张俊杰[1]2002年在《妊高征胎盘组织eNOS mRNA表达及NO浓度变化的研究》文中指出妊娠高血压综合征(简称妊高征)，是严重危害母婴健康的重要疾病之一，对其病因和病理机制的研究一直是产科领域的重要课题。鉴于在妊娠终止胎盘娩出后病情可迅速缓解，说明胎盘在妊高征的发病中起决定性作用。因此研究胎盘在妊高征中的作用对揭示妊高征的病因和发病机理至关重要。本文选择1999年8月至2001年7月间天津医科大学第二医院产科收治的妊高征患者胎盘30例为试验组，同期正常足月分娩的胎盘30例为对照组，分别应用分子生物学逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)和硝酸还原酶法测定胎盘组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达强度及胎盘组织匀浆一氧化氮(NO)的浓度，并对二者的相关性进行了研究。结果显示： 1．妊高征组胎盘组织eNOS mRNA的表达强度及NO浓度均明显低于正常对照组(P＜0．05)。 2．轻度妊高征胎盘组织eNOS mRNA的表达强度及NO浓度与正常对照组相比均无差别(P＞0．05)；中、重度妊高征eNOS mRNA的表达强度及NO浓度均明显低于正常对照组及轻度妊高征(P＜0．05)。而中度妊高征与重度相比，两项指标均无显着性差异(P＞0．05)。 3．胎盘组织eNOS mRNA的表达强度与胎盘组织匀浆NO浓度之间呈直线正相关(相关系数r=0．8362，P＜0．05)。 研究结果提示：妊高征时NO-NOS系统发生了明显的改变，导致孕产妇和围产儿病率升高，同时也提示妊高征的发生和发展是多科因素综合作用的结果，内皮细胞损伤与妊高征的关系更为密切。
李诗兰, 佟秀琴, 赵扬玉, 吴玉珍[2]1999年在《妊高征胎盘绒毛eNos及mRNA表达血内皮素-1、硝酸盐、钙镁的关系》文中指出目的 探讨内皮素１（ＥＴ１）、一氧化氮（ＮＯ）、钙镁在妊高征发病中的作用。 方法 用硝酸盐还原酶还原法、放射免疫及原子吸收法，分别测定７０ 例妊高征（ 妊高征组） 孕妇和３０ 例正常妊娠（（ 正常组） 孕妇血浆ＮＯ 稳定代谢终产物硝酸盐（ＮＯ－３ ） 、ＥＴ１，钙镁和血红细胞内钙镁的浓度；用免疫组化，还原型辅酶ⅡＮＡＤＰＨ黄递酶组织化学染色及原位杂交法，了解内皮型ＮＯ 合成酶（ｅＮＯＳ） 及其ｍ ＲＮＡ 在胎盘绒毛组织的表达。 结果 （１） 妊高征组血浆ＮＯ－３ 水平明显低于正常组，病情越重其值越低，并与妊高征患者平均动脉压呈负相关；（２） 妊高征组血浆ＥＴ１ 水平明显高于正常组，病情越重其值越高，并与妊高征患者平均动脉压呈正相关；（３）妊高征组血钙降低，血红细胞内钙升高；（４） 胎盘绒毛合体滋养细胞及除毛细血管外的胎儿血管内皮细胞有ｅＮＯＳ及其ｍＲＮＡ 的表达，胎盘绒毛组织只有ｅＮＯＳ表达，ｅＮＯＳ在妊高征胎盘绒毛组织的表达明显低于正常组。 结论 妊高征发病与血管内皮损伤，ＥＴ１ 产生增加，血钙减少，血红细胞内钙含量增加，致ＮＯ 减少有关
张钰[3]2003年在《胎盘一氧化氮体系与妊高征发病机理的研究》文中研究说明目的 研究妊高征胎盘一氧化氮体系，包括胎盘一氧化氮合酶(NOS)的表达和活性、一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平的变化，以探讨胎盘NO体系与妊高征发病的关系。 方法 选择40例妊高征(妊高征组)、30例正常足月孕妇(对照组)作为研究对象，应用原位-逆转录聚合酶链反应技术(原位RT-PCR)和图像分析系统定位定量检测内皮型一氧化氮合酶-信使RNA(eNOSmRNA)在妊高征组和对照组胎盘组织中的表达；应用还原型辅酶Ⅱ-黄递酶(NADPH-d)组织化学法和图像分析系统定量检测妊高征组和对照组胎盘合体滋养细胞NOS酶蛋白的活性；应用硝酸还原酶化学比色法和放射免疫法检测妊高征组和对照组胎盘绒毛组织匀浆中NO及cGMP水平。 结果 1．eNOSmRNA在妊高征组与对照组胎盘的合体滋养细胞和干绒毛血管内皮细胞均呈阳性染色。妊高征组胎盘合体滋养细胞eNOSmRNA阳性染色减弱；而干绒毛血管eNOSmRNA阳性染色增强，对照组终末绒毛毛细血管内皮细胞无eNOSmRNA着色，而妊高征组终末绒毛血管内皮细胞出现eNOSmRNA阳性染色。通过定量分析，妊高征组胎盘合体滋养细胞eNOSmRNA表达水平降低，其平均光密度值妊高征组为155.57±17.21，对照组为177.15+21.39，两组间差异显着(P＜0.01)。轻度妊高征组胎盘合体滋养细胞eNOSmRNA表达水平与对照组相比无明显差异(P＞0.05)，中度、重度妊高征组显着低于轻度妊高征组(P＜0.05，P＜0.01)，而中、重度妊高征组间无显着性差异(P＞0.05)。天津医科大学学位论文2.妊高征组胎盘合体滋养细胞NOS活性显着低于对照组(P(0.01)，但轻度妊高征组胎盘合体滋养细胞NOS活性与对照组相比无明显差异(P>0.05)，中度、重度妊高征组显着低于轻度妊高征组(P<0.05，P<0.01)，而中、重度妊高征组间无显着性差异(P>0.05)。3.妊高征组与对照组胎盘绒毛合体滋养细胞NOS活性与eNOSmRNA表达水平分别呈显着正相关关系(厂0.906，0.835)(P<0一01，P<0.01)。4.妊高征组胎盘绒毛组织匀浆中NO和cGMP水平显着低于对照组(P<0.01)，但轻度妊高征与对照组相比无明显差异(P>0.05)，中度、重度妊高征组显着低于轻度妊高征组(P<0.05，P<0.01)，而中、重度妊高征组间无显着性差异(P>0.05)。5.中重度妊高征组胎盘绒毛组织匀浆NO水平与其平均动脉压呈负相关关系 (r----0.514，P<0.05)，与新生儿出生体重呈显着正相关关系(拼0.751，P<0 .01)。 结论1.eNOSmRNA主要定位在胎盘绒毛合体滋养细胞。妊高征胎盘NO体系全面一致性下调可能是妊高征发病的重要环节。2.推测给予NO的前体左旋精氨酸或NO的供体硝酸甘油可有效治疗妊高征。
张春利[4]2005年在《脂代谢相关基因ADRP和LPL在妊娠高血压综合征胎盘组织中的表达及意义》文中研究说明妊娠高血压综合征(pregnancy-induced hypertension,PIH.简称妊高征)是围产期母婴死亡的主要原因之一,其病因经过一个多世纪地研究,至今仍不明确。目前阐述妊高征发病机制的学说主要有:胎盘和滋养细胞缺血缺氧、血管内皮功能紊乱、脂代谢异常、免疫因素和遗传因素等。脂代谢异常是其发病学说之一,脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation-related protein,ADRP)基因和脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因是影响脂代谢过程的重要因素;我科李东红等于2003年采用基因芯片技术发现,ADRP mRNA在妊高征患者胎盘组织中高表达;而LPL mRNA在妊高征患者胎盘组织中低表达。因此,进一步确认和研究脂代谢相关基因ADRP和LPL在妊高征患者胎盘的表达有可能为阐明脂代谢异常在妊高征发病中的作用提供新的线索。 目 的 研究妊高征患者胎盘组织中的与脂代谢密切相关的两个差异表达基因ADRP和LPL分别在mRNA水平和蛋白水平的表达,探讨这两个基因在妊高征发病和病理生理过程中的可能作用和意义。 方法
孙盛梅, 周德娟, 杨微[5]2005年在《ACE活性和eNOS含量与妊高征相关性研究》文中研究指明目的:探讨胎盘组织一氧化氮合酶含量和血清中血管紧张素转化酶(ACE)活性改变在妊高征发生、发展中的作用。方法:选择轻、中、重度妊高征病人各10例为实验组,正常妊娠妇女30例为对照组,用马尿酸微量比色法检测血清中ACE活性,采用免疫组化ABC法分析妊高征胎盘组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量的变化情况。结果:1妊高征组ACE活性明显高于对照组;2妊高征患者胎盘中eNOS含量显着低于正常足月孕者(P<0.05),且轻度妊高征患者胎盘eNOS含量显着高于中度及重度患者(P<0.05)。结论:血清ACE活性升高与妊高征的发生、发展密切相关。正常足月孕胎盘和妊高征患者胎盘绒毛血管内皮细胞中均存在eNOS抗原,妊高征患者胎盘中含量的减少与其发病有关。
孙飞[6]2004年在《缺氧诱导因子-1α在妊娠高血压综合征患者胎盘组织中的表达》文中指出妊娠高血压综合征(pregnancy-induced hypertension,PIH)是妊娠期特有的疾病，临床表现以高血压、水肿、蛋白尿为主要症状，严重时可出现脑出血、肝肾功能不全等重要脏器功能衰竭，严重威胁母婴健康。临床特点为当胎盘娩出后，临床症状和体征多自然消退。因此，妊高征被称为“胎盘疾病”，在其众多的病因学研究中，胎盘的缺血缺氧学说已获得公认，缺氧诱导因子-1(Hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，本课题通过研究HIF-1α在妊高征胎盘组织中的表达，从而探讨其在妊高征发病机制和病理生理过程中的作用和意义。 目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在妊娠高血压综合征患者胎盘组织中的表达。第四军医大学硕士学位论文 方法 1.采用半定量逆转录聚合酶链反应检测12例妊高征患者胎盘组织中H工F一1 Q mRNA的表达情况，并以12例健康孕妇(正常妊娠组)为对照。 2.应用组织芯片技术，通过免疫组织化学方法分别检测妊高征患者和健康孕妇胎盘组织中HIF一la蛋白的表达情况。 结果 1.妊高征组HIF一1 Q mRNA表达水平为0.957士0.369，对照组为0.954士0.198，两组比较无显着性差异(P)0.05)。 2.妊高征组HIF一1。蛋白水平的阳性表达率63.1%、中度阳性表达率23.3%，显着高于对照组的阳性表达率20.9%、中度阳性表达率7 .0%(P(0.01)。 结论 1.在妊高征胎盘组织中，HIF一1。蛋白水平增高可能参与了妊高征的主要病理生理过程。 2.组织芯片技术具有高效、节约、高度同一性等优势，可以方便快速地检测目的基因所编码蛋白的水平。同时本课题也为相对大样本量进行妊高征致病相关基因的研究提供了新的思路。
相文佩, 陈汉平, 郭玉珍, 沈红玲[7]2006年在《妊高征患者胎盘组织中NOSTRIN表达的研究》文中进行了进一步梳理目的:观察内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial n itric oxide synthase traffic inducer,NOSTR IN)在妊高征(pregnancy induced hypertension syndrom e,PIH)患者胎盘组织中的表达,探讨其在血管病变中的作用。方法:HE染色观察胎盘绒毛血管病变;硝酸还原酶法测定胎盘组织中的NO代谢产物亚硝酸基/亚硝基(NO2ˉ/NO3ˉ);分光光度法测定胎盘组织中eNOS的活性;W estern b lot检测胎盘血管组织中NOSTR IN蛋白质的表达。结果:HE染色可见PIH组胎盘细小血管壁增厚,管壁纤维素样坏死发生率显着高于对照组(P<0.01);PIH组孕妇胎盘组织中的NO2ˉ/NO3ˉ为(27.53±7.48)μmol/mg,与对照组(54.27±9.53)μmol/mg比较显着降低(P<0.01);PH I组患者胎盘组织eNOS活性(12.826±3.61)U/mg与对照组(21.720±3.83)U/mg比较显着降低(P<0.01);W estern b lot显示,两组胎盘组织中均有58kDa的NOSTR IN蛋白质表达,但PIH组表达量明显增高(P<0.01)。PIH组胎盘组织中NOSTR IN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.58,P<0.01)。结论:NOS-TR IN表达增加参与了妊高征患者胎盘绒毛血管的病变过程。
金涛[8]2003年在《妊高征患者胎盘一氧化氮合酶活性及母儿血浆中一氧化氮内皮素的变化及其意义》文中进行了进一步梳理目的：研究妊娠高血压综合征(Pregnancy induced hypertension，PIH)患者胎盘组织中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)活性及母儿血浆中一氧化氮(nitric oxide，NO)和内皮素(endothelin，ET)的变化，探讨NO和ET在妊高征发病中的作用。 方法：采用分光光度法测定妊高征患者40例(妊高征组)和正常晚期妊娠妇女30例(对照组)胎盘组织中NOS活性。采用硝酸还原酶法和放射免疫法分别测定各研究对象静脉血及新生儿脐血中NO的代谢产物亚硝酸基／硝酸基(NO_2~-／NO_3~-)和ET，以及NO发挥生理功能的第二信使环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate，cGMP)的含量。 结果：(1)妊高征组胎盘组织NOS活性明显低于正常对照组(P＜0.01)，且中、重度患者胎盘NOS活性显着低于轻度患者(P＜0.05，P＜0.01)。(2)妊高征组母血及新生儿脐血中NO_2~-／NO_3~-含量和cGMP含量显着低于对照组(P＜0.01，P＜0.01)，而ET含量则显着高于对照组(P＜0.01)。(3)妊高征组母血及新生儿脐血中NO／ET比值显着低于对照组(P＜0.01)，且病情越重其值越低，中、重度患者NO／ET比值显着低于轻度患者(P＜0.01，P＜0.01)。(4)妊高征组母血中NO和ET之间无明显相关性(r=0.274，P＞0.05)，该组脐血中NO和ET之间亦无明显相关性(r=0.220，P＞0.05)；而对照组母血中NO天津医科大学硕士研究生学位论文和ET之间则呈显着正相关(r=0.642，P<0 .01)，该组脐血中NO和ET之间亦呈显着正相关(二0，529，P(0.01)。(5)妊高征组和对照组母血NO、ET水平分别高于各自脐血(P<0.01，P<0.05)，且两组母血中NO和ET水平分别与各自脐血中相应指标呈正相关(P<O.OI)。(6)妊高征组母血NO正T比值与孕妇平均动脉压之间呈负相关(r二一0.629，P<0 .01):妊高征组母血NO尼T比值与新生儿出生体重呈正相关(二0.480，P<0 .01)。(7)妊高征组胎盘组织NOS活性与患者平均动脉压之间呈负相关(r二一0.679，P<0 .01):妊高征组胎盘组织NOS活性与新生儿出生体重呈正相关(产0.524，P<0 .01)。结论:妊娠期胎盘NOS活性降低、NO合成减少，ET合成增加，导致NO肥T比例失衡可能是妊高征发病机制中的一个重要环节，NO甩T比值越低，病情越重。
侯秀红[9]2005年在《跨膜型血管内皮生长因子受体1在妊娠高血压综合征胎盘组织中的表达及其意义》文中认为妊娠高血压综合征(妊高征)是一种威胁母婴健康的常见的产科并发症。其发病率在我国大约为9.4%。妊高征的发病机理至今尚未完全阐明。以往的研究表明妊高征的发病与胎盘缺血缺氧,释放细胞毒性因子,导致全身血管内皮受损有关。内皮细胞激活和功能受损是妊高征发病的中心环节。跨膜型血管内皮生长因子受体1是胎盘血管发生和发育的重要调节因子,研究其在妊高征胎盘组织中的表达有助于进一步了解妊高征的发病机制和病理生理过程。 研究目的 研究跨膜型血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor transmembraneous receptorl, VEGFR1)在妊高征胎盘组织中的表达,探讨其在妊高征发病机制和病理生理过程中的作用。 研究方法 (1) 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测12例妊高征患者(实验组)胎盘组织中VEGFR1 mRNA的表达水平,并以12例健康孕妇(对照组)为对照。(2) 采用蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测上述两组中各9例胎盘组织中VEGFR1蛋白水平的表达,并相比较。(3)
姜锋[10]2003年在《cDNA微矩阵芯片技术在妊娠高血压综合征胎盘组织基因表达谱研究中的应用》文中认为妊高征是产科常见疾病，其病因经过一个多世纪地研究，至今仍不能满意地解释。目前的病因学研究无法从整体上全面地了解妊高征的发病机制，同时对妊高征发病的关键环节-胎盘的研究也不够深入。因此，有必要从新的角度，采用新的方法更全面和深入地研究妊高征的发病机制，特别是深入研究胎盘在妊高征发病中的作用，从而为妊高征发病机理的研究提供新的线索。 目的 筛选出妊高征患者胎盘组织中的差异表达基因，并分别在mRNA水平和蛋白水平证实其表达改变，以期找到与妊高征发病相关的基因。 方法 (1)用基因芯片技术检测妊高征胎盘组织和正常胎盘组织的基因表达谱，比较两者的差异，找到妊高征胎盘的差异表达基因。(2)用半定量RT-PCR技术在mRNA水平检测主要的差异表达基因在妊高征胎盘组织的表达。(3)用免疫组织化学技术通过组织芯片在蛋白水平检测主要的差异表达基因在妊高征胎盘组织的表达，并确定表达部位。 结果 (1)从妊高征胎盘组织共筛选出393个差异表达基因。其中有196个基因的表达高于正常胎盘组织，有197个基因的表达低于正常胎盘组织。(2)抑制素基因在妊高征胎盘组织表达明显高于正常胎盘组织，二者差异有 显着性（P＜0刀1）。 结 论 一、妊高征患者胎盘组织的基因表达与正常胎盘组织存在着很大的差 异，表明胎盘组织在妊高征发病及其病理生理过程中具有重要作用。 二、p叭抑制素基因在妊高征胎盘组织表达异常增高，它可能参与了妊 高征的发病机制，也可能是妊高征病理生理变化的结果。 叁、基因芯片技术是筛查妊高征胎盘组织差异表达基因高效、快捷的工 具。 四、组织芯片技术具有高效低耗的特点，可以方便快速地检测所筛查差 异表达基因所编码蛋白的水平。
参考文献：
[1]. 妊高征胎盘组织eNOS mRNA表达及NO浓度变化的研究[D]. 张俊杰. 天津医科大学. 2002
[2]. 妊高征胎盘绒毛eNos及mRNA表达血内皮素-1、硝酸盐、钙镁的关系[J]. 李诗兰, 佟秀琴, 赵扬玉, 吴玉珍. 中华围产医学杂志. 1999
[3]. 胎盘一氧化氮体系与妊高征发病机理的研究[D]. 张钰. 天津医科大学. 2003
[4]. 脂代谢相关基因ADRP和LPL在妊娠高血压综合征胎盘组织中的表达及意义[D]. 张春利. 第四军医大学. 2005
[5]. ACE活性和eNOS含量与妊高征相关性研究[J]. 孙盛梅, 周德娟, 杨微. 黑龙江医药科学. 2005
[6]. 缺氧诱导因子-1α在妊娠高血压综合征患者胎盘组织中的表达[D]. 孙飞. 第四军医大学. 2004
[7]. 妊高征患者胎盘组织中NOSTRIN表达的研究[J]. 相文佩, 陈汉平, 郭玉珍, 沈红玲. 中国妇幼保健. 2006
[8]. 妊高征患者胎盘一氧化氮合酶活性及母儿血浆中一氧化氮内皮素的变化及其意义[D]. 金涛. 天津医科大学. 2003
[9]. 跨膜型血管内皮生长因子受体1在妊娠高血压综合征胎盘组织中的表达及其意义[D]. 侯秀红. 第四军医大学. 2005
[10]. cDNA微矩阵芯片技术在妊娠高血压综合征胎盘组织基因表达谱研究中的应用[D]. 姜锋. 中国人民解放军第四军医大学. 2003