（1四川医科大学附属第一医院皮肤性病科 610000）
（2泸州市第二人民医院 646100；3泸州市纳溪区中医院 646000）
【摘要】目的：了解川南地区女性非淋菌性尿道炎（NGU）患者单纯疱疹病毒（HSV）感染情况。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对134例临床诊断为NGU的女性患者和62例参加健康体检妇女生殖道分泌物进行HSV检测。结果：134例女性NGU患者中，检测出HSV阳性者36例，阳性率26.87%（36/134）；62例健康妇女体检中，HSV阳性者3例，阳性率4.84%（3/62），患者组与对照组比较差异有显著意义（x2=107.45，P<0.05）。结论：NGU女性患者容易合并HSV感染，FQ—PCR快速、简便，特异性高，灵敏度强，操作简便，此法用于检测HSV，可诊断且可分型，有利于UGN患者合并HSV感染的早期诊断和及时治疗。
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【关键词】女性；NGU；分泌物；HSV；检测；川南地区
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）33-0024-02
The female genital tract secretions NGU patients the detection of HSV
Deng Mao, Li Liao, Yan Dan (corresponding author). First Hospital Affiliated to Sichuan Medical University, Sichuan Province, Chengdu 610000, China;
Huang Wencai, The Second People's Hospital of Luzhou, Sichuan Province,Luzhou 6461003, China;
Zhao Jialan. The Traditional Chinese Medicine Hospital of Naxi District, LuzhouCity, Sichuan Province, Luzhou 646000, China
【Abstract】Objective In the basis of understanding of sex of gonococcus of women blame urethritis (NGU) patients with herpes simplex virus (HSV) infection. Methods Using fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ - PCR) technique in 134 cases of clinical diagnosis for the healthy check-up of the female patients and 62 cases of NGU women's genital tract secretions detection of HSV. Results Of 134 cases of female patients with NGU, detect HSV was 36 cases, positive rate 26.87% (36/134); 62 cases of healthy women in the physical examination, HSV was 3 cases, a group of patients with positive rate 4.84% (3/62), there are significant difference compared with control group significance (chi-square = 107.45, P < 0.05). Conclusions NGU women easy to merge HSV infection, FQ - PCR is rapid, simple, high specificity, strong sensitivity, simple operation, this method is used to detect HSV, can diagnosis and classification, is conducive to UGN combined HSV infection in patients with early diagnosis and timely treatment.
【Key words】Women; NGU. Secretion; HSV. Detection; Sichuan region
NGU是最常见的性传播疾病之一，其致病原因主要是感染了沙眼衣原体及解脲支原体[1]，近年来NGU患者感染HSV的情况已受到关注[2]，为了解川南地区女性NGU患者感染HSV情况，我们用FQ—PCR对134例送检的NGU女性患者标本和62例健康体检妇女标本进行HSV检测，现报告如下。
1.资料与方法
1.1病例资料
134例女性患者按照NGU诊断标准[3]已明确诊断为NGU，她们来源于我院皮肤性病科、泌尿外科和妇产科；来源于泸州市第二人民医院、泸州市纳溪区中医院的性病科和妇产科，年龄在19～51岁，平均33.6岁。对照组标本来源于来我院进行健康体检的妇女，年龄28～55岁，平均32.8岁，UU（支原体）、CT（衣原体）检测均为阴性。
1.2标本采集
用无菌棉拭子插入女性宫颈管内2cm左右，轻轻旋转以获取足够的上皮细胞和分泌物，停留约10s后轻轻取出，置-20℃冰箱中保存待检。
1.3试剂与仪器
HSV荧光定量PCR的试剂盒购于深圳匹基生物技术有限公司；使用杭州大和热磁电子有限公司生产的基因扩增仪（TC—96/T/H）和上海棱光技术有限公司生产的微量荧光检测仪（DA620）。
1.4 方法
1.4.1引物设计 在单纯疱疹病毒DNA聚合酶基因保守序列区设计一对引物[4]：51-AAGGAGGCGCCCAAGCGTCCG-31和51-TGGGGTACAGGCTGGCAAAGT-31，HSV-I扩增长片段度为299bp，HSV-Ⅱ扩增片段长度为241bp。
1.4.2标本处理 将所取标本置1ml生理盐水中，15000r/min离心5min，弃上清液，在沉淀中加入50ulDNA提取液，充分混匀，煮沸10min，1000r/min离心5min，取上清液2ul作FQ-PCR反应。
1.4.3 FQ-PCR检测 标本经过DNA提取液裂解后，取制备好的DNA模板2ul做PCR，同时做标准曲线，且设阴阳对照管。循环条件：93℃预变性2min，然后按93℃45s、55℃60s做10个循环，最后按93℃30s、55℃45s做30个循环；保存文件，运行程序。工作结束，仪器自动计算出检测结果。阳性标本定量对数平均值为2.4×106。
1.5 统计学处理
数据处理用x2检验。
2.结果
2.1 在134例NGU女性患者（患者组）中，检出HSV阳性36例，占26.87%（34/134）；其中HSV-II阳性 18例，占13.43%（18/134）,HSV-I阳性12例，占8.96%（12/134），HSV-II和HSV-I均阳性6例，占4.48%（6/134）。
2.2 在62例健康体检妇女（对照组）中，检出HSV阳性者3例，占4.84%（3/62），这3例均是HSV-I，未检出HSV-II。
3.讨论
NGU目前在西方欧美的一些国家已位居性传播疾病之首，在我国其发病率也日渐增多，已成为最常见的性传播疾病之一。NGU是由除淋球菌以外的多种病原体感染引起的尿道炎的总称，NGU的病原体复杂多样。近年来NGU患者合并感染HSV的情况已受到广大医务人员关注。本实验检测的结果表明，女性NGU患者组感染HSV阳性率为26.87%，其中HSV-II阳性18例，占13.43%（18/134）,HSV-I阳性12例，占8.96%（12/134），HSV-II和HSV-I均阳性6例，占4.48%（6/134）。
说明患者合并感染HSV的主要是HSV-II；对照组感染HSV-II的阳性率仅为4.48%，且无HSV-I感染，两个组感染HSV-II的情况相比较差异显著（x2=106.45，P<0.05），说明女性NGU患者有可能合并HSV感染，而且主要是合并HSV-II的感染。FQ-PCR技术具有简便、快速、准确、特异性高的特点，此法用于检测HSV特异性DNA，既可诊断又可分型，有利于UGN患者合并HSV感染的早期诊断和及时治疗。
【参考文献】
[1] Braverman PK，Strasburger VC. Sexually Transmitted Diseases .Clin Pediat Phila.1994,33(1):26-37
[2] Ralph Madeb，Need for Diagnostic Screening of Herpes Simplex Virus in Patients with Nongoncoccal Urethritis. Clinical Infectious Diseases.2000，30(2):982
[3] 叶干运，徐文严等，主编.性传播疾病.南京：江苏科学技术出版社，1988.43
[4] 张学军主编.皮肤性病学.第五版.北京：人民卫生出版社，2001.190.
论文作者:邓茂1,黄文才2,赵家兰3,李燎1,颜丹1(通讯作者
论文发表刊物:《医药前沿》2015年11月第33期
论文发表时间:2016/4/29
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