血常规论文; 《心理医生》2017年23期论文;