酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测与13C论文_樊燕峰

樊燕峰(山西医科大学 山西太原 030000)

【摘要】目的 研究HP酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测能否代替13C呼气试验及尿素酶试验。方法:选取我院体检中HP抗体阳性的患者100人,随机分为两组,实验组及对照组,试验组给予无创检查13C呼气试验,对照组给予有创胃镜检查,取检后行尿素酶试验。结果:两组患者均为HP抗体阳性的患者,实验组与对照组假阳性率分别为8人、9人,数据均有显著差异(P<0.05);实验组与对照组相比数据无显著差异(P)>0.05)。结论:酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测不能代替13C呼气试验及尿素酶试验作为常规体检项目,但13C呼气试验与尿素酶试验想比。结果:无明显差异性。

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)01-0136-02

1979年,澳大利亚二位学者Barry Marshall 和Robin Warren 首次报导一种未定性的弯曲菌是慢性胃炎的重要原因,之后经过30年的深入研究现已证明HP是慢性萎缩性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃粘膜相关淋巴细胞淋巴瘤的主要原因,同时发现HP感染也与缺铁性贫血、某些骨关节疾病、呼吸系统疾病、心血管系统疾病等胃肠外疾病相关。许多研究者正进一步探索其致病机理,并从不同角度寻找快速、可靠的检测方法。迄今为止,检测Hp的方法包括组织标本培养,切片染色,细菌直接涂片染色,快速尿素酶测定及13C尿素呼吸试验等。除尿素呼吸试验外其余方法均需通过胃镜检查才能完成,鉴于取材困难,有医院将检测Hp感染的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测做为常规体检的项目。本文以ELISA的检测结果与13C呼气试验法和尿素酶测定法对比检测结果,研究ELISA法是否能取代13C呼气试验和尿素酶测定,现将研究结果分析如下:

1 资料与方法

1.1 一般资料 2013年1月~2013年12月,选择我院体检患者中ELISA抗体检测阳性的患者100人,其中男65例,女35例,年龄30-72岁,平均56岁。随机分为实验组50例,对照组50例。入选标准:所有ELISA抗体检测阳性的患者。排除标准:(1)严重心肺疾患,如严重的心律失常,心肌梗塞急性期、重度心力衰竭、哮喘的急性期、呼吸衰竭不能平卧的患者;(2)疑有休克、消化道穿孔等危重患者;(3)严重精神失常不合作的精神病患者。(4)口腔咽喉急性炎症的患者。(5)食管、胃急性腐蚀性炎症的患者。(6)明显的主动脉瘤、脑梗的急性期、脑出血的患者。(7)烈性传染病患者。(8)依从性差,拒绝配合检测的患者。

1.2 方法 两组病例均予体检中ELISA抗体检测阳性的患者为基础,并符合入组标准,无以上排除标准中的任何一项。实验组:应用北京华巨安邦科技有限公司生产的HG-IR1913C红外光谱仪,由经过培训的护士操作,患者早上空腹或禁食两小时以上检查。检查组维持正常呼气,将气体吹进袋内,直至气袋饱满,并立即扭紧气袋盖,收集为0分钟呼气。检查组用80-100ml的凉饮用水送服尿素(13C)颗粒一瓶后,静坐。检查者按上述方法收集呼气方法,收集服用尿素(13C)后30分钟的呼气,扭紧气袋盖。将收集的0分钟、30分钟的气袋,在相应的仪器上进行13CO2检测。阳性判断值大于等于4.0+-0.4时,可判定检查者为HP阳性的患者。对照组:行常规胃镜检查后取检行尿素酶试验观测HP阳性的结果。活检部位常选择胃窦,标本放置于试剂后观察颜色的变化,判断结果,时间在30分钟左右,如试剂颜色由黄褐色变为红色或紫红色则为阳性。若不变则为阴性。具有操作简便、费用低的特点。

1.3 观察指标 观察两组检测后HP阳性及阴性的情况。

1.4 统计学分析 实验数据用SPSS 11.0软件进行统计分析,各组数据比较用X2检验,组间比较采用两独立样本的u检验,以P<0.05表示差异有显著性。

2 结果

2.1 两组患者检测前年龄、临床症状无显著差异。检测后两组病例的各项指标对比见表1。

3 讨论

幽门螺杆菌是一种微需氧,多鞭毛弯曲呈S状或螺旋状的革兰氏染色阴性杆幽。HP通过其鞭毛而有较强的运动能力,可在定居过程中起抛锚作用。HP通过其产生的空泡毒素和细胞毒素而发挥其致病作用。具有很强的尿素酶活性是其另一个显著特点。幽门螺杆菌在世界范围感染率高达50%左右,我国不同地区、不同民族人群胃内HP检出率为30%-80%,HP感染年复发率在发达国家约为3%,在发展中国家高于10%。HP感染的致病机理至今尚未完全阐明。有人认为,HP感染可能是隐性感染过程,即在HP浸润下,胃粘膜充血、水肿造成HP生长的适宜环境,HP借机侵入粘膜下层生长繁殖,并逐渐发展为慢性炎症或溃疡。

幽门螺杆菌检测的方法

(1) 尿素酶试验

目前已知HP的尿素酶活性是体内所有细菌中最强的,通过分解胃内的尿素产生氨和二氧化碳,氨气能在幽门螺杆菌周围形成保护性的氨云,中和胃酸,使局部的PH升高,便于细菌定植致病。据此设计了间接检测HP的方法,该试验是所有检测手段中最为简便迅速的一种方法,其敏感性和特异性分别达91%和100%,数分钟至30分钟即可做出诊断。又分为有创的活组织快速尿素酶试验和无创的尿素呼吸试验。前者在胃镜检查同时进行,检测结果与直接涂片法、分离培养法、组织病理结果一致或近似。活检标本的尿素酶活性主要与感染的数量多少有关,量少时可能造成假阴性反应,而其它产生尿素酶的细菌也可能造成假阳性。后者是利用HP尿素酶水解尿素释放出氨和二氧化碳的特点,给病人(禁食至少4h后)口服一定量13C标记的尿素,若胃内存有HP,则13CO2生成,弥散人血,经肺呼出体外,测定其在CO2总呼出量中所占的比率,以判断胃中是否感染了HP和感染的程度。呼吸试验也是HP治疗疗效观察的一项较敏感的指标,所以近年来以呼吸试验最为流行。呼吸试验的优点是:体内测定胃内感染HP的总体情况,避免了活检标本HP分布不均匀造成的假阴性的结果;除了定性以外,还可以做定量测定。其缺点是13C虽是一种稳定性同位素,对机体是无伤害的,但需要用气体同位素质谱仪测定,加之13C是稀有元素,因此检测费用较高;且本检测易受以下因素的影响:1)检查前应用抗生素,铋剂,质子泵抑制剂,使HP活性受抑制,产尿素酶减少,故主张治疗停止1月以上再进行。2)胃大部切除术后,胃排空加快,使尿素快速通过。3)胃内其它产尿素酶的细菌增生过长,(如萎缩性胃炎等情况胃酸缺乏时)。4)口腔细菌产生尿素酶的作用。

(2)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测法

通过测定血清中的HP抗体来检测HP感染,其方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、补体结合法、免疫印迹法和血凝试验,其中以ELISA法最为常用。但在进行ELSIA试验时,最重要的是抗原选择,较早期的一些抗原是应用全菌或全菌超声粉碎物作抗原,这种抗原制备含有多种菌体及鞭毛蛋白。其中有些物质或不具备抗原性功者为其它菌种的共有结果是试验的敏感性虽高,但缺乏特异性,从而影响试验结果的判断。

4 结论

酶联免疫吸附试验(ELISA)HP抗体检测作为检测HP的方法之一,具有无痛苦、快速、灵敏等特点,但由于其本身所具有的局限性,导致其假阳性率增高,故我们认为为提升HP的检出率,不提倡将HP抗体作为常规体检项目。

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论文作者:樊燕峰

论文发表刊物:《医药前沿》2014年第1期供稿

论文发表时间:2014-4-3

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