龚洪涛 杜凤和 陈步星通讯作者 首都医科大学附属北京天坛医院 北京 １０００５０
【摘要】 目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因的插入/缺失(I/D)多态性与替米沙坦降压疗效之间的关系.方法符合WHO/ISH 高血压诊断标准的轻中度高血压患者１４８例,服用替米沙坦单药治疗８周,在临床观察疗效的同时,应用聚合酶链反应(PCR)对患者ACE基因I/D多态性进行分析,同时测定空腹血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)等生物化学指标.结果ACEI/D各基因型在药物治疗后每一组患者的血压均有下降,每一组治疗前后SBP、DBP的差异均有显著统计学意义(P＜０．０５);而治疗前后收缩压、舒张压及降压幅度在各组之间无明显差异(P＞０．０５).结论ACEI/D基因多态性与替米沙坦降压疗效无相关性. 【关键词】 高血压; 血管紧张素转换酶; 基因多态性; 血管紧张素II１型受体拮抗剂AssociationBetweenPolymorphismofAngiotensinConvertingEnzymeGeneandpressure－lowingresponsetotelmisartantreatmentinHypertensionpatients GONGHong－taoDUFeng －heCHEN Bu －xing (Departmentof Cardiology,Beijing Tiantan Hospital,CapitalUniversityof MedicalScience,Beijing１０００５０,China)【Abstract】 Objective:Toinvestigatewhethertheinsertion/deletion(I/D)polymorphismofangiotensinconvertingenzyme(ACE)geneareassociatedwithbloodpressureresponsetotelmisartaninhypertensivepatients．Methods:Afteratwo－weeksingle－blindplaceborun－inperiod,１４８patientswithmild－tomoderateprimaryhypertensionreceivedmonotherapywith８０mg/dayoftelmisartanandthenwerefollowedupforeightweeks．Theinsertion/deletion(I/D)polyＧmorphismofangiotensinconvertingenzyme(ACE)geneweredeterminedthroughPCRanalysis．Therelationshipbetweenthispolymorphismandchangesinbloodpressurewasobservedandevaluatedaftereightweekstreatment．Results:ThebloodpressureineachgroupofACEI/DgenotypedecreasedaftermedicaltreatＧment．Comparedtobloodpressurebeforetreatment,systolicbloodpressure(SBP)anddiastolicbloodpressure(DBP)ineachgroupaftertreatmenthadsignificantstatisticalsignificance(P ＜０．０５)．Andsystolicbloodpressure,diastolicpressurebeforeandaftertreatmentandpressure－lowingrangeineachgrouphavenoobviousdifference(P ＞０．０５)．Conclusions:WeconcludethatACEI/Disnotassociatedwithbloodpressureresponsetotelmisartantreatmentinhypertensivepatien【tKse．ywords】 Essentialhypertension; Angiotensinconvertingenzyme; Singlenucleotidepolymorphism; AngiotensinIIreceptorblocker 【中图分类号】R５４４．１【文献标识码】A 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１０－０４１４－０２高血压是一种多基因遗传疾病,降压药物治疗是临床控制高血压最主要途径,高血压患者对降压药物的疗效存在个体差异,如何为每位患者选择最适合的降压药物,进行个体化治疗,已经成为一个新的挑战.肾素－__________血管紧张素系统是体内调节血压和水电平衡的主要系统,在高血压的发生、发展过程中起着重要作用,RAS基因与高血压密切相关.目前认为,该系统基因的多态性可能会影响个体对降压药物的反应,关于该系统基因的多态性与某些降压药物疗效的关系的研究已有报道,主要集中在利尿剂[１]、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)[２]等,而对于血管紧张素II１型受体拮抗剂(ARB)的研究相对较少. 血管紧张素转化酶(angiotensinconversionenzyme,ACE)是血管紧张素Ⅰ(angiotensinⅠ,AngⅠ)转换为血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)和缓激肽灭活的关键酶.ACE 基因位于染色体１７q２３ ,其１６ 内含子中有一段２８７bp序列的插入/缺失(insertion/deletion,I/D)多态性,对于ACEI/D多态性的研究已成为近年来的热点之一,本研究对原发性高血压病患者采用ARB(替米沙坦)单药治疗,在观察降压疗效的同时对ACEI/D 基因型进行分析,探讨ACEI/D多态性与替米沙坦降压疗效的关系,为临床降压药物的选择提供依据.
１ 对象与方法
１．１ 对象选择门诊高血压患者,依据WHO/ISH 高血压诊断标准,均诊断为原发性高血压,选择１－２ 级病人坐位舒张压９５－１０９mmHg,收缩压１４０－１８０mmHg,所有患者均未用或停用抗高血压药物,并服用安慰剂２周,同日测量座位血压３次取均值,最后共有１４８例病人入选本研究,其中男６７例,女８１ 例,年龄３５－７７岁,平均５３．７±１０．６岁,均为汉族.排除继发性高血压,严重心功能不全,严重肝肾功能障碍,３ 个月内有心肌梗死及脑卒中,妊娠或哺乳妇女.
１．２ 给药方法及人体基本参数测定所有入选高血压患者均给予替米沙坦(德国勃林格殷格翰公司生产)８０mg/d,晨７－１０点顿服,共治疗８周,每周测血压１－２次,均在上午由同一测量者测量;血压测量时静坐１０min,标准台式血压计坐位连续测量３ 次,每次间隔１０min,取其均值.同时测定身高、体重、心率等,以体重/身高２ 计算体重指数(bodymassindex,BMI).
１．３ 生物化学指标测定抽取空腹静脉血,离心取血清,采用生化分析仪检测空腹血糖、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(totalcholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)等生物化学指标.
１．４ DNA 提取取冷冻EDTA 抗凝全血,水浴解冻,E．Z．N．ATM BloodDNA Kit(OMEＧGA)试剂盒提取DNA,－２０℃保存. １．５ 聚合酶链反应(PCR)扩增ACEI/DPCR 引物:上游引物序列:５’－CTGGAGACCACTCCCATCＧCTTTCT－３’,下游引物序列:５’－GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT－３’.反应体系为１０l,包括２０ng基因组DNA２．０l,PCR 引物(５pmol/l)各０．６l,２×TaqPCR MasterMix５l,用灭菌蒸馏水补充至１０l.PCR 反应参数: 首先９５℃变性１０分钟,随后进行３５个循环,每一循环包括９４℃变性３０秒,分别在５８℃和６２℃退火３０秒,７２℃延伸４０秒.最后,７２℃延伸１０分钟,４℃保存.PCR 产物经２％琼脂糖凝胶电泳,EB 染色,凝胶成像仪成像. １．６ 统计学方法应用SSPS１９统计软件包.所有计量资料用均数±标准差(±s)表示,计数资料用百分比表示.遗传平衡检验采用哈代－温伯格(Hardy－Weinberg) 平衡定律.治疗组间计量资料比较采用t检验或方差分析;药物治疗前后的比较采用配对t检验;P＜０．０５为差别有统计学意义,P＜０．０１为差别有显著统计学意义.
２ 结果１４８例患者中,４３例为II基因型(２９％),６４例ID基因型(４３％),４１例DD 基因型(２８％),I等位基因频率为５０．５％,D等位基因频率为４９．５％,群体经检验符合Hardy－Weinberg平衡.不同基因型组间的性别、年龄、体重指数、实验室检查及治疗前后心率等的差异无统计学意义(P＞０．０５)表１.药物治疗后每一组患者的血压均有下降,每一组治疗前后SBP、DBP的差异均有显著统计学意义(P＜０．０５);治疗前后收缩压、舒张压及降压幅度在各组之间无明显差异(P＞０．０５)表２.
３ 讨论
血管紧张素转换酶(ACE)是血管紧张素II(AngII)生成的限速酶,其活性决定AngII的生成量,ACEI/D 是其基因第１６ 个内含子上一段重复序列(２８７bp)插入/缺失突变.这种多态性显著地影响血浆和细胞的ACE水平,DD 型最高,ID型次之,II型最低,因而推测等位基因D在ACE基因表达调控中起活化作用,而等位基因I起抑制作用[３].近来有部分关于ACEI/D 与抗高血压药物药效差异的相关性研究,Kurland等[４]发现应用ARBs治疗后,ACEII 基因型患者舒张压下降显著高于ID、DD 基因型患者(－１８±１２mmHg比－８±１１mmHg、－６±９mmHg),提示ACE基因型影响个体对厄贝沙坦的反应,II 基因型患者用厄贝沙坦降压效应优于ID、DD基因型患者.Ortlepp等[５]的研究结果与此不同,他们认为D等位基因纯合子个体反应率(治疗后舒张压＜８５mmHg)最高:DD４５％,ID３３％,II１６％(P＝０．１１３),但无统计学意义. 本研究结果显示,ACEDD基因型患者收缩压下降高于ID、II基因型患者(２０．７±１５．０mmHg比１５．２±１３．７、１６．９±１４．７mmHg),但无统计学意义(P＝０．３４６),舒张压的下降程度在三组间无明显差异(P＝０．８０６),与Ortlepp等研究结果相近.本研究的另一部分显示,DD 基因型与高血压相关[６],但本研究未发现ACE基因I/D多态性与替米沙坦降压疗效相关,可能原因:首先,对于降压药物,药效学机制在个体间的疗效差异中起主要作用,药物动力学机制决定了药物在体内过程,目前尚未发现肾素系中单一基因多态性对某一降压药物的代谢、吸收、分布和清除有明显影响.其次,高血压是多基因遗传病,ACE基因可能与其它的基因共同作用影响降压疗效,再者,导致研究结果之间的差异的可能原因:不同人群中ACE基因型分布的差异,应用不同的药物以及不同的设计方案和试验周期,都会影响研究结果之间的差异,因此关于ACEI/D多态性与ARB降压疗效的关系,有待于在大规模的临床试验中进一步研究. 参考文献[１] LiY,YangP,WuSL,etal．EffectofCYP１１B２gene－３４４T/CpolyＧmorphismonrennin－angiotensin－aldosteronesystemactivityandbloodpressureresponsetohydrochlorothiazide[J]．ZhonghuaYiXueYiChuan[ XueZaZhi,２０１２,２９(１):６８－－７１． ２] Hannila－ Handelberg T,Kontula KK,Paukku K,etal．Commongeneticvariationsoftherennin－angiontensin－aldosteronesystemandresponsetoacuteangiotensinconvertingenzymeinhibitioninessential[ hypertension[J]．JHypertens,２０１０,２８(４):７７１－７７９． ３] PonttetholR,Paveta M,ViazziP,etal．Geneticpolymorphismoftherennin－angiotensinsystemandorgandamageinessentialhypertension．[ KidneyInt,２０００,５７(２):５６１－５６９． ４] Kurland L,Melhus H,KarlessonJ,etal．AngiotensinconvertingenzymegenepolymorphismpredictsbloodpressuretoangiotensinIIreＧceptortype I antagonisttreatmentin hypertensive patients[J]．J[ Hypertens２００１,１９(１０):１７８３－１７８７． ５] OrtleppJB,HanrathP,MevissenV,etal．VariantsoftheCYP１１B２genepredictresponsetotherapy withcandesartan．EurJPharmacol ,[ ２００２,４４５(１－２):１５１－１５２． ６] 龚洪涛,马先林,杜凤和．血管紧张素转换酶和醛固酮合成酶基因多态性与原发性高血压的关系研究[J]．中国全科医学,２０１１,１４(２３):２６０９－２６１１．
论文作者:龚洪涛 杜凤和 陈步星
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年9月供稿
论文发表时间:2016/2/24
标签：多态性论文; 高血压论文; 基因论文; 疗效论文; 血管论文; 基因型论文; 药物论文; 《中国综合临床》2015年9月供稿论文;