西安市第五医院风湿免疫科 西安 710082
类风湿关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病，主要表现为小关节为主的滑膜炎，疾病不断进展出现关节肿胀，骨和软骨破坏，畸形和活动受限。此前研究发现在C3-/-小鼠应用II型胶原诱导的类风湿关节炎模型（CIA模型），其血清抗胶原蛋白抗体水平减低，关节炎症反应较轻，但其分子机制不清。补体C3活化产生的小片段C3a以及大片段iC3b是其主要效应产物，分别与其特异性受体C3aR和CD11b结合而发挥生物学效应。本文探讨类风湿关节炎中补体C3的裂解产物C3a和C3b，与其相应的受体结合，其补体活化信号途径与对关节炎病情影响的机制研究。现报道如下：
一、实验和方法
1. 应用C3aR-/-及CD11b-/-小鼠，建立CIA模型，根据实验小鼠品系不同分为3组：C3aR-/-组6只、CD11b-/-组12只及WT对照17只，通过II型鸡胶原诱导建立CIA模型，初次免疫应用II型胶原+弗氏完全佐剂1：1配比，制成乳剂，每只小鼠注射100ul，由尾部进针，注入到臀部皮下，免疫第21天，再次进行相同免疫。对各组进行关节的临床评分；
2. 收集第44天，收集CIA模型关节标本进行病理评分；
3. 通过流式细胞仪检测各组小鼠脾脏CD4+T、CD8+T、及Th17/Treg淋巴细胞亚群比例水平。
4. 统计学方法 采用SPSS17.0统计分析，所有比较资料均为计量资料，采用两组间t检验，显著性采用P＜0.05。
二、结 果
1.关节炎临床评分：与WT对照组比较，C3aR-/-组CIA临床评分略减低，而CD11b-/-组临床评分明显高于WT及C3aR-/-组。
2.病理评分（满分12分）：CD11b-/-组、C3aR-/-组及WT组CIA评分分别为9.35±0.75、4.81±0.63和5.85±0.55，CD11b-/-组明显高于WT及C3aR-/-组，与临床评分一致。
3.通过流式细胞仪染色检测发现，与WT组比较，CD11b-/-组脾脏CD4+T细胞、CD8+T、Th17细胞百分比明显上调，而Treg细胞亚群降低，此外，脾脏NK细胞分泌IFN-r明显减少。
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三、结 论
类风湿关节炎（RA）是一种慢性累及多关节肿痛、活动受限、畸形的自身免疫性疾病。RA至今病因不明，目前认为是免疫介导的炎性疾病。补体系统激活通路作为机体的天然免疫、其免疫信号调节作用对RA的发病机制、对疾病病情的影响等逐渐成为风湿免疫领域的研究热点。补体所发挥的免疫调节作用逐渐被重视，其靶向免疫调节作用在RA的疾病发病机制中起到了重要作用也逐步被揭示。补体系统的免疫调控发挥机制可能作用于RA关节炎症的全过程，包括免疫复合物沉积及RF产生，出现补体激活途径，释放过敏毒素C5a、C3a片段，通过趋化作用，同时通过调控引起TH1/TH2失衡，造成细胞因子产生和释放，关节炎症明显加重最终形成MAC加重细胞和关节组织损伤。
研究表明，在C5aR-/-，C6-/-以及CR1-/-、CR2-/-、FB-/-的CIA模型中，均发现关节炎症减轻表现[1-2]。以上研究说明补体系统某个单一因素参与和调控了补体激活通路，进而改善关节炎症的反应，提示RA中补体激活对疾病起到重要作用，是发病机制之一。关节炎临床评分：与WT比较，C3aR-/-组CIA临床评分略减低，而CD11b-/-组临床评分明显高于WT及C3aR-/-组。病理评分比较，CD11b-/-组、C3aR-/-组及WT组CIA评分，CD11b-/-组明显高于WT及C3aR-/-组。以上结果说明，补体CD11b对于RA的具有保护性作用。
通过流式细胞仪染色检测发现，与WT组比较，CD11b-/-组脾脏CD4+、CD8+T细胞百分比明显上调，而Treg细胞亚群降低，此外，脾脏NK细胞分泌IFN-r明显减少。故C3aR-/-的CIA关节炎表现与WT组变化不大，而CD11b-/-小鼠在CIA模型关节炎程度明显加重，故提示CD11b所介导的受体信号在RA中具有保护作用。因此，可以得出CD11b受体保护的作用机制，可能在于减少T淋巴细胞的增殖和分化，同时，减少炎性细胞因子分IFN-γ等的作用。当CD11b受体敲除，淋巴细胞亲润明显加重，其机制可能为造成T细胞亚群失衡相关。
补体C3裂解产物C3a和iC3b，与其补体受体结合在RA的免疫机制中表现的炎症反应和预后结果不同，iC3b-CD11b信号在RA中具有保护作用，而C3a-C3aR信号具有炎症加重作用，通过此项研究，有助于开发补体调控剂，靶向调控RA疾病发病发生，利于临床治疗。
参考文献：
[1]Banda NK，Hyatt S，Antonioli AH，et al.Role of C3a Receptors，C5a Receptors，and Complement Protein C6 Deficiency in Collagen Antibody-Induced Arthritis in Mice. J Immunol 2012；188；1469-1478
[2]Banda NK，Mehta G，Ferreira VP.Essential role of surface-bound complement factor h in controlling immune complex-induced arthritis. J Immunol. 2013 Apr 1；190（7）：3560-9.
注：项目基金：陕西省自然科学基金（2015JM8384，2016JM8147），陕西省社会发展公关项目（2017SF-245）
论文作者:刘丹
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第4期
论文发表时间:2018/4/23
标签：补体论文; 关节炎论文; 关节论文; 评分论文; 细胞论文; 小鼠论文; 受体论文; 《中国误诊学杂志》2018年第4期论文;