福建省福州市第六医院 福建福州
【摘 要】目的：探讨糖化血红蛋白的检测方法，分析干扰检测结果的因素。方法：以本院2013年10月～2015年10月收治的贫血（26例）、肾功能衰竭（31例）、服用阿司匹林治疗（35例）的患者为研究对象，并以同期在本院中进行体检的健康者（30例）为对照组，均采用不同方法检测糖化血红蛋白（HbAlc），比较检测结果。结果：贫血组、阿司匹林组及肾功能衰竭组患者中，毛细血管电泳法HbAlc检测结果均高于其他两种方法，差异具有统计学意义（P＜0.05）；对照组三种方法HbAlc检测结果差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：临床上用于检测HbAlc的方法比较多，且易受多种因素干扰，报告结果时应考虑到检测方法及患者自身因素干扰，为临床提供合理准确的分析。
【关键词】糖化血红蛋白；检测方法；干扰因素
糖化血红蛋白（HbAlc）是糖尿病诊断与监测中一项十分重要的指标。目前，临床上可用于检测HbAlc的方法比较多，每种方法所具备的优势各不相同，而且有些方法受到多种因素的干扰，例如血红蛋白变异体、血液系统疾病等，导致检测的准确性降低。本研究以4组不同人群为研究对象，分别采用毛细血管电泳法、离子交换层析法及免疫比浊法检测，观察检测结果，现报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
以本院2013年10月～2015年10月收治的贫血（26例）、肾功能衰竭（31例）、服用阿司匹林治疗（35例）的患者为研究对象。贫血组26例患者中，男16例，女10例；年龄51～82岁，平均（63.4±3.2）岁；均符合贫血临床诊断标准。肾功能衰竭组31例患者中，男19例，女12例；年龄49～81岁，平均（63.2±3.5）岁。阿司匹林组35例患者中，男20例，女15例；年龄43～85岁，平均（62.8±3.1）岁，均服用阿司匹林1个月以上。另以同期在本院进行体检的健康者30例为对照组，男18例，女12例；年龄37～72岁，平均（49.5±3.1）岁。四组人群一般资料不存在差异，无统计学意义（P＞0.05）。
1.2 标本采集
患者组和对照组均于清晨抽取空腹静脉血，注入到EDTA-K2抗凝管中，充分混匀，待检测用。
1.3 仪器和方法
患者组和对照组均采用毛细血管电泳法、离子交换层析法及免疫比浊法检测HbAlc水平。先利用毛细血管电泳法检测HbAlc水平，检测仪器为Sebia CaPilary毛细血管蛋白电泳分析仪，利用HbAlc试剂盒进行检测，操作严格按照说明进行。接着利用离子交换层析法检测，检测仪器为DS-5糖化血红蛋白检测仪。最后利用免疫比浊法检测，检测仪器为Becman Au5400全自动生化仪。
1.4统计学分析
采用SPSS18.0统计分析，平均数±标准差（ ）表示计量资料，利用t检验，P＜0.05表明差异具有统计学意义。
2结果
贫血组、阿司匹林组及肾功能衰竭组患者中，毛细血管电泳法HbAlc检测结果均高于其他两种方法，差异具有统计学意义（P＜0.05）；对照组三种方法HbAlc检测结果差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。
注：与毛细血管电泳法比较，*P＜0.05。
3讨论
糖尿病为临床常见病，对患者身体健康及生活质量会产生严重的影响，临床诊断糖尿病及监测血糖控制效果，一项重要指标即为糖化血红蛋白（HbAlc）。
目前，可采用的检测HbAlc方法比较多，主要包含以下几种：（1）电泳法：此种检测方法是以糖化Hb所带电荷与非糖化Hb所带电荷为基础，因其具有高效率、低成本、高选择性等优点而被用于HbA1c的检测，但其检测结果受药物、血红蛋白病等因素影响[1]；（2）离子交换层析法：此种分析方法的基础为电荷差异，血红蛋白（Hb）β链N末端缬氨酸（Val）与葡萄糖（Glu）结合后，会降低等电点，减少糖化Hb携带的正电荷，降低树脂附着力，在不同的时间内，Hb利用缓冲液（离子强度不同）进行洗脱，促使其脱离阳离子交换柱，之后以峰值下面积为依据，将HbAlc占Hb的比例计算出来，但在洗脱过程中，Hb变异体也会一起脱离，导致HbAlc的计算值存在一定误差，尽管在其应用的过程中对其进行了完善，但有些因素的干扰依然存在[2]；（3）免疫学分析法：此方法基于抗原抗体特异性结合的原理进行检测的，因而能有效避免电荷数改变引起的干扰，但其准确性会受到抗原决定簇、亲和力的影响。但值得注意的是Hb发生β链改变及红细胞寿命异常时，免疫比浊法同样会受到影响[3]。（4）亲和色谱法：此种检测方法在进行分析时，以糖化Hb结构及非糖化Hb结构为依据，利用糖化Hb与硼酸结合形成可逆性复合物，洗脱时，先分离出来的为未糖化Hb，糖化Hb通过山梨醇洗脱出来。此检测不受温度、尿毒症、胎儿Hb（HbF）等因素干扰，因其操作简单，用血量少，快速等特点可用于床边检测[4]；
利用上述方法检测HbAlc时，存在的干扰因素总结起来，包含以下三点：（1）Hb变异体：Hb变异体不管是病理性或是生理性的，HbAlc检测的准确性均会受到此种因素的影响，而且判读检测结果时，也会受到一定的干预。多数Hb变异体发生突变的点为α链、β链或δ链。在β链上，缬氨酸替代了第6位的谷氨酸时，即会形成HbS，谷氨酸替代了第6位赖氨酸时，形成HbC，赖氨酸替代了第26位谷氨酸时，形成HbE，位于β链第121位的谷氨酸突变为谷氨酰胺时，形成HbD，当Hb的γ链替代了β链之后，即会形成HbF，这些Hb变异体的流行分布具备比较大的差异，最为常见的即为HbS、HbE、HbC、HbD，而在东南亚中，最为常见的为HbE[5]。（2）Hb化学修饰产物：Hb化学修饰作用也会影响HbAlc的检测结果，氨甲酰化Hb（肾病患者）与乙酰化Hb（服用阿司匹林治疗患者）为常见的Hb化学修饰产物，高浓度尿素形成异氰酸，并与Hb N末端氨基酸相结合的过程即为氨甲酰化过程，利用离子交换色谱法、电泳法检测HbAlc时，检测结果较易受到此种因素的干扰，免疫化学分析法受到的干扰比较少，在尿毒症及非尿毒症患者中，含有相同的HbAlc值，但含有不同的氨甲酰化Hb值时，如果利用离子交换色谱法检测，尿毒症患者的HbAlc会高于非尿毒症患者，但采用免疫化学分析法检测时，检测结果的差距比较小[6]。（3）其他非Hb因素：Hb正常代谢为HbAlc检测的基础。任何影响红细胞寿命的因素均影响HbAlc检测，如贫血，大量失血，输血等，过快的代谢Hb使得HbAlc的检测结果降低。当贫血患者为缺铁性贫血时，会因提高衰老红细胞占据的比例，使HbAlc检测假性增高[7]。
综上所述，检测糖化血红蛋白（HbAlc）时，应综合考虑仪器的干扰及患者所存在的影响因素，选择合适的检测方法，提高检测结果的准确性。
参考文献：
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[7]于秀娟，欧超伟. 糖化血红蛋白检测的影响因素及临床意义[J].中国老年学杂志，2013，19（10）：4930-4933.
作者简介：郑敏琪、女、汉族、福建福州人、1984年7月、本科学历、检验师
论文作者:郑敏琪
论文发表刊物:《航空军医》2016年第14期
论文发表时间:2016/9/5
标签：血红蛋白论文; 患者论文; 因素论文; 电泳论文; 干扰论文; 方法论文; 层析论文; 《航空军医》2016年第14期论文;