关键词：时间分辨荧光免疫法； 乙肝病毒血清标志物； 酶联免疫法
Two different methods were compared to detect the serum index of hepatitis b virus infection
Abstract: objective to compare the sensitivity and accuracy of serological markers in hepatitis b virus infection between time-resolved fluorescence immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay.Methods in our hospital outpatient and the inpatient November 1 ~ 2019, 80 cases of hepatitis b patients as the research object, using time-resolved fluorescence immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay serological markers of hepatitis b virus infection, determine the time-resolved fluorescence immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay to detect efficiency.Results the positive detection rate of hepatitis b virus infection serological markers by time-resolved fluorescence immunoassay was higher than that by elisa, and the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion time-resolved fluorescence immunoassay is more effective than elisa in detecting serological markers of hepatitis b virus infection.
Key words: time-resolved fluorescence immunoassay;Serum markers of hepatitis b virus;Enzyme-linked immunoassay
乙型肝炎(以下简称乙肝)病毒又称为丹氏颗粒，其为嗜肝DNA病毒科的一种微生物，可以引发多种急、慢性肝炎病，我国有1亿左右的乙肝病毒携带者，其中有3 000万的乙肝患者，寻找一种经济、快速、简便的乙肝病毒筛查方法十分必要，其在乙肝病毒筛查过程中具有重要的意义[1]。时间分辨荧光分析法、微粒子酶免疫试验以及酶联免疫吸附试验都是检测乙肝病毒感染血清学标志物的重要方法，笔者研究了时间分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附试验对于乙肝病毒感染血清学标志物的实际检测效果，现将研究结果报道如下。
1资料和方法
1.1一般资料
选取本院门诊及住院部2019年1～11月收治的80例乙肝患者，所有患者诊断标准均严格按照我国相关检测要求，排除了其他肝炎类型患者。80例乙肝患者包括男46例，女34例，年龄19～48岁，平均（37.62±5.60）岁。入院后的患者次日清晨空腹静脉取血5 mL，及时分离血清后备用。
1.2检测方法
使用全自动荧光免疫分析仪和试剂，对比检测使用酶联免疫试剂，洗板机以及酶标仪。时间分辨荧光分析法：将试剂复温，添加样本后再加入标记物工作液，恒温振荡反应后洗涤反应板，再使用增强液后检测结果。酶联免疫吸附试验：准备好洗涤液和去离子水，试剂温度恢复至室温，使用加样器加取样品，加入酶标液后震荡混匀恒温孵育，最后加A、B显色液，待加完终止液后上机检测。
1.3评价标准
时间分辨荧光免疫法：使用计算机对血液样本进行标准曲线绘制，依据标准曲线对被测定物含量进行阴阳性鉴别。酶联免疫吸附试验：样本核心抗体以及乙肝病毒e抗体检测光密度低于临界值为阳性；样本表面抗体、乙肝病毒表面抗原以及e抗原的检测密度高于或者等于临界值为阳性。
1.4统计学处理
采用SPSS19.0对数据进行分析，计量资料以±s表示，比较采用t检验；计数资料采用X2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2结 果
时间分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附试验对于乙肝病毒感染血清学标志物阳性率进行比较，发现时间分辨荧光免疫法在乙肝病毒感染血清学标志物阳性检出率上均高于酶联免疫吸附试验，且差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
表1乙肝病毒感染血清学标志物阳性检出率比较[n，%]
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3讨论
作为全球范围内最为广泛的肝脏病症，乙肝患者会出现明显的肝脏炎性病变。如果没有得到及时、有效的治疗，乙肝患者很大概率上转变为肝硬化，严重时甚至转变为肝癌，因此会对患者造成严重的后果[2]。特异性血清病原学检查是现如今诊断乙肝的主流方法，该方法通过对患者血清样品中乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗体、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗体、乙肝病毒核心抗体含量进行检测来确定患者的患病情况Ⅲ。我国具有庞大的乙肝病毒携带人群以及乙肝患者，乙肝病毒携带者筛查以及诊断是非常繁重的工作，寻找经济合适的诊断、筛查方法对于提高乙肝诊断敏感度以及有效率非常重要，因而需要经过多重试验，反复证明来确定合适的乙肝病毒血清标志物检测方法[3]。乙肝血清表面标志物是用于检测受检人员是否携带有乙肝病毒最为可靠的方式，本研究比较了时间分辨荧光分析法和酶联免疫吸附试验对于乙肝血清标志物的检测效果。其中的酶联免疫吸附试验是一种传统的检测乙肝病毒血清标志物的方法，早在20世纪60年代已经用于临床检测乙肝病毒血清标志物，该种方法通过将制作的抗体与某些固定载体相结合从而有效保证其结合活性，再将其与酶连接成酶标的抗体，将含有底物的样品与其混合后通过酶的催化反应使底物发生颜色变化而得到检验结果。时间分辨荧光分析法作为一种非同位素免疫分析技术，其结合了同位素标记以及酶标记，该种方法具有比较高的灵敏度，其对于乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗体、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒e抗体、乙肝病毒核心抗体的检测效率是酶联免疫吸附法的数倍，该种方法可靠、有效，具有较高的灵敏度，且具有比较宽的线性范围，试剂的使用周期也比较长，可以制作出比较稳定的标准曲线，也可以对检测底物进行定量的分析，可以逐步取代酶联免疫吸附试验成为检测乙肝病毒的首选方法。本研究结果显示，时间分辨荧光免疫法和酶联免疫吸附试验对于乙肝病毒感染血清学标志物阳性率进行比较，发现时间分辨荧光免疫法在乙肝病毒感染血清学标志物阳性检出率上均高于酶联免疫吸附试验，且差异具有统计学意义（P<0.05）。总之，时间分辨荧光免疫法对于乙型肝炎病毒感染血清学标志物的检测效率高于酶联免疫吸附试验，时间分辨荧光免疫法具有更高的推广价值。
[参考文献]
[1]韦志鹃.两种不同方法对乙型肝炎病毒感染血清指标检测结果的比较[J].国际检验医学杂志,2016,37(10):1429-1431.
[2]谢晓婷,梁健夫.不同免疫检测法在乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测中的应用[J].中国民间疗法,2019,27(23):75-76.
[3]周运涛.化学发光法与酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒 感染血清学标志物的价值及对比[J].大家健康（中旬版）,2018,12(4):46-47.
论文作者:程光磊
论文发表刊物:《医师在线》2020年6期
论文发表时间:2020/4/21
标签：免疫论文; 血清学论文; 荧光论文; 乙肝病毒论文; 标志物论文; 时间论文; 乙肝论文; 《医师在线》2020年6期论文;