李立纪1 张风雷1 林青2 邹雁宁1 吴荣祖1 李秀芳2
(1昆明市医学科学研究所 云南 昆明 650011)
（2云南中医学院药理室 云南 昆明 650200)
【摘要】 目的：为了探讨《伤寒论》中为何以生附子入药而不以制附子入药，观察生附子和附片配伍的四逆汤在药效学上有是否有差异。方法：通过生附子四逆汤的急性毒性试验和生、制附子四逆汤对常压下对小鼠耐缺氧和抗寒冷的影响。结果：小鼠最大给药量达80g/kg，按体重系数折算，成人（60公斤）日用量达4800g,为临床拟量的160倍；此是否是《伤寒论》中以生附子入药配伍四逆汤的原因，其作用机理和物质基础有待进一步研究探讨。
【关键词】伤寒论；四逆汤；作用机理
【中图分类号】R453 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2015）09-0258-02
1.材料
1.1 生、制附子四逆汤流浸,生、制四逆汤颗粒，由昆明市医学科学研究所植被化室提供。
1.2 纳石灰,上海五四化学试剂有限公司.批号:20080212。
2.实验动物
昆明种小折鼠，SPF级，体重18-24g，雌雄兼用，由昆明医学院动物科提供，动物合格证号：滇实动证第2003018号。
3.实验主要仪器和设备
Precisa XS125A电子分析天平，瑞士产；低温冰箱；秒表。
4.方法及结果
4.1 生附子配伍四逆汤颗粒最大给药量测定
参照文献方法[1.2]取昆明种小白鼠40只,雌雄各半,分为正常对照组和给药组，按小鼠每10克体重灌胃0.4ml受试药物（已达最大体积），一日内给药两次(正常组给等体积生理盐水,药物浓度为1g/ml)。给药后立即观察6小时，以后每天观察，连续7天，第8天解剖观察。连续观察7天。动物被毛光滑、活泼、天然孔清亮、大小便正常，每只动物体重平均增长见表1,对照组和给药组之间经t检验,差异无显著性。解剖观察各动物各主要脏器均无肉眼可见病变。小鼠最大给药量达80g/kg，按体重系数折算，成人（60公斤）日用量达4800g。为临床拟量的160倍。其高于临床用药用量100倍，是安全的。
4.2 耐寒冷试验
参照文献方法[3]取体重为20±2g的昆明种小鼠100只，雌雄各半，小鼠依体重随机分为对照组和实验组,(生附子四逆汤高、中、低剂量组，附片四逆汤组)每组20只，正常进食和饮水。按表中剂量给药，连续给药7天，末次给药后1小时，将动物放入-4℃冰箱中1小时，取出室温放置10分钟观测其存活只数。
表1 生、制附子四逆汤对小鼠耐寒冷能力的影响
与正常对照组比较，* P<0.05 **P<0.01与附片组比较 ＃P<0.05 ＃＃P<0.01
结果表明：生、制附子四逆汤均能增强小鼠的耐寒冷能力,生附子四逆汤作用强于制附子四逆汤且差异具有非常显著性意义。
4.3 耐常压缺氧实验
参照文献方法[4]取体重为20±2g的昆明种小鼠60只，雌雄各半，依体重随机分为对照组和实验组，每组12只，正常进食和饮水。实验组即附子中逆汤高、中、低剂量组和附片四逆汤对照组，每天分别灌胃不同剂量（按表2所示），每只小鼠每天灌胃量为0.2ml/10g，对照组则给予等体积的生理盐水。连续灌胃7天，末次给予后1h，将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的25ml广口瓶内(每瓶只放1只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口，盖严，使之不漏气，立即计时，直至呼吸停止。以小鼠在密闭广口瓶内存活时间为指标，比较各组耐缺氧时间。
结果表明：生、制附子四逆汤均能增强小鼠的耐缺氧能力,生附子四逆汤作用强于制附子四逆汤且差异具有显著性意义。
表2 耐常压
与正常对照组比较，* P<0.05 **P<0.01与附片组比较 ＃P<0.05 ＃＃P<0.01
5.讨论
四逆汤是《伤寒论》的急救要方，附子一枚，生用，去皮、破八片干姜一两半甘草炙，二两，具有回阳救逆之功效，用于阳虚欲绝、冷汗、四肢厥逆、下利清谷、脉微欲绝等症。《伤寒论》条文：少阴病，脉沉者，急温之，宜四逆汤（323）；吐利，汗出，发热，恶寒，四肢拘急，手足厥冷者，四逆汤主之（388）；即吐且利，小便复利而大汗出，下利清谷，内寒外热，脉微欲绝者，四逆汤主之（389）。《医方论》：“四逆汤为四肢厥冷而设，仲景立此方以治伤寒之少阴病。
本实验表明：（1）生附子配伍四逆汤颗粒经急性毒性试验，由于受给药浓度和体积的限制无法测出LD50，经过小鼠最大给药量的测定，最大给药量达到80g/kg；按公斤体重折算为临床用量的160倍。（2）生、制附子四逆汤均能增强小鼠的耐寒冷能力,生附子四逆汤作用强于制附子四逆汤且差异具有非常显著性意义。（3）生、制附子四逆汤均能增强小鼠的耐缺氧能力,生附子四逆汤作用强于制附子四逆汤且差异具有显著性意义。此是否是《伤寒论》中以生附子入药配伍四逆汤的原因，其作用机理和物质基础有待进一步研究探讨。
【参考文献】
[1] 徐叔云等.药理学实验方法学,人民卫生出版社1994 ,865 -866.
[2] 中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南1994 ,60-67.
[3] 陈亚东，曹秀兰，田长有.高山红景天对小鼠耐缺氧、抗疲劳及耐低温作用的影响，中国中医药科技2002，9（3）：157.
项目来源：昆明市科技局社会发展基金项目，NO：04S06011
论文作者:李立纪1,张风雷1,林青2,邹雁宁1,吴荣祖1,李
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第9期供稿
论文发表时间:2015/7/22
标签：附子论文; 小鼠论文; 伤寒论论文; 昆明论文; 体重论文; 药量论文; 作用论文; 《医药前沿》2015年第9期供稿论文;