丙型肝炎病毒检测方法的评价论文_张波

张波 山西省榆社县计生妇幼保健院 031800

摘要:丙型肝炎病毒(HCV)是一项影响比较广泛的病毒,在全世界范围内都有着严重影响,在目前的感染人数中,全世界的感染人数达到了1.7~2亿人。在我国,丙型肝炎病毒的感染率达到了总人口的3.2%,约4200万,是能够引起慢性肝病的一个非常重要的因素。在此,本文通过对丙型肝炎病毒检验方法的探讨,总结其发展展望,这对研究丙型肝炎病毒的发展以及相关的治疗效果有着非常重要的作用。

关键字:丙型肝炎;微生物;临床验证

丙型肝炎病毒属于一种嗜肝性慢性病毒,是能够引起输血后非甲非乙型肝炎的一个非常重要的病原体,同时也是在输血之后引发医疗纠纷的一个非常重要原因。在过去的十年中,对丙型肝炎病毒的筛查主要是建立在对血清抗体的筛选基础之上,但是,由于在HCV感染的II期会存在一些耐受人没有发生血清转化的情况,这样就出现了丙型肝炎病毒抗体不能很好的检测出患者体内病毒的感染情况,用于对病毒进行检测感染技术也存在一定的局限问题。所以,分析丙型肝炎病毒检测技术对提高丙型肝炎病毒中血液筛查准确率有着重要的意义。

1资料与方法

1.1主要资料

根据研究需要,特选定某医院2014年7-12月期间输血前五项检测标本225例,这其中男性占到118例,女性占到107例。

1.2主要试剂

主要选用上海科华生物工程股份有限公司生产的HCV-PCR检测试剂盒、英科新创科技有限公司生产的抗HCV ELISA检测试剂盒以及湖南景达制药有限公司生产的HCV-cAgELISA试剂盒。

1.3主要仪器

美国PE-9600基因扩增仪、奥地利SLT酶标仪。

1.4一般方法

用PCR法及ELISA法对选取的225个样本进行检测,主要从HCV-cAg、HCV-Ab和HCV-RNA三个方面进行检测,各项操作严格按照说明书执行,对于ELISA检测出的阳性结果进行第二次的确认。

2结果

2.1阳性检出率

在所选择的225个样本之中,检测出HCV阳性患者为28例,检出率达到了12.4%,检测中HCV阴性患者为197例,HCV-cAg阳性3例,占比达到了1.5%其中HCV-RNA阳性2例,占比达到了1%,HCV-cAg检出的特异性达到98.5%(194/197)。

2.2符合率

在所检测的28例阳性的样本之中,有14例HCV-cAg呈现阳性,有16例HCV-RNA呈现阳性。对两者进行检测,检测出来的结果的负符合率达到了87.5%,经过χ2检验,对两者进行检测出来的阳性检出率达到了χ2=0.287,P>0.05差异无统计学意义。见表1。

表1 抗HCV阳性标本用HCV-cAg与HCV-RNA检测结果比较 (例)

2 丙型肝炎病毒临床检测方法

2.1 抗-HCV的检测方法

在病毒的检测方法中,抗-HCV的检测属于最早的一种检测方法,一般比较常用的抗-HCV诊断主要是选用接酶联免疫法(<ELISt)。主要的检测原理是以HCV抗原包被酶标板,用辣根过氧化物酶标记的抗人IgG与被检测血清中的抗-HCV反应,邻苯二胺(<OPD)或3,3'5,5'-四甲基联苯胺(TMB)显色后,主要根据颜色的情况进行阴性、阳性的判断。

2.2 HCV-RNA的检测方法

对于外周血的情况而言,检出出的HCV RNA是HCV的特别复制活跃的一项可靠的重要指标,在被感染的两个星期之内,在血清中检测到了HCV RNA,再被感染恢复之前,血清中的HCV RNA已经达到了很高的程度。所以,对HCV RNA进行检测就显得非常重要。在目前的研究中,对HCV RNA进行检测的技术主要有PCR技术、基因芯片技术以及核酸分子杂交技术等,PCR技术发展比较迅速,得到了广泛的应用。在目前的研究中,定量PCR已基本上取代了定性PCR。

2.3 HCV核心抗原的检测方法

在丙肝病毒核心抗原蛋白中含有191个氨基酸,相关顺序表现的十分保守,对比已经有的一些HCV序列,相关的同源性达到了95%,在病毒的增殖以及相关的发病机制中有着非常重要的作用,属于HCV感染的一项非常重要的指标。在血清中,对HCV抗原进行检测对于发现病毒有着非常重要的作用,特别是针对那些免疫功能较低的患者。所以,HCV核心抗原检测可以一定程度上弥补抗体检测的不足,同时对HCV的传播进行有效的控制。

3 丙型肝炎检测的发展和展望

对于HCV基因而言,存在一定的异源性和可变性,在对HCV感染的相关研究中,病毒在不同的蛋白各区段抗体中能够产生相关的规律性,研究有着非常重要的意义。与此同时,我们也能够发现,伴随着目前对HCV研究的不断深入,最近几年已经成功的获得了对HCV的重组,也制备出来一定的单克隆或多克隆抗体,使得对HCV抗原的检测发展越来越成熟,国外新开发的HCV-bDNA探针方法,能够提高对病毒的检测情况,对样品中的病毒能够进行定量的测定,这对检验病毒的敏感性有着良好的作用和价值。

对于没有肝硬化的患者而言,经过四个周期的导入期治疗之后,结合BOC联合聚乙二醇化干扰素a和利巴韦林三联治疗,如若是在第八周以及二十四周检测不到HCV RNA,就可以进行短疗程的治疗。这些患者还可以进行TVR联合聚乙二醇化干扰素a和利巴韦林三联治疗,如若是在第四周以及十二周检测不到HCV RNA,就可以进行二十四周期的治疗。但是,对于肝硬化的患者而言,给予BOC或者TVR联合聚乙二醇化干扰素a和利巴韦林的三联治疗,治疗的疗程应该达到4R周。对于那些治疗失败的患者,可以对复发患者进行使用,不可以对没有效果的患者进行使用。

结论

综上所述,对丙型肝炎病毒的检测方法而言目前已经有很多种,在抗体的检测中,方法比较简单容易操作,可以在短时间之内处理一些重要的样品,重要问题是还可以解决一些重要的异性问题;对病原体的检测要明确,尽量的降低成本。在目前的研究中,只需要做到对不同检测方法的了解,同时结合一些临床的指标就能很好的避免出现临床中的误诊情况,做好对丙型肝炎病毒的正确检测。

参考文献

[1]刘芳华,田庚善等.丙型肝炎诊断方法的研究概况[J].国外医学流毛病传染病学分册2013,6:260

[2]尚锦青,张俊玲,董效兰.丙型肝炎病毒抗体测定方法学性能验证评价[J].中国实用医药, 2011(32).

[3]梁争论,庄辉等.丙型肝炎病毒母婴传播的研究[J].国外医学流行病学传染病学分册2014,6:254.

论文作者:张波

论文发表刊物:《卫生部公告》2015年10期

论文发表时间:2016/5/10

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