彭建令[1]2003年在《两类激发子（harpins和核黄素）启动植物抗病防卫和生长信号传导的分子遗传学解析》文中研究说明植物在受到来自生物或非生物的外源信号刺激后，可以启动不同的信号通路，发展对不同病原物的抗性。由水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)和乙烯介导的基本防卫信号通路导致广谱抗病性，并与抗虫和生长发育通路密切关联。不同通路中的信号调控因子通过交叉对话，形成复杂的信号网络，在不同通路之间相互借用，使植物能够快速有效地调动防卫反应。这些因子如何根据外源信号、通过“转录重新编程”机制形成信号网络、并在其中“各就各位”发挥作用，是抗病防卫研究中的重大课题。 植物病原细菌产生的蛋白质激发子harpins对植物有多种影响；核黄素可以启动生长信号通路和独特的抗病性信号通路。Harpins与核黄素作为多功能激发子，非常适合于解析抗病防卫信号通路、其中的重要因子、以及调控不同信号通路的通调因子的鉴定，有助于解答抗病防卫研究中的重大问题以及下列具体问题：植物如何识别harpins与核黄素信号?信号识别如何启动信号传导?有多少信号通路被启动?每个信号通路需要哪些调控因子?是否与其他通路交叉?在哪里交叉?哪个信号通路引导哪种植物表型? 本博士论文课题研究的目的是：试验解析harpins及核黄素启动的植物抗病防卫和生长发育信号通路及其中包括的关键因子，探讨harpins诱导植物抗病性和生长发育信号传导的基因元件调控基础；根据这些方面的研究，初步透视harpins和核黄素作为生物激发子启动抗病防卫及相关过程的信号网络。 1 Harpins启动的植物信号传导通路解析 Harpins是由革兰氏阴性植物病原细菌产生的一类蛋白类激发子，它们的共同特征是：富含甘氨酸，热稳定，对蛋白酶敏感，注射到产生菌的非寄主植物叶片细胞间隙后，可以诱导HR(hypersensitive response)或HCD(hypersensitive cell death)。Harpins外源施用后，可以诱导多种植物抗病、抗虫，促进植物生长。这些效应发现于分别用不同harpins处理的植物上，包括来自Erwinia amylovora的harpin_(Ea)、Pseudomonas syringae pv．syringae的harpin_(Pss)、Pseudomonas syringae pv．phaseolicola的haprin_(Psph)以及Xanthomonas oryzae pv．oryzae的harpin_(Xoo)。但是，对harpins如何行使它们的多重功能，目前还不清楚。在本项研究中，我们采用了叁种方法来解析harpins引发的抗病防卫信号通路，鉴定其中包括的关键调控因子，诱导的防卫反应基因类别，解析这HarPins和核黄素启动植物抗病防卫和生长信号传导的分子遗传学解析些因子与植物对不同类别病原物杭性发展的关系，并研究防卫反应的基因元件调控基础。第一种方法是解析植物外源施用h娜inEa后的信号传导通路.第二种方法是将编码harpinxo。的基因h咧转入烟草，研究h抑inx。。在植物体内表达后激发的信号传导通路及关键因子.在第叁种方法中，我们首先从烟草中克隆出病原物诱导性启动子(pathogen一inducible plant promoters，ppps)，然后将ppPs分别与报道基因一起引入烟草和拟南芥，检测harpinx。。及其具有不同功能的结构片段是否可以诱导PPPs的活性，是否由于ha印inxo。功能域作用于PPPs中特异性的顺式作用元件而赋予h田卫Inxo。的相应效应。1，IH日rPinE。诱导的植物过敏性细胞死亡与抗病性的关系及信号整合因子NORI和 EOS，的作用 H呷ins喷洒植物后可以诱导系统性获得杭病性(systemic acquired resistallce，5 AR)，但不会引发植物宏观可见的过敏反应(macro~HR)。杭病(R)基因介导的杭病防卫反应常常伴随有HCD的发生，但不总是有因果关系;同时，部分R基因的功能还需要信号集合因子NDRI或EDsl的调控或二者的共同调控.本研究试图回答以下问题:h哪ins诱导的杭病性是否需要HCD?HCD和抗病性的发生发展是否需要EDSI和NDRI? 首先，我们观察了在h抑inEa诱导植物抗病性、但不诱发macro~HR的情况下，植物组织是否发生其他形式的细胞死亡.结果表明，h哪碗。喷雾处理拟南芥和烟草后，虽然没有~ro一HR发生，但可以发生微敏反应(microscopichypersensitiveresPonse，micro一HR)。Micro一HR是一种发生机会少、限于一个到少数细胞、肉眼看不见的HCD形式，通常用仰pan blue染色、高浓度水合氛醛脱色后，在显微镜下才能看到。第二，侧定了h呷碗a诱导的micro.HR与SAR分子标志、即PR基因表达、杭病表型在发生时序与 harpinE。的浓度效应两方面的一致性。除了拟南芥突变体ndr了一1外，在野生型烟草和拟南芥、拟南芥突变体。del一1和不积累SA的NahG转基因植物上，micro一HR的发生与PR基因的诱导表达及抗病表型都是一致的，即在不同基因型植物上，有都有、无都无。其次，测定了sA积累受阻对h钟inE。诱导macro一HR和而cro一HR的影响，发现NahG拟南芥和烟草在用h哪i飞。喷雾处理后，两种形式的HCD都不能发生，也没有抗病性的增强。最后，通过研究突变体ndrl一I和edsl一1对h仰i、的反应，分析了NDRI和EDsl对h坤inE。诱导杭病性是否必要。突变体ndr]一]在用h呷inE。喷雾处理后，虽然有而cro一HR的发生，但是不能表达PR基因，也不能增强对尸syringae Pv.tomato DC3o00的杭性.在。d
夏侯珍珠[2]2007年在《核黄素受体蛋白与HpaG_（Xoo）蛋白对植物生长与防卫反应的影响》文中认为核黄素由植物、微生物产生。它在生物体内形成黄素单核苷酸FMN及黄素腺嘌呤二核苷酸FAD，FMN和FAD作为黄素酶的辅酶，参与机体组织呼吸链电子传递及氧化还原反应，参与植物抗氧化及过氧化过程，从而影响氧化性损伤及后续过敏反应过程中活性氧中间体(ROIs)的产生。ROIs是过敏细胞坏死的重要信号，能调节生长、抗病、抗虫、抗逆，所以核黄素与植物免疫反应有关。对多种植物体外施用核黄素的研究结果表明，核黄素具有促进生长、提高作物产量、增强植物抗逆能力的功效，并且能够诱导植物对多种病害的抗性，启动不同于其它已知的抗病信号通路，起到了多效性植物生长调节剂的作用。植物中的核黄素水平很可能对抗病防卫和生长发育过程有影响。因此，内源核黄素含量的变化可能对一些生理生化过程产生影响。我们以此为切入点研究核黄素参与的植物防卫和生长调控的交叉点。本实验室已将从中华鳖中克隆到的核黄素受体基因(riboflavin receptor protein，RIR)成功转化野生型拟南芥Col-0，获得转基因品系RIRA，其核黄素含量、株高、株型、开花时间等多种性状发生改变。为了进一步研究核黄素在植物生长和防卫过程中的作用，我们通过构建RIR的发夹结构得到RIR的沉默载体，转化拟南芥RIRA，将RIR沉默，获得沉默植株SiRB。然后比较Col-0、RIRA、SiRB叁者之间核黄素含量，植株生长表型以及抗病性的差别。结果表明：转基因拟南芥RIRA的核黄素含量比野生型高，生长较快，开花时间提前，抗病性增强；而沉默品系SiRB与RIRA相比，核黄素含量又有所降低，生长减慢，开花时间推迟，抗病性下降，接近恢复野生型的性状。研究表明RIRA较Col-0产生的各种有益表型源于RIR的作用以及内源核黄素含量的改变。内源核黄素含量的升高有助于增强拟南芥的生长，提高拟南芥对叶斑病菌DC3000的抗病性。人们已经在多种动物体内发现了RIR，植物体内是否也存在核黄素受体呢?为解析这个问题作者进行了初步尝试。根据中华鳖RIR与鸡RIR保守的功能域，从蛋白数据库(Swiss-prot)中比对寻找到拟南芥中可能编码RIR的基因，通过PCR方法从拟南芥cDNA中成功克隆并命名为AtRIR。构建其原核表达体系并且通过His-Tag融合基因系统得到了纯化的AtRIR蛋白，蛋白电泳证明蛋白质的大小符合预测的分子量约35kD。随后通过荧光淬灭实验分析发现AtRIR蛋白对核黄素具有一定的结合功能。但是拟南芥中AtRIR对于核黄素的功能调节究竟能够发挥多大的作用，尚待进一步研究证明。本研究为进一步解析植物核黄素信号识别与传导奠定了基础，开辟了新域。水稻白叶枯病菌产生的HpaG_(Xoo)属于harpin类蛋白质，可以诱导植物对真菌、病毒、细菌等多种病害的抗性，但能否诱导植物对卵菌病害的抗病性还尚待研究，作者报道了关于HpaG_(Xoo)诱导烟草对疫霉菌(黑胫病菌)抗性的研究结果。我们重组表达了具有生物活性的HpaG_(Xoo)蛋白，它在烟草上引起过敏反应的最低浓度是5μg／ml。在含有和不含HpaG_(Xoo)的固体培养基上烟草疫霉的生长速度无显着差别，在液体培养时，产生孢子囊和菌丝生长的能力都无显着差别；烟草疫霉致病相关重要基因parA1的表达也不受HpaG_(Xoo)影响。因此，证明HpaG_(Xoo)对卵菌无直接作用。烟草经HpaG_(Xoo)诱导后防卫相关基因NPR1、GST1、Chia5、PR-1b的表达水平明显提高；HpaG_(Xoo)处理后的烟草接种烟草疫霉，黑胫病的病斑长度减小79％。可见，HpaG_(Xoo)可以通过诱导植物防卫反应提高对卵菌的抗性。综上，核黄素和harpin作为两类不同的激发子，它们对植物生长和防卫都起着重要的作用。
张春玲[3]2009年在《乙烯、脱落酸和AtMYB44在HrpN_（Ea）诱导植物生长与抗虫防卫信号传导过程中的作用》文中研究指明革兰氏阴性植物病原细菌产生的harpin蛋白质在植物上可以引起多种效应,包括抗病、抗虫、抗旱,促植物生长等。HrpNEa是最早鉴定的harpin蛋白,由蔷薇科植物(如梨、苹果)火疫病菌(Erwinia amylovora)产生。以前研究表明,HrpNEa多重效应的原因在于它影响了植物不同的信号传导过程。HrpNEa通过脱落酸信号传导来诱发植物耐旱能力,2C型磷酸酶ABI2起关键调控作用。HrpNEa诱导拟南芥对桃蚜(Myzus persicae)的抗性及促进植物生长的作用均由乙烯信号传导通路进行调控,乙烯受体ETR1对HrpNEa诱导抗虫与促进植物生长均起关键作用。信号传导的下游发生分支,一个分支由金属运输蛋白EIN2控制,诱导植物对害虫的抗性；另一个分支由核酸外切酶EIN5进行调控,促进植物生长。作者研究的主要问题是：(1)HrpNEa启动的乙烯与脱落酸信号传导有何关系?(2)HrpNEa通过何种转录因子启动乙烯信号传导?(3)在HrpNEa启动乙烯信号传导的过程中,何种防卫机制参与植物对蚜虫的抗性?1、乙烯与脱落酸对HrpNEa诱导拟南芥抗旱与防卫的不同作用用HrpNEa溶液对拟南芥进行喷雾处理,蚜虫的繁殖数量有所减少。用etr1-1和abi2-1研究发现,乙烯而不是脱落酸在抗虫过程中是关键的,而且这一结果在野生型的药物抑制实验上也得到了验证。在拟南芥的野生型和etr1-1遭遇干旱胁迫时,外源使用HrpNEa可诱导其抗旱反应,而abi2-1没有这种效果,同时抑制野生型植株中脱落酸而不是乙烯合成也可取消这种效果。在另一组实验中,乙烯信号通路下游突变体ein2-1不能引发抗虫而脱落酸信号突变体abil-1在此过程中都没有效果。所有结果显示HrpNEa激活的信号通路可根据植物当时面临的挑战行使不同功能。2、HrpNEa诱导拟南芥抗虫作用过程中的转录因子筛选用HrpNEa处理拟南芥,研究了37个转录因子突变体中桃蚜趋避以及繁殖情况,寻找与植物抗虫性有关的转录因子。首先研究了HrpNEa处理后,突变体中驱避率的情况。在EVP和HrpNEa处理5天后,接种无翅桃蚜,24小时统计桃蚜逃跑的数量计算驱避率。在atmyb44突变体中,驱避率最低,即HrpNEa诱导植物抗桃蚜的效果在该突变体中被严重阻断。其次,通过驱避实验的筛选,选出9个转录因子突变体对蚜虫的繁殖情况进行研究。结果显示,只有在atmyb44突变体中HrpNEa不能抑制蚜虫繁殖。同时根据蚜虫趋避筛选的结果,选取部分基因用Northern方法进行验证。在13个选定基因中,除了MLN21.9外,12个基因上调表达,它们是AtMYB51,AtMYB38, AtMYB108, AtMYBIS, AtMYB30, AtMYB44, AtERF11, RAP2.12, F15H21.12, K13N2.14,AtHB-7和AtC3HC4。进一步的,用Realtime RT-PCR的方法确证转录因子被诱导的情况,结果显示包括AtMYB44在内的9个转录因子基因能被显着诱导。因此,我们筛选到了一个转录因子AtMYB44,可能参与调控HrpNEa诱导的拟南芥抗虫性。3、AtMYB44通过乙烯信号调控因子EIN2控制拟南芥对桃蚜繁殖发生抗性反应AtMYB44是拟南芥的一种转录因子,可以对乙烯发生感应,从而介入植物防卫反应。植物防卫反应经常受乙烯信号传导调控,而乙烯信号传导需要EIN2作为中心调控因子才能完成。我们以前研究表明,EIN2在HrpNEa诱导拟南芥对蚜虫产生防卫反应的过程中起关键作用,但AtMYB44调控的蛋白靶标及EIN2的转录调控机理都还不清楚。通过使用遗传学、微生物学及药理学等方法进行研究,我们得到一系列证据,表明AtMYB44、EIN2和乙烯在对HrpNEa诱导拟南芥对蚜虫产生抗性的过程中都是必需的因子。野生型拟南芥用HrpNEa处理后,对人工定殖在叶片上的蚜虫产生抗性反应,结果抑制了蚜虫的繁殖能力。这一效应并不能在拟南芥突变体atmyb44内发生,该突变体的AtMYB44基因启动子区被破坏。把野生型AtMYB44启动子中既受HrpNEa诱导又受乙烯诱导的一个片段与AtMYB44编码序列重组,并用重组单元对atmyb44进行遗传互补,互补的结果是把atmyb44的抗蚜能力恢复到野生型水平。将AtMYB44基因与花椰菜花叶病毒35S启动子重组并转入atmyb44,转基因植物获得了组成型表达AtMYB44基因与抗桃蚜繁殖的能力。野生型拟南芥与经过遗传互补atmyb44转基因均能对乙烯发生反应,无论乙烯由人工施加到植物生长环境还是通过HrpNEa诱导而在植物体内产生,两种来源的乙烯作用类似,均可诱导AtMYB44与EIN2两种基因的表达。在atmyb44得到遗传互补的转基因植物细胞内,AtMYB44蛋白定位到细胞核,并与EIN2启动子发生特异结合。用HrpNEa处理植株,既促进了AtMYB44蛋白的产生,也提高了AtMYB44与EIN2互作的能力,还增强了EIN2的表达水平。得到遗传互补的atmyb44转基因系与野生型一样,在不受HrpNEa诱导的条件下,人工定殖的蚜虫可以诱导这两类植物表达AtMYB44和EIN2基因,同时诱导这两类植物对第二次定殖的蚜虫产生抗蚜性反应,而基因表达与抗虫反应在atmyb44体内均不能被蚜虫所诱导。这些试验结果表明,AtMYB44通过启动EIN2的表达来控制拟南芥对蚜虫的抗性。这一调控过程无论对诱导抗性还是免疫反应均显示功能,代表了植物抵抗食植昆虫的一种重要防卫机制。4、HrpNEa诱导的韧皮部防卫反应有助于拟南芥对蚜虫的抗性植物韧皮部相关的防卫反应(plant phloem-related defense, PRD)在防卫刺吸式昆虫取食中起作用。已知HrpNEa类生物激发子能够激发抗虫信号传导途径,可能参与了韧皮部防卫反应的诱导,但是抗虫途径如何调节植物韧皮部相关的防卫反应反应仍是未知的。原位杂交及化学发光实验结果证明HrpNEa处理后可以诱导韧皮部蛋白及沉积胼胝质,两者在韧皮部积累增加,构成了PRD反应,对趋避蚜虫、减少蚜虫韧皮部取食活动起一定作用。突变体分析表明,HrpNEa诱导植物韧皮部相关的防卫反应需要EIN2和ABI2。5、创新点(1)乙烯与脱落酸对HrpNEa诱导拟南芥抗旱与防卫起不同作用,乙烯对HrpNEa诱导抗虫的效应至关重要,脱落酸对HrpNEa诱导的抗旱过程起关键作用。(2)AtMYB44通过启动EIN2的表达来控制拟南芥对桃蚜的抗性。(3)韧皮部防卫反应在HrpNEa诱导拟南芥对桃蚜的抗性发生过程中起重要作用。
桑素玲[4]2011年在《质外体过氧化氢与水通道蛋白PIP1；4对Hpa1蛋白诱导拟南芥抗病性的调控作用》文中进行了进一步梳理Harpin是由革兰氏阴性植物病原细菌产生的性质和功能相似的一类蛋白质,影响病原菌在寄主植物上的致病性和非寄主植物上的过敏反应(HR)。外施的harpin能诱导植物抗病、抗虫和抗旱,并且也能促进植物的生长。Harpin的这些多效性是由于激活了多种不同的信号通路,包括植物激素的转导、活性氧簇信号、离子通道、细胞程序性死亡、系统获得抗性(SAR)或水杨酸和蛋白质激酶级联等。到目前为止,harpin几乎从所有的革兰氏阴性植物病原细菌中被鉴定出来。Harpin能激活植物生长和防卫反应信号通路,但是,在植物中,一种harpin蛋白在一个信号通路中如何能被识别?一个特定的harpin在植物中的受体是什么?这个信号如何被转导到细胞内?能把细菌效应蛋白,特别是Ⅲ型效应子从植物细胞外转运到细胞内的植物转位子是什么?目前都还不清楚。本研究使用HpalXoo,它由水稻白叶枯病原细菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)产生,分子量15.6kD,比其他病原细菌的harpin(最大44kD)都小,但生物活性强。本研究着重剖析HpalXoo在植物中的亚细胞定位与后续反应之间的关系,质外体的H_2O_2如何参与植物防卫反应,HpalXoo蛋白在信号通路中如何被植物中的蛋白识别以及识别之后对植物产生的影响。1.转基因植物产生的HpalXoo蛋白在质外体定位诱导H2O2产生与向细胞质转移及对抗病性的影响已有的研究证明,革兰氏阴性植物病原细菌分泌的harpin蛋白能够激活植物防卫反应信号通路,包括产生于质外体的H2O2信号的转导,但是,一种harpin蛋白在一个信号通路中如何被识别以及质外体的H2O2如何参与防卫反应,还不清楚。本章中,我们研究了来源于水稻白叶枯病原细菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae)的harpin蛋白HpalXoo在拟南芥中是否影响了H2O2的产生以及植物的抗病性。把HpalXoo和融合了质外体定位信号基因(S)的HpalXoo (SHpalxoo)转入拟南芥,分别产生了转基因拟南芥植株HETAt和SHETAt。本研究发现,转基因拟南芥抗丁香假单胞番茄致病变种菌株DC3000(Pst DC3000)和大白菜软腐病菌菌株RL4(Pcc RL4)。HpalXoo定位于HETAt的细胞质和SHETAt的质外体和细胞膜,H2O2积累于HETAt的细胞质和SHETA的质外体和细胞质。已经知道,质外体中的H2O2是由质膜上的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX)产生的,这是植物防卫反应的一个普遍特征。H2O2产生于HETAt的细胞质和SHETAt的质外体,并且产生于质外体的H2O2依赖于NOX。当HpalXoo处理WT植物时,HpalXoo定位于质外体并在质外体中诱导H2O2的产生,但是质外体和细胞质中都有H2O2的积累。在SHETAt和HpalXoo处理的野生型(WT)拟南芥中,如果抑制质外体中H2O2的产生,细胞质中就没有H2O2的积累并且植物失去抗病能力。这些结果说明,HpalXoo诱导的产生于质外体的H202在参与植物调节抗病过程中需要从质外体运转到细胞质中。2. HpalXoo促进转基因拟南芥生长的作用不依赖于H2O2已有的研究证明,harpin能激活植物的生长信号通路。但是,一种harpin蛋白在一个信号通路中如何被识别以及harpin蛋白诱导的H2O2是否参与生长信号通路,还不清楚。在第一章中,我们产生了转基因拟南芥植株HETAt和SHETAt。本研究发现,转基因拟南芥植株HETAt和SHETAt的生长快于对照植株,并且植株体内的与生长相关基因表达增强。在SHETAt中,H2O2的积累依赖于质膜NADPH氧化酶活性,并且H2O2的积累不影响植株的生长。在HETAt中,H2O2含量的上升与NADPH氧化酶无关,H2O2的产生也不影响植株的生长。外施的HpalXoo能促进野生型拟南芥(WT)的生长,HpalXoo诱导的产生于质外体的H2O2以及积累于质外体和细胞内的H202与促生长无关。这些实验结果说明,HpalXoo能够激活植物的生长信号通路,并且这个信号通路与HpalXoo诱导的H2O2无关。3. Hpalxoo与PIP1；4蛋白在拟南芥细胞膜上的互作验证前两章已经证明,转入拟南芥的HpalXoo定位于植物的细胞外和细胞内,诱导植物的防卫反应,并能促进植物生长。基于HpalXoo的这些有益表型,本章中,为了试图解析HpalXoo的作用机理,以HpalXoo为诱饵对拟南芥cDNA文库进行筛选,初步筛选到6个阳性克隆,其中包括植物水通道蛋白PIP1；4。通过普通的酵母双杂交体系(Yeast two-hybrid system, Y2H)、膜酵母双杂交体系(Membrane yeast two-hybrid system, MYTH)、Pull-down assay、双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)和荧光染料的观察证实了HpalXoo与PIP1；4的互作,并且互作发生在植物的细胞膜上。而N端缺失53个氨基酸的HpalXoo蛋白(ANT)则不能与PIP1；4发生相互作用。4. HpalXoo与PIP1；4蛋白互作促进拟南芥的生长与诱导其抗病的初步研究证实HpalXoo与PIP1；4互作之后,为了研究这两个蛋白的互作对植物产生的影响,从拟南芥研究中心购买了8种atpipl;4拟南芥(CS803583、CS870828、CS872202、 CS876999、CS879846、CS879691、CS870571和SALK_147568)种子。这些突变体都是T2代杂合体,通过卡那霉素和Basta抗性筛选,从每一种突变体中都筛选到了纯合体。利用原核表达体系表达了HpalXoo和ΔNT并用蛋白纯化试剂盒纯化了这两个蛋白。通过表型观察发现,HpalXoo处理的WT拟南芥长势最好,而HpalXoo处理的atpip1;4拟南芥与ANT或水处理的WT和atpip1;4拟南芥生长表型一致,长势都弱于HpalXoo处理的WT。Pst DC3000接种实验发现,HpalXoo处理的WT拟南芥抗病最强,而HpalXoo处理的atpip1;4拟南芥与ΔNT或水处理的WT和atpip1;4拟南芥易感病。这些试验结果说明,PIP1；4与HpalXoo的互作不仅能够促进拟南芥的生长,也能够诱导拟南芥对病原菌的抗性。
参考文献：
[1]. 两类激发子（harpins和核黄素）启动植物抗病防卫和生长信号传导的分子遗传学解析[D]. 彭建令. 南京农业大学. 2003
[2]. 核黄素受体蛋白与HpaG_（Xoo）蛋白对植物生长与防卫反应的影响[D]. 夏侯珍珠. 南京农业大学. 2007
[3]. 乙烯、脱落酸和AtMYB44在HrpN_（Ea）诱导植物生长与抗虫防卫信号传导过程中的作用[D]. 张春玲. 南京农业大学. 2009
[4]. 质外体过氧化氢与水通道蛋白PIP1；4对Hpa1蛋白诱导拟南芥抗病性的调控作用[D]. 桑素玲. 南京农业大学. 2011