娜仁花[1]2006年在《绵羊精子膜蛋白基因的表达研究》文中指出受精是精子与卵子相互结合而启动新生命发育的过程。随着科学技术的进步和研究方法的发展，人们对受精过程的认识日渐深入。精子膜是精子与外界发生联系的第一门户，它不仅是精子活动和新陈代谢的基础，也是获能和精卵融合等受精过程的基础，而且抗精子抗体对精子的主要影响也发生在质膜上。因此，精子膜蛋白一直是众多学者的研究热点。目前，已经分离得到与精子的受精功能直接相关的数种蛋白成分。由于研究的便利，许多膜蛋白首先从动物的精子膜上分离得到，并在人精子膜上也发现了同源蛋白，其相关抗体均能抑制人精子的受精能力，因此这些蛋白有望成为人精子避孕疫苗的候选成分。 本研究基于其它哺乳动物(人、牛、猪、小鼠、豚鼠、猴等)精子膜蛋白的研究基础上，首先采用RT-PCR技术克隆了绵羊的四种精子膜蛋白基因，然后用RT-PCR方法和原位杂交技术在mRNA水平上检测了四种基因在绵羊睾丸组织和附睾不同部位的表达。最后用cDNA末端快速扩增技术得到了绵羊受精素β蛋白的编码序列。通过上述研究方法获得如下研究结果： 1．采用RT-PCR方法从绵羊睾丸组织中扩增出四种精子膜蛋白PH-20、PH-30、FA-1、LDH-C4的cDNA。经鉴定和序列分析的结果表明，四种基因序列与已知动物的相应序列有较高的同源性。 2．通过RT-PCR技术检测了四种精子膜蛋白基因的mRNA在绵羊睾丸组织和附睾不同部位的表达。其中PH-20和FA-1基因的mRNA在绵羊睾丸组织
于同德[2]1995年在《编码人精子膜蛋白YWK-Ⅱ基因的研究》文中认为与生殖相关蛋白的研究已进展到基因水平。生精过程中的基因表达存在复杂的多级调控机制。我们曾经采用一株具有抑制生育作用的抗精子膜蛋白单克隆抗体YWK-Ⅱ对大鼠睾丸λgt11 cDNA表达型文库进行表位筛选，得到一1.8kb大小的cDNA，命名为RSD-2。同源性分析发现，RSD2的编码多肽与引起老年性痴呆症的A4蛋白前体(APP)跨膜区高度同源，表明这是一个含有单跨膜区的膜镶嵌蛋白。随后，以RSD-2为探针进一步从人睾丸λgt11 cDNA文库中筛到了HSD2-7，921，721，1062等多个阳性克隆。对它们的核苷酸序列的初步分析发现，它们之间存在同源和变异，而且5′端都不完整。本论文是在此工作的基础上进行了进一步的研究。首先，对721(1.9kb)，1062(1.9kb)两个cDNA片段进行了全部核苷酸序列手工测定，同源比较发现，721cDNA在编码区内存在189bp(63个氨基酸残基)的缺失。而1062cDNA则没有这段缺失，但在3′非翻译区内有230bp与我们前面报道的921不同源。进一步的分析发现在睾丸组织中至少有4种形式的mRNA对应于YWK-Ⅱ抗原，其同源区的同源率高达100％，提示这可能是同一基因转录的、不同方式剪切的产物。其次，为获得完整的5′端，我们以HSD2-7的5′端500bp为探针，从人睾丸λgt10 5′stretch cDNA文库中做了进一步的筛选，获得一个4kb大小的cDNA，命名为C211。序列分析比较发现，除了在胞外区接近膜处有一36bp(12氨基酸残基)缺失外，5′端1.8kb有极大变异。计算机分析显示，该1.8kb是一非编码区。连接219个氨基酸残基构成的胞外区及23个氨基酸残基的跨膜区和47个氨基酸的胞内区。由于这一段1.8kb变异比较特殊，我们用PCR和RT-PCR的方法，分别证明了该变异区确实存在于λgt10 cDNA文库和人睾丸组织mRNA中，而非片段污染所致。我们选用C211 cDNA的3′端同源区1.8kb为探针，对人睾丸组织RNA进行了Northern blot分析，结果检测到一4kb大小的杂交带。为进一步探讨该mRNA在睾丸组
徐境羚[3]2007年在《马鹿精子膜蛋白纯化与理化性质分析》文中认为成熟精子的膜表面含有多种蛋白质，有些是精子本身固有的，有些是在精子成熟过程中粘附到精子表面的。精子表面的膜蛋白是精子发生成熟过程中的重要标志分子，与受精和胚胎的早期发育关系密切，随着生命科学的发展，人们发现精子膜蛋白不仅具有抗原性，而且它们在维持精子形态结构完整、完成精子的新陈代谢和生殖功能中发挥着重要的作用，特别是与精卵识别、精卵结合以及质膜融合等受精活动密切相关。其中部分抗原可诱导机体产生相应的自身抗体，进而影响精子的受精能力，导致免疫性不育。本文以我国重要的经济动物—马鹿的精子作为实验材料，进行了精子膜蛋白的提取、分离纯化，同时对其理化性质加以分析，并以纯化的马鹿精子膜蛋白作为抗原，制备了多克隆抗血清。利用抗血清进行了精子膜蛋白的定位、对精子运动的影响等的研究，现将研究结果简述如下：1、马鹿精子膜蛋白的分离纯化及鉴定采用非离子型去污剂裂解法提取马鹿精子膜蛋白，根据Western-blot和SDS-PAGE电泳实验结果，确定分离纯化的条件。SDS-PAGE电泳结果显示，共有8种马鹿精子膜蛋白被提取出来，其中，有4条膜蛋白带非常清晰。采用胶上纯化法，即利用SDS-PAGE电泳，0.3MKCl进行凝胶染色和反复冻融及高速离心等技术从马鹿精子膜蛋白溶液中分离纯化了该4种膜蛋白，其分子量分别为：98.4kDa，67.6kDa，47.3kDa，29.1kDa。在SDS-PAGE电泳图谱中，纯化的马鹿精子膜蛋白在还原和非还原条件下均为单一条带，无链间二硫键。说明采用上述方法纯化的马鹿精子膜蛋白为单一组分。糖蛋白的检测中发现，在图谱中有3条很清晰的糖蛋白带，与纯化出来的前3种马鹿精子膜蛋白带吻合，确定为糖蛋白。采用BCA试剂盒对提取的马鹿精子膜总蛋白及纯化的单一马鹿精子膜蛋白进行分析，测得其含量分别为468.12μg／ml，95.67μg／ml，184.23μg／ml，47.68μg/ml，58.32μg／ml。2、马鹿精子膜蛋白的双向电泳实验由双向电泳图谱发现，发现马鹿精子膜蛋白有823个蛋白质点；其分子量分布在10kDa—100kDa之间，等电点PI在4-7(pH)之间。3、马鹿精子膜蛋白多克隆抗血清的制备用纯化的马鹿精子膜蛋白免疫雄性BALB／C小鼠，制备多克隆抗体。通过ELISA法测得抗血清的效价为1-2×10~3。Western-blot结果表明，纯化的马鹿精子膜蛋白具有免疫反应性，为特异性抗原。4、抗血清对精子运动的影响在体外实验中，发现抗马鹿精子膜蛋白抗血清对马鹿精子的直线运动无显著影响；同时还发现抗血清对小鼠精子的直线运动也无明显影响；但对获能的马鹿精子的直线运动却表现为较为显著的影响，并表现为剂量依赖性。5、马鹿精子膜蛋白在精子上的定位及保守性通过对马鹿精子和小鼠精子进行免疫细胞化学程序染色并结合激光共聚焦显微镜检测，结果表明，纯化的精子膜蛋白大部分都存在于马鹿精子的顶体区域；而对小鼠精子的定位研究中，也发现膜蛋白存在于顶体区。6、马鹿精子膜蛋白多抗血清的特异性通过对马鹿精子膜蛋白的琼脂双向免疫扩散实验，发现马鹿精子膜蛋具有组织特异性。与小鼠的附睾、精巢、输精管有免疫交叉反应，但与重要脏器心、肝、脾、肾无免疫交叉反应。说明马鹿精子膜蛋白具有组织特异性。
王琦[4]2006年在《中华绒螯蟹精子膜蛋白提取、抗体制备及其免疫定位研究》文中研究表明中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是我国特有的水产珍品，也是我国一种重要的经济蟹类，广泛存在于我国南北各地淡水水域中。中华绒螯蟹是我国名优淡水养殖业的主要品种。近年来，其养殖业在沿海各地蓬勃兴起，它以优良的生物学品质，极高的营养价值和独特的风味蜚声海内外。养殖业的发展，进一步促进了基础科学研究的发展，而基础科学的发展，又反过来加速了养殖业的蓬勃发展。 本文就中华绒螯蟹精子膜蛋白提取、抗体制备及其免疫定位进行了研究，为其受精生物学、发育生物学方面的深入研究提供参考资料。主要从以下几个方面进行了研究： 1．对中华绒螯蟹雄性生殖系统进行解剖，得到贮精囊，进而分离到精荚，利用玻璃匀浆器匀浆的方法，对中华绒螯蟹精荚进行破碎，得到精荚基质和精子；使用两种去污剂对中华绒螯蟹精子膜蛋白进行了提取，在变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件下，对其精子膜蛋白组分进行了分析，实验结果表明，在双去污剂作用下，提取得到的精子膜蛋白与脱膜精子部分蛋白谱带差异明显；并对提取的精子膜蛋白进行了分子量、等电点和糖蛋白检测，结果显示，所提取的12种精子膜蛋白，其分子量均在100ku以下，等电点范围在4.4-6.2之间，并均为糖蛋白，说明所提取的中华绒螯蟹精子膜蛋白是低分子量的酸性糖蛋白，这与其他一些哺乳动物精子膜蛋白的研究结果类似； 2．乳酸脱氢酶(LDH)尤其是精子特异性乳酸脱氢酶，定位于膜上，也为精子膜蛋白的一种。利用天然聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和特异性染色的方法，对中华绒螯蟹进行了乳酸脱氢酶同工酶电泳分析，实验结果表明，以两种不同底物(乳酸钠和α-羟基丁酸钠)分别作用于血清、鳃、心脏、肌肉、肝胰腺、成熟蟹精巢、未成熟蟹精巢和精子，实验结果显示，乳酸脱氢酶同工酶具有组织特异性，并且首次在中华绒螯蟹体内发现了精子特异性乳酸脱氢酶，这种酶在中华绒螯蟹精子成熟过程中均存在，并随着精子的成熟，其含量和酶活性逐渐增强，可能在精子成熟过程中起作用； 3．利用抽提的精子膜蛋白免疫雌性新西兰白兔，制备多克隆抗血清；利用琼脂糖双向免疫扩散分别对多克隆抗血清活性、效价进行了分析，实验结果表明，制备的多克隆抗血清发生抗原抗体沉淀反应，具有免疫活性，且其效价为1：16；在精子膜蛋白雌雄组织特异性检测中，其实验结果表明，制备的多克隆抗血清与精巢、输精管和贮精囊粗提
刘孟元[5]1993年在《两种与生育有关的人精子膜蛋白基因的研究》文中提出精子细胞膜(简称“精子膜”)蛋白在受精过程中占有十分重要的地位，尤其是对精子运动、精卵识别、融合及早期胚胎发育等起着重要的作用。因此精子膜蛋白的研究一直受到人们的极大关注。我们在国际上较早地开展了这一方面的工作。目前已分离纯化了数种家兔和人的精子膜蛋白，并制备了其单克隆抗体，利用抗体表位筛选法从大鼠和人睾丸表达型λgtll cDNA库中筛选获得了数种相应的精子膜蛋白的cDNA片段，并进行了核苷酸的序列分析。 本研究是在本实验室以前工作的基础上，对两种人精子膜蛋白基因做进一步的研究，是精子膜蛋白研究课题中部分工作的继续。论文分为两部分： 1．人精子膜YWK-Ⅱ抗原的cDNA克隆、序列分析及其同源性比较 本实验室过去曾用抗人精子单克隆抗体YWK-Ⅱ，从大鼠睾丸λgtll表达型cDNA库中筛选获得一个eDNA片段—RSD-2。为了进一步研究人精子中编码该蛋白基因的特征，本研究又以RSD-2为探针对人睾丸λgtll cDNA库进行筛选。所获得的7个阳性克隆其插入子的大小分别为：R171：1.2kb，R321：0.7kb，R514：0.5kb，R642：1.0kb，R721：1.8kb，R915：1.4kb和R921：1.6kb。 选择其中一个克隆(R921)进行研究，首先绘制其插入子的限制性内切酶酶切物理图谱，制备测序亚克隆进行DNA序列测定分析。核苷酸序列测定根据Sanger双脱氧终止法原理，同时使用了同位素掺入的人工测序和荧光素标记的全自动测序两种方法，对各个测序片段重复测定以保证测序结
刘强远[6]1990年在《两种精子膜蛋白的基因表达研究》文中指出应用免疫途径控制生育已成为近年来迅速发展的一个领域，将精子膜的关键抗原纯化后作为避孕疫苗的设想是十分诱人的。但是鉴于精子来源困难，分离纯化精子膜蛋白受到了极大的限制。因此应用基因工程的手段，制备精子膜蛋白抗原，进而制备抗生育疫苗已成为必然的趋势。精子膜蛋白的基因工程工作起步较晚，截至1989年底，国外除了美国和加拿大的Herr及Lee开始进行了精子膜的基因研究外，其他尚未见报道。我室在以前工作的基础上用表位筛选法，首次自表达型噬菌体载体λgt11构建的大鼠睾丸cDNA库中筛选出了编码兔精子膜蛋白rSMP-B的cDNA片段(RSD-1)和编码人精子膜蛋白YWK Ⅱ抗原的cDNA片段(RSD-2)。本文采用所分离到的这两个精子膜蛋白cDNA基因片段，借助重组DNA质粒转染中国地鼠卵巢细胞(CHO cell)，研究了精子膜蛋白基因在哺乳动物细胞中的表达，并应用原位杂交方法，探讨了这些膜蛋白基因在精子发生过程的表达。 对pSV_2dhfr质粒进行改造，切除dhfr基因，加入一个人工合成的寡聚核苷酸片段，构建成哺乳动物细胞表达载体(pSV_2-EP)。该载体具有以下结构特点：(1)，含SV40早期启动子及DNA复制起点；(2)，含有SV40多聚A位点及剪切位点；(3)，启动子下游含起始密码子ATG，当外源目的基因来自于表达型载体λgt11 cDNA库，插入载体的EcoRⅠ位点后，由ATG起始可形成开放阅读框架。该载体可作为λgt11库中cDNA片段的通用表达载体。 我们将RSD-1及RSD-2分别插入表达载体pSV_2-EP中，然后应用磷酸钙沉淀法分别与带标记基因的pSV_2dhfr质粒或pSV_2neo质粒共转化CHOdhfr或CHO细胞。经无胸腺嘧啶及次黄嘌呤的培基或含G418(1mg／ml)的培基筛选，得到多个阳性细胞株。对这些细胞株分别以DNA斑点杂交，RNA斑点杂交及间接免疫荧光抗体法检测，发现以RSD-1共转化的细胞株中，有一株在连续传代3个月后，细胞基因组中仍然有RSD-1基因存在，并有mRNA的高效转录及蛋白质的表达。表明RSD-1基因已稳定地整合到细胞基因组中并获得了有效的表达。对RSD-2共转化所得到的细胞株进行检测，同样也得到了阳性结果，在21个细胞株中，有6株为阳性，阳性率约为30％。
杨树洪[7]2004年在《抗牛精子膜蛋白单链抗体基因的克隆与表达》文中提出由于精子膜蛋白结构上的多形性、功能上的复杂性，加之缺乏有效的分离纯化手段，有关精子膜蛋白的研究一直是一个难点。sp18是由本实验室首次发现的一组牛精子膜蛋白，由于尚未纯化得到sp18，有关sp18的研究难以突破。为此，本研究从分泌抗sp18单抗的杂交瘤细胞入手，欲克隆其抗体基因并分析其序列特征，以此推测其针对的抗原性质。 应用重组噬菌体抗体库技术，从分泌小鼠抗牛精子sp18抗体的杂交瘤细胞系中分离总RNA，克隆抗体重链和轻链可变区基因，加入连接肽引物(Linker primer)组装成单链抗体ScFv(single chain fragment variable)基因并用RS引物进行扩增，Sfi Ⅰ、Not Ⅰ酶切，回收后与pCANTAB5E载体相连，转化E.coli TG1宿主菌，构建单链抗体文库。经辅助噬菌体M13K07超感染，将ScFv展示于噬菌体表面。以牛精子作为包被抗原，经过三轮“亲和吸附-洗脱-扩增”的淘选后，进行phage-ELISA筛选和鉴定，在波长450nm处测定吸光值，吸光值在阴性对照两倍以上的视为阳性克隆。取阳性重组噬菌体抗体克隆株pCSA1，PCR扩增其ScFv基因，筛选重组子进行序列测定，发现其序列符合小鼠抗体基因的一般特征，并且与几株抗磷酸胆碱的抗体重链和轻链可变区序列的同源性达80％以上；推测pCSA1 ScFv针对的抗原是磷酸胆碱类物质。将pCSA1 ScFv基因克隆到pET-30a(+)载体上，用IPTG进行诱导表达，SDS-PAGE蛋白电泳分析，发现重组蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30％。这些结果表明，本研究成功获得了杂交瘤细胞的单链抗体基因，并且在大肠杆菌细胞中得到了高表达；推测抗sp18单抗针对的抗原可能是磷酸胆碱类物质。 精子蛋白种类繁多，为了进一步研究牛精子蛋白功能，本研究欲构建一个针对牛精子的噬菌体抗体文库。首先用牛精子免疫雌性四周龄BALB／c小鼠，从其脾脏组织分离总RNA，应用重组噬菌体抗体库技术，构建了一个针对牛精子的噬菌体抗体文库。经PCR检测，计算文库的有效库容为1.2×10~4TFU。用phage-ELISA从文库中筛选并鉴定出一个针对牛精子的阳性克隆，序列分析发现，该单链抗体克隆的序列符合小鼠抗体可变区的一般特征，这说明构建的针对牛精子的噬菌体抗体文库是成功的。 本研究成功获得了杂交瘤细胞的单链抗体基因，并且推测抗sp18单抗针对的抗原可能是磷酸胆碱类物质；成功构建了针对牛精子的噬菌体抗体文库，为日后牛精子蛋白的功能研究与应用研究奠定了一定的基础。
汪洋[8]2013年在《中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子膜蛋白抽提及组成分析》文中研究说明精子膜蛋白是与精子发生、成熟、获能,精卵粘附与识别,顶体反应以及精卵融合等过程相关的重要蛋白。本研究采用两种不同的抽提方法(TritonX-114液相分离法和TM-PEK法)来抽提中华绒螯蟹精子膜蛋白,对两种方法得到的膜蛋白先进行SDS-PAGE银染分析,而后以膜蛋白标志蛋白抗体(Flotillin-1单克隆抗体与Na+/K+ATPase单克隆抗体),细胞质标志蛋白抗体(GAPDH单克隆抗体)作为检测依据进行western blot分析,通过比较两种方法的抽提效率,初步确定了中华绒螯蟹精子膜蛋白的抽提方法和条件。再进一步进行Nano-LC MS/MS来得到中华绒螯蟹精子膜蛋白质组的详细构成,并做一系列的生物信息学分析。在本研究中,我们识别出了181个有高信度的GO注释膜蛋白,包括大部分已知道的哺乳动物生殖标记分子(比如LDH-C4, serine protease inhibitor, Angiotensin-converting enzyme, VDAC, Plasminogen activator),并且我们也发现热休克蛋白家族成员高度地出现在精子膜蛋白组。除了那些已知的精子膜蛋白,大量的新颖蛋白也被识别出。本研究不只是提供技术来研究中华绒螯蟹精子膜蛋白的构成,也是在为以后做中华绒螯蟹精子膜蛋白变化研究打下基础,进一步说明中华绒螯蟹的受精机制。
陈大虎[9]1997年在《人精子膜蛋白cDNA（HSD-1）的表达和功能研究》文中研究说明免疫避孕是指应用免疫学的原理和方法对人类生育力进行调控，它是近十多年来世界各地科学工作者正在积级进行研究的一类新的避孕方法。 大量的研究报道表明，生殖系统的许多成分，如精子、卵子、生殖激素等均具有抗原性。针对机体精子抗原、卵表面抗原以及生殖激素抗原发生的免疫反应会干扰生育的生理调节过程，这是免疫避孕的理论基础。 应用免疫学的方法调控人类生育力可以有几种不同的途径。其中最有实用意义的途径是应用生殖系统的抗原进行主动免疫。即应用疫苗进行免疫。这一途径的优点在于一次或数次免疫后能诱发较长时间的免疫力，它的抗生育效应是通过诱发的抗体或活化的淋巴细胞或两者的共同作用而实现的。 应用疫苗进行避孕的一个最关键的问题是能发现一个精子特异的，且具有强免疫原性的抗原。本课题组从70年代末期开始涉猎这一研究领域。到目前已经纯化了数种具有强免疫原性的精子蛋白；克隆了一些与生育过程相关的蛋白的cDNA。其中一个cDNA HSD-1，是应用含有抗精子抗体的不育病人的血清从人睾丸cDNA文库中筛选得到的。提示这个基因编码的蛋白质可能在生殖过程中起作用。本文在此基础上对HSD-1cDNA及其可能含有抗原决定簇的片
庄建平[10]2005年在《不育症与人精子膜蛋白ADAM基因表达、克隆和转基因细胞构建的研究》文中指出不育症是一种影响人类生存,繁衍的疾病。目前根据有关部门统计,我国的发病率已达10%育龄夫妇。其中有一半是因为男性不育引起。在对不育原因的研究中发现有板有30%以上的患者病因不明,其中有一部分是因为受精出现问题。精卵膜的接触、融合是受精起始的关键环节,而精卵膜蛋白是承担此关键的物质基础和核心部分。在对精子膜蛋白基因的研究中发现ADAM家族和CRISP1家族基因是最有可能和精卵结合相关的基因,而其中以ADAM家族基因可能性为大。 ADAM是近年来发现的一组锚定于细胞膜的细胞表面蛋白家族,该家族成员具有显著的结构特点,有树个较为保守的潜在功能区:信号肽区,前调控区,金属蛋白水解酶区,去整合蛋白区,高半胱氨酸区,多拷贝的上皮生长因子区,跨膜区和胞内区。它具有许多功能,包括精卵结合,细胞融合和分化,组织器官发生和再生,生物活化因子的活化和释放以及信号的传导,而以精卵结合功能受到越来越多的研究生殖领域人们的关注,其中研究较多的是ADAM1,ADAM2,和ADAM3三种基因,而对新基因ADAM32的研究国内外仍是空白。但ADAM32基因与ADAM2基因从结构上被认为是最具有功能作用的基因,所以对ADAM32的研究有着很重要的意义。 本研究运用循证医学的思路,首先根据收集的临床资料,对不育症患者的精液情况与致孕可能性进行统计学分析研究,采用SPSS分析软件,按照WHO的诊断流程图,对不育症的病因,精液指标与致孕的相:关性进行统计,同时建立数据模型,对不育症患者致孕可能性进行前瞻性预测,从而对ART的选择提供指导。研究结果表明不育症病因以原因不明最多,其次为精索精脉曲张,说明对不育症的病因的研究还需进一步努力:精液指标相关性统计结果表明年龄为负相关,精液量,精子密度,精子活力为正相关,其中以A级精子的比例相关性最大,而传统的治疗方法,抗精抗体与受孕无相关性。说明目前尚没有确实有效的治疗不育症的方法,所以ART
参考文献：
[1]. 绵羊精子膜蛋白基因的表达研究[D]. 娜仁花. 内蒙古大学. 2006
[2]. 编码人精子膜蛋白YWK-Ⅱ基因的研究[D]. 于同德. 中国协和医科大学. 1995
[3]. 马鹿精子膜蛋白纯化与理化性质分析[D]. 徐境羚. 东北林业大学. 2007
[4]. 中华绒螯蟹精子膜蛋白提取、抗体制备及其免疫定位研究[D]. 王琦. 河北大学. 2006
[5]. 两种与生育有关的人精子膜蛋白基因的研究[D]. 刘孟元. 中国协和医科大学. 1993
[6]. 两种精子膜蛋白的基因表达研究[D]. 刘强远. 中国协和医科大学. 1990
[7]. 抗牛精子膜蛋白单链抗体基因的克隆与表达[D]. 杨树洪. 中国农业大学. 2004
[8]. 中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子膜蛋白抽提及组成分析[D]. 汪洋. 华东师范大学. 2013
[9]. 人精子膜蛋白cDNA（HSD-1）的表达和功能研究[D]. 陈大虎. 中国协和医科大学. 1997
[10]. 不育症与人精子膜蛋白ADAM基因表达、克隆和转基因细胞构建的研究[D]. 庄建平. 苏州大学. 2005
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