【摘要】目的：分析我院2015年革兰阴性杆菌的临床分布及耐药情况。方法：采用纸片扩散法和全自动分析仪进行药物敏感性试验，采用2015年版CLSI标准判读结果。 结果：共分离出革兰阴性杆菌5090株，主要为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌和阴沟肠杆菌，分别占38.1%、14.9%、14.0%、13.1%、6.2%和4.1%。产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌分别为66.1%、39.1%和36.4%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药率均小于4%。非发酵菌中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率为82.1%和34.9%，对美罗培南为82.3%和33.5%。结论：碳青霉烯类抗生素对肠杆菌科细菌仍有很高的敏感性，鲍曼不动杆菌耐药形势严峻。
【关键词】革兰阴性杆菌；耐药性；药物敏感试验；抗菌药物
【中图分类号】R378 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）10-0009-03
Analysis the distribution and antimicrobial resistance monitoring of 5090 gram - negative bacilli
Zhang Yi, Ma Chen, Lei Jin-e, Chen Wei(corresponding author), Department of Clinical Laboratory, the First Affiliated Hospital, Xi’an Jiaotong University College of MedIcine, Xi’an, 710061, China
【Abstract】Objective To investigate the distribution of gram negative bacterial isolates and antimicrobial resistance situation from the Hospital in 2015. Methods The isolates were cultured and identified by routine methods. The susceptibility was tested by using Kirby-Bauer test and automatic bacteria analyzer according to the manual of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI,2015). Results A total of 5090 gram-negative bacilli isolated as follows. Escherichia coli(38.1%), Acinetobacter baumannii (14.9%); Pseudomonas aeruginosa (14.0%); Klebsiella pneumonia (13.1%); Stenotrophomonas maltophili (6.2%); Enterobactercloacae (4.1%). Extended-spectrum β-lactamases(ESBLs) were positive in 66.1%, 39.1% and 36.4% in E. coli, Klebsiella spp and P. mirabilis,respectively. Enterobacteriaceae bacteria was highly sensitive to carbapenems, with a resistance rate of less than 4%. The proportions of Acinetobacter baumannii and Pseudomonasaeruginosand resistant to imipenem and meropenem were (34.9%, 33.5) and (82.1%, 81.3%). Conclusions Carbapenems drugs remain high antimicrobial activity against enterobacteriaceae bacteria, Acinetobacter baumanniinosocomial infection are highly resistant to drugs.
【Key words】Gram - negative bacilli; Antibiotic resistance;Drug susceptibility test;Antibacterial agents
随着广谱抗菌药物的广泛使用，革兰阴性杆菌对抗生素的耐药性日趋增加，尤其是多重耐药菌的感染使临床治疗面临重重困难。为了解我院临床常见革兰阴性杆菌的分布特点及耐药性，对我院2015年度临床分离的5090株革兰阴性杆菌进行分析，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。
1.材料与方法
1.1 菌株来源
分离的病原菌均来自西安交通大学第一附属医院2015年1-12月住院及门诊患者送检的痰液、血液、尿液、胸腹水、引流液等各类标本中分离的革兰阴性杆菌（剔除同一患者相同部位重复分离株）。
1.2 仪器和试剂
Vitek2-Compact全自动细菌鉴定、药敏分析系统及系统配套的革兰阴性杆菌鉴定及药敏卡均购自法国生物梅里埃公司。质控菌株大肠埃希ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853由卫生部临检中心提供，药敏纸片购于温州市康泰生物科技有限公司。
1.3 方法
采用纸片扩散法及VITEK2Compact全自动细菌鉴定仪进行药敏实验，药敏结果按照美国实验室标准化协会（CLSI M100-S25）2015年版标准判读[1]。采用WHONET5.6软件进行数据统计分析。
1.4 产ESBLs株的检测
Vitek 2-Compact全自动细菌鉴定仪根据药敏结果由专家系统判断是否产生ESBLs。
2.结果
2.1 细菌的构成
2015年医院共分离出5090株革兰阴性杆菌，排在首位的是大肠埃希菌1937株（38.1％）；其余依次为鲍曼不动杆菌758株（14.9％）；铜绿假单胞菌710株（14.0％）；肺炎克雷伯菌669株（13.1％）；嗜麦芽窄食单胞菌314株（6.2%）；阴沟肠杆菌211株，（4.1％），见表1。
2.2 细菌标本类型分布比率
大肠埃希菌主要分离自尿液标本，占47.7%，肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌主要分离自呼吸道标本。阴沟肠杆菌在胆汁、引流液胸腹水标本中分离率较高，见表2。
2.3 肠杆菌科细菌中ESBLs的检出率
产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌检出率为66.1%，克雷伯菌属（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）为39.1%，奇异变形杆菌为36.4%。
2.4 主要革兰阴性杆菌药物敏感性试验结果
2.4.1肠杆菌科细菌：肠杆菌科细菌对第1、2、3代类头孢菌素类耐药性均较高，大肠埃希菌对喹诺酮类的耐药率最高，对碳青霉烯类、哌拉西林／他唑巴坦、阿米卡星和头孢哌酮／舒巴坦较敏感，见表3。
2.4.2非发酵菌：鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为82.1%和81.3%。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为34.9%和33.5%。嗜麦芽窄食单胞菌对复方磺胺、左氧氟沙星和米诺环素的耐药率分别为7.4%、9.3%和1.6%，见表4。
3.讨论
2015年我院共收集到非重复分离的革兰阴性杆菌5090株，其中肠杆菌科主要是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌，非发酵菌主要是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌，与西安地区2014年度细菌耐药监测分析基本一致[1，2]。从标本分布结果显示，大肠埃希菌主要分离自尿液标本，阴沟肠杆菌在胆汁、引流液胸腹水标本中较多见，其余细菌均主要来自呼吸道标本。
肠杆菌科细菌对头孢菌素类抗生素的耐药主要由于细菌产ESBLs和Ampc酶，产ESBLs菌株对于青霉素类、氨基糖苷类和喹诺酮类的耐药性也均显著高于非产ESBLs菌株[3]。研究表明应用Vitek2-compact 专家系统判断ESBLs的方法与美国CLSI推荐的参考方法相比，有较好的一致性[4]。本次医院数据显示，大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌ESBLs的检出率分别为66.1%、39.1%和36.4%，高于2015年CHINET中国细菌耐药性监测报告（51.5%、27.4%和22.2%）[5]。耐碳青霉烯类抗生素的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为1%和1.5%，低于2015年CHINET中国细菌耐药性监测报告[5]。可能与医院近年来加强院内感染控制及抗生素合理规范使用等有关。但对于耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的出现，仍应引起临床高度重视。
在监测的非发酵菌中，鲍曼不动杆菌的耐药形势最为严峻，结果显示，鲍曼不动杆菌对大多数抗生素的耐药率在70%以上，对亚胺培南和美罗培南的耐药率为（82.1%和81.3%），高于2015年CHINET中国细菌耐药性监测报告[5]（62.0%和72.5%）。目前只有阿米卡星、复方新诺明及头孢哌酮/舒巴坦对其有较高的敏感性。铜绿假单胞菌对阿米卡星有较高的敏感性（91.7％），对环丙沙星、头孢吡肟、庆大霉素和头孢他啶的敏感率均在70%左右，对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为34.9%和33.5%，比西安地区2014年度细菌耐药监测分析（37.8%和37.1）稍低[2]，但仍高于2015年CHINET全国细菌耐药监测报告[5]。嗜麦芽窄食单胞菌主要引起呼吸道感染，目前左氧氟沙星、复方新诺明、和米诺环素对其的耐药率保持在比较低的水平，均低于10%。但由于其对多种抗生素天然耐药，因此临床在抗菌药物的选择上有很大局限性。
综上所述，革兰阴性杆菌的耐药性日趋严重，尤其是多重耐药菌的出现，临床应加强对细菌的耐药性监测，及时掌握细菌的耐药动态，并根据药敏结果合理规范地使用抗生素，延缓耐药菌的产生。
【参考文献】
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[2]徐修礼，陈潇，郝小柯，等.西安地区2014年度细菌耐药监测分析[J].国际检验医学杂志，2016，37(3)：294-296.
[3]胡付品，朱德姝，汪复，等.2014年中国CHINET 细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2015，15(5)：401-410.
[4]苗鹏.Vitek2-Compact对肠杆菌科细菌药敏及ESBLs测定能力的评估[J].中国医师杂志，2016，18(7)：1071-1073.
[5]胡付品，朱德姝，汪复，等.2015年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2016，16(6)：693-694.
论文作者:张祎,马晨,雷金娥,陈葳（通讯作者）
论文发表刊物:《心理医生》2017年10期
论文发表时间:2017/5/25
标签：杆菌论文; 细菌论文; 耐药性论文; 阴性论文; 铜绿论文; 大肠论文; 不动论文; 《心理医生》2017年10期论文;