徐琲琲[1]2004年在《人参皂苷-Re对帕金森病模型小鼠脑内多巴胺能神经元保护作用机制的研究》文中进行了进一步梳理帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一种多发于中老年人的慢性神经系统退行性疾病，其特征性病理改变为黑质致密部多巴胺能神经元(dopamincrgic neuron)变性、坏死，继而引起纹状体多巴胺(Dopamine，DA)含量降低。由于PD病因及发病机制目前还不完全清楚，一般认为，氧化应激、细胞凋亡和线粒体功能障碍等多种因素增加了PD的易感性。因此，对神经元的保护和抗细胞凋亡等方面的治疗已成为现在PD治疗的主要思路。其中中药治疗在提高PD治疗效果、减少副作用和控制PD的一些非运动障碍症状等方面取得了一定的疗效。 人参皂苷-Re(ginsenoside-Re，以下简称Re)，为名贵中药人参的有效成分之一，其生物活性广泛。Re与人参皂苷-Rbl、-Rb3、-Rg1等均有不同程度抗氧化和清除自由基的作用，在前期的研究工作中我们也发现Re可通过调节脑内单胺类递质的合成与代谢而达到抗氧化应激的作用。故推测Re可能具有治疗PD的作用。 本研究以C_(57)BL/6小鼠为研究对象，用1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyddine，MPTP)制备PD小鼠模型，分别用行为学、高效液相色谱．电化学检测法(High performance liquid chromatography-electrochemical detection，HPLC-ECD)、逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)、免疫组织化学染色法、原位杂交法(In situ hybridization histochemistry,ISHH)、DNA断裂点标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling，TUNEL)、蛋白免疫印迹法(Western blotting)以及透射电镜(Transmission electron microscope，TEM)等技术和方法观察Re预处理对MPTP诱致PD小鼠的黑质致密部(substantia nigra pars compacta，沈阳药科大学博士学位论文摘要sNc) DA能神经元是否有保护作用，并进一步探讨其可能的脑内细胞分子生物学机制。主要结果如下:1.人参皂昔一Re对帕金森病小鼠多巴胺神经元的保护作用 通过爬杆、悬吊和游泳叁项行为学实验结果显示，模型组小鼠均出现不同程度的行为障碍，得分较生理盐水对照组明显降低;而Re预防给药组小鼠得分则未见明显降低，以Re预防给药高、中剂量尤为显着。提示Re对模型小鼠的运动协调能力有明显的改善作用。 模型组小鼠纹状体DA含量下降84%，高香草酸(homovanillie aeid，HVA)含量下降65%，HV阳DA比值增高。而Re预防给药组小鼠纹状体内DA和HVA含里明显恢复，HV阳DA比值降低;运用免疫组织化学染色法可观察到模型组黑质致密部酪氨酸轻化酶(tyrosine hydroxylase，TH)免疫反应阳性神经元数目与生理盐水对照组相比明显减少(降至正常的40%左右)，Re预防给药组TH免疫反应阳性神经元明显高于模型组，故可以判定此MP仰致小鼠PD模型造模成功，并揭示Re具有保护黑质多巴胺神经元的作用。 胶质原纤维酸性蛋白(glia fabrill卿aeidie nrote恤，GEAP)免疫组化结果显示:与生理盐水对照组相比，模型组小鼠中脑黑质部可见GFAP免疫反应阳性星形胶质细胞增生(P<0 .01);而高、中剂量Re预防给药组与模型组比较未见明显的GEAP免疫阳性星形胶质细胞的增生(P<0 .01)。结果表明DA神经元损伤程度明显减轻与Re具有防止黑质致密部瘫痕化胶质细胞增生有关。 本研究证实，与生理盐水对照组相比，模型组PD小鼠的纹状体(CPu)和黑质网状带(SNr)丫一氨基丁酸(Y一姗访。b试州c acid，GABA)免疫反应阳性神经元数目明显减少(P<0.01)，而Re预防给药组小鼠CPu和sNr区未见GABA免疫反应神经元数目减少。结果提示，Re通过增加PD小鼠黑质网状带GABA能神经元的表达，以保证两个通路的兴奋一抑制平衡。我们推测Re可能是通过促进CPu和SNr内的GABA能神经元的表达，从而抑制SNr的过度兴奋，调节基底节神经回路的兴奋抑制平衡而发挥其抗PD作用的。2.人参皂昔一Re对帕金森病小鼠中脑黑质多巴胺神经元凋亡的保护作用 透射电镜检查是目前鉴定细胞凋亡最具特征性的手段，TUNEL检测法是细沈阳药科大学博士学位论文摘要胞凋亡最敏感的方法之一。本实验结果发现，凋亡的黑质多巴胺神经元细胞缩小，细胞核体积缩小，细胞膜完整，染色质固缩聚集于核膜形成一个或数个沿核膜分布的块状小体或新月型小体。经一定剂量的Re预处理后，存活神经元数目增多，多巴胺能神经元脱失现象减少，凋亡细胞比例也随之下降。以上的研究结果提示，Re对MP仰诱致黑质神经元凋亡有阻断作用，并且此作用与Re的剂量呈一定的量效关系。 P53免疫组化结果发现:与生理盐水对照组相比，模型组小鼠黑质P53蛋白表达显着增多(P<0.05)，而Re预防给药组小鼠黑质P53蛋白表达与模型组相比显着减少(尸切，05)。结果提示，Re的抗黑质DA能神经元凋亡的作用机制可能与减少P53蛋白表达有关。 本研究观察到模型组MP仰可诱导黑质致密带Bax蛋白和bax mRNA表达水平增加，而Bcl一2蛋白和bd一2 mRNA表达水平降低，与生理盐水对照组相比差别显着(尸<0.01);同时Re预防给药组与模型组比较，小鼠黑质致密带Bcl一2蛋白和bd一2 mRNA表达水平均
张琳[2]2007年在《银杏叶提取物对PD小鼠脑内神经干细胞增殖作用的实验研究》文中进行了进一步梳理帕金森病是一种多发于老年人的神经系统退行性疾病,目前该病已成为老年致残和病死的主要疾病之一,它的主要病理变化是投射至纹状体的黑质致密部多巴胺神经元和轴突进行性丢失。黑质内多巴胺神经元减少,使纹状体内多巴胺递质含量降低,引起中枢多巴胺和乙酰胆碱比例失调,在临床上出现震颤、肌肉僵直、运动弛缓等一系列神经精神症状。随着研究的深入,发现很多因素都参与了帕金森病的发病过程,目前尚无对该病发病机制的确切解释。然而,病理学上中脑黑质多巴胺能神经元的进行性丢失是确信无疑的。由于PD病因及病机的复杂性,至今尚无理想的治疗方法。近年来对神经干细胞的研究不断深入,许多学者试图通过刺激内源性神经干细胞的增殖分化为多巴胺能神经元,以补充丢失的细胞并恢复生理功能,中药在这方面也取得了一定的成果。本实验拟从中药诱导刺激内源性神经干细胞的增殖、分化的角度,揭示银杏叶提取物对MPTP诱导PD小鼠模型脑内神经干细胞增殖分化的干预效应和作用机制,为提高神经干细胞增殖分化为多巴胺神经元的能力提供新的手段和途径,也为中药防治PD提供科学基础和实验依据。本实验分为叁个部分:(1)观察MPTP诱导的PD小鼠行为学、组织病理学变化以及银杏叶提取物的作用。(2)应用免疫组化和免疫双标相结合的技术观察PD小鼠脑内神经干细胞的增殖、分化及银杏叶提取物对其的影响。(3)应用免疫组化技术观察与多巴胺神经元发育密切相关的基因Nurr1在PD小鼠脑内的表达以及银杏叶提取物的影响。实验选用C57BL/6小鼠,动物随机分成3组:正常组、模型组和治疗组。正常组不作任何处理;模型组和治疗组首先采用生理盐水配制0.3%MPTP,腹腔注射(30mg/kg/d),连续5d,建立帕金森病小鼠模型。其中模型组造模之后不作任何处理,治疗组从造模第一天开始腹腔注射银杏提取物70mg/kg/d。各组动物的存活期分别是开始造模后的一周和四周。主要实验结果如下:(1)银杏叶提取物对帕金森病模型小鼠行为学和多巴胺神经元丢失的影响正常组小鼠动作灵敏、活动范围广,无震颤,爬杆顺利一般无停留,用时较短。在注射MPTP后,小鼠出现明显的PD行为学改变,包括急性改变(肢体震颤、竖尾、竖毛及跳、窜等)和慢性改变(动作迟缓,对外界反应下降等),这些表现尤其在第一周造模期间变化明显,检测爬杆用时也在第一周明显延长,与正常组差别显着,而在随后慢慢恢复,模型组和治疗组之间无差异,各组也趋于一致。在组织病理学上,可以看到正常组小鼠黑质神经元形态正常,体积正常,结构清晰,模型组一周、四周小鼠黑质神经元数量明显减少,有的胞体变小,胞核固缩。治疗组一周黑质神经元的数量比模型组有少量增多,形态和结构差异不是很明显;而治疗组四周小鼠黑质神经元数量明显增多,体积较正常,结构较清晰。TH免疫组化染色显示,正常组小鼠黑质致密部和腹侧被盖区见大量TH阳性神经元和纤维,密集成群,胞浆内棕色颗粒浓密。模型组和治疗组一周小鼠上述部位TH阳性细胞明显减少,纤维和胞体稀疏,以黑质致密部减少最为明显,阳性细胞数和IOD值与正常组相比有显着的差异,治疗组比模型组有所增多,差异显着。四周小鼠TH阳性神经元也显着减少,胞体少,纤维稀疏。阳性细胞数和IOD值比正常组仍减少明显,差异显着,治疗组与模型组相比,阳性细胞减少与模型组无差异,但IOD值明显较模型组增高。(2)银杏叶提取物对帕金森病模型小鼠脑内成体神经干细胞增殖的影响正常组HE染色,观察到在侧脑室外侧角和下角有少量深染的细胞。细胞较小,呈椭圆形或圆形,胞核深染,胞浆少,聚集存在,在外侧壁,细胞呈单层排列。模型组一周小鼠在侧脑室下角、外侧角和外侧壁,细胞数目比正常组明显增多,在外侧壁某些部位细胞呈多层分布,主要位于室管膜下区;治疗组细胞的数目比模型组增多。模型组和治疗组四周小鼠,与正常组相比也可见较多的细胞聚集在侧脑室下角、外侧角部位,但模型组和治疗组相比无明显差异。正常组小鼠可见少量PCNA阳性细胞在侧脑室外侧角、外侧壁和下角的室管膜下层表达。模型组一周,阳性细胞在上述部位明显增多,治疗组小鼠比模型组增多明显,还可以观察到从外侧角向外侧沿胼胝体下方排列的PCNA阳性细胞。造模后四周可以观察到,模型组和治疗组小鼠侧脑室壁阳性细胞均有不同程度的增多,但在统计学上无显着性差异。正常组小鼠可见少量PCNA阳性细胞主要表达在海马齿状回颗粒细胞下层中。造模后一周,叁组小鼠之间海马齿状回PCNA阳性细胞数目无明显差异,但模型组和治疗组PCNA阳性细胞染色较深。四周,模型组小鼠表达显着增多,较正常组和一周模型组都有显着差异,而治疗组小鼠阳性细胞也有明显增多,比正常组增多有显着差异,但比模型组少。Nestin免疫组化观察到,正常组侧脑室外角和下角有少量阳性细胞表达,染色较浅,细胞较少。模型组一周小鼠在上述部位Nestin阳性细胞数明显增多,治疗组增加幅度更大。模型组和治疗组四周小鼠侧脑室Nestin阳性细胞数较第一周有所减少,但比正常组有显着增加。海马齿状回正常组Nestin主要表达在多形层细胞中,细胞数量较少。模型组一周小鼠Nestin阳性细胞明显增加,治疗组阳性细胞增加的更多,与正常组和模型组相比都有显着的差异。四周,模型组Nestin阳性细胞数基本同第一周,而治疗组Nestin阳性细胞数较正常组增多明显,但比治疗组一周少。PCNA/Nestin免疫双标观察到, PCNA + /Nestin +双标的细胞胞核呈深蓝色,覆盖棕色颗粒后甚至接近棕黑色,胞浆染色呈棕色集中出现在侧脑室下角和外侧角,外侧壁表达较少,海马齿状回颗粒细胞下层也有少量表达。细胞少且胞核染色淡。一周和四周,模型组和治疗组可以看到PCNA+/Nestin+细胞较正常组为多,但四周和一周相比没有显示出较大的差异。(3)银杏叶提取物对帕金森病模型小鼠脑内Nurr1表达的影响Nurr1免疫组化染色显示,正常组小鼠在黑质致密部可见数个散在分布的Nurr1免疫阳性细胞;在海马齿状回部位,Nurr1免疫阳性细胞较为集中在多形层,数量不多。一周,模型组黑质部位和海马齿状回部位Nurr1免疫阳性细胞较正常组明显增多,治疗组小鼠黑质和海马齿状回部位Nurr1免疫阳性细胞数量和光密度增加更为明显。四周,模型组小鼠黑质致密部阳性细胞数和光密度都与正常组比较无统计学差异;治疗组小鼠其阳性细胞光密度较正常组和模型组都有显着增加,差异显着。结论:(1)MPTP可导致黑质多巴胺能神经元丢失,其行为学变化在早期较明显。MPTP能够成功诱导PD小鼠模型,而银杏叶提取物可以在一定程度上保护PD小鼠黑质神经元的损伤和死亡,减缓PD病情的进展。(2)MPTP建立的PD小鼠模型本身能够刺激脑内室管膜下层和海马齿状回细胞的增殖,而银杏叶提取物在此基础上能够进一步刺激神经干细胞的增殖,并可能诱导其向远距离迁移。银杏叶提取物还能够增加与多巴胺神经元分化非常相关的Nurr1因子的表达,提示这些增多的神经干细胞有向多巴胺能神经元分化的可能。
黄凌[3]2008年在《益智仁挥发油对实验性帕金森病的作用研究》文中研究表明帕金森病(Parkinson's Disease,PD)是一种老年神经系统退行性疾病,PD患病率呈逐年上升趋势,在老年退行性疾病中发病率位居第二,仅次于阿尔茨海默病,发病率已达1.03%。目前临床所用的治疗PD药物数量少,且均有长期用药后疗效下降并出现严重不良反应等缺点,因此,开发高效低毒的PD防治药物显得尤为迫切。益智仁为姜科类植物益智(Alpinia Oxyphylla Miq.)的成熟干燥果实,是我国着名的四大南药之一。为了加快益智药材的开发,我国药学工作者对其进行了较系统的研究。研究发现,益智仁主要化学成分为挥发油类、微量元素、萜类、黄酮类及庚烷类等,其中挥发油占1%~2%,研究益智仁化学成分的重点为挥发油成分,用气质联用法已经分析出100余种化学成分,含量较高的有聚伞花烃、香橙醛、芳樟醇、桃金娘醛、α-蒎烯、β-蒎烯等,还含有锌、铜、铁、锰、钴、镁、钙等微量元素,其中锌、锰的含量远远高于其他补益药。现代医学研究表明,益智仁具有强心、抗癌、抗过敏、抗衰老、镇静、镇痛等多方面药理作用。近年来,以益智仁为主的方剂在益智健脑方面的临床应用越来越多,并且在动物实验中进一步证实益智仁具有良好的脑保护作用,可用于老年性痴呆及其他智能障碍类疾病的治疗,对神经细胞有抗氧化、抗衰老、减轻兴奋性毒性和抗凋亡作用。鉴于益智主产于海南岛,且现已大面积栽培,产量高、品质好。因此,充分利用益智进行深加工,研究益智仁挥发油对PD的作用,开发益智仁挥发油作为PD治疗药物很有必要,亦有特色。目的:研究益智仁挥发油对实验性PD的作用,并初步研究其作用机制。方法:(1)水蒸气法提取益智仁挥发油,采用气相色谱法分析实验过程中所用益智仁挥发油的化学成分,研究其可控性及稳定性;(2)采用小鼠BLISS法,对益智仁挥发油进行急性毒性研究,测定其LD50;(3)1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl- 1,2,3,6- tetrahydropyri-dine,MPTP)腹腔注射建立C57BL小鼠PD模型,对PD小鼠进行游泳、自主活动、水迷宫行为学实验,观察益智仁挥发油对MPTP所诱导PD的保护作用;(4)建立PD小鼠模型,溶剂提取法分离小鼠纹状体内DA、5-HT,层析法分离小鼠纹状体内HVA,荧光分光光度计法测定DA、5-HT、HVA含量,观察益智仁挥发油对小鼠脑内单胺类神经递质的保护作用;(5)紫外分光光度计法测定PD小鼠纹状体内SOD活力,MDA、GSH含量;(6)采用免疫组化法,分析益智仁挥发油对小鼠黑质致密部神经细胞TH、BCL-2及CASPASE-3蛋白表达的影响,采用TUNEL细胞凋亡技术分析益智仁对小鼠黑质致密部神经细胞凋亡的影响。结果:(1)益智仁挥发油主要化学成分稳定,质量可控;(2)BLISS法测得益智仁挥发油LD50为8.327ml·kg-1;(3)行为学实验结果显示益智仁挥发油能对抗MPTP所诱导的PD小鼠游泳时间缩短,并且缩短了小鼠游出水迷宫的潜伏期和错误次数,但对小鼠自主活动减少无明显影响;(4)预先给予益智仁挥发油可明显抑制MPTP所引起的小鼠脑组织内GSH含量下降和MDA生成增加,且能抑制纹状体SOD活力的下降;(5)益智仁挥发油能阻遏PD小鼠纹状体内单胺类神经递质下降,预先给予益智仁挥发油可明显抑制小鼠脑内DA、HVA、5-HT含量降低;(6)益智仁挥发油可增加PD小鼠黑质致密部(SNc)TH、BCL-2蛋白的表达,降低SNc内CASPASE-3表达,同时能抑制PD小鼠黑质致密部神经元细胞的凋亡。结论:(1)益智仁挥发油成分稳定、可控;(2)益智仁挥发油毒性甚微,发现益智仁挥发油能对抗PD所致的小鼠行为学改变;(3)通过对益智仁挥发油抗实验性帕金森病机制的初步研究,发现其抗PD机制可能与下列因素有关:①增强对氧自由基的清除能力,抑制脂质过氧化反应;②抑制MAO-B活性,阻遏PD小鼠脑内DA、HVA、5-HT分解代谢;③益智仁挥发油能增加自身抗氧能力,调节与细胞凋亡密切相关的BCL-2、CASPASE-3、TH等调控蛋白的含量和表达,抑制细胞凋亡。
孟海伟[4]2005年在《中药颤复宁对帕金森病的治疗作用及其机理》文中研究说明帕金森病(Parkinson's disease,PD)是影响中老年人身体健康的主要神经退行性疾病,其病因仍然不清。因左旋多巴治疗存在严重的副作用,人们普遍看重PD的神经保护性治疗。许多研究证实中药治疗PD的效果是确切的,可被视为人们所看重的神经保护性治疗方法之一,但目前对中药治疗PD的机理研究则相对较少。 本课题所用“颤复宁”复方中药,应用于临床近20年,取得了良好的治疗效果,它不仅能改善病人的各种症状,对病人的甲状腺功能和免疫功能等均有明显的提高,与西药联合应用效果更佳,能明显降低副作用的发生,效果优于单纯西药治疗。 本课题用6—羟基多巴(6-OHDA)损伤制作的PD体内和体外模型,利用免疫组化、生化检测、RT-PCR、血清药理学和激光扫描共聚焦显微镜等方法,在抗氧化、抗凋亡等方面对颤复宁治疗PD的机理进行了系统研究。旨在为中药颤复宁治疗PD提供实验依据,为PD治疗提供新思路。本实验分为5部分,摘要如下: 第一部分 中药颤复宁对帕金森病大鼠模型的治疗作用 目的:研究中药颤复宁对PD大鼠模型的治疗作用。 方法:用6-OHDA两点注射右侧纹状体制作单侧PD大鼠模型,注射等剂量的生理盐水的假手术组为对照。实验共分3组,每组6只:对照组、模
焦玥, 王丹巧, 王巍[5]2008年在《中医药治疗帕金森病的研究进展》文中认为帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种常见的老年中枢神经系统变性疾病,以静止性震颤、肌肉僵硬、运动迟缓、姿势不稳和步态障碍为主要临床症状,在我国60岁以上人群年发病率高达1/1000。伴随社会的老龄化,患病人数还在逐年增多。该病致残率
陈立敏[6]2007年在《人参皂苷Re基于多靶点理论的抗阿尔茨海默病作用研究》文中研究说明阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年患者记忆障碍的常见原因,随着世界人口趋向老龄化,该病的发病率正日益增加,AD的病理学特征是患者脑内存在老年斑(senile plaque,SP),神经原纤维缠结(neuro fibrillary tangles,NFT)以及神经元丢失。AD严重威胁着老年患者的健康,AD患者表现为进行性记忆功能减退,语言功能下降,认知功能障碍。尽管AD发病机制尚未研究清楚,许多因素在AD的发病机理中起着重要的作用,例如,β-淀粉样蛋白和tau蛋白的聚集、金属离子过量(例如Cu~(2+),Zn~(2+),Fe~(3+))、氧化应激以及乙酰胆碱水平下降等。这就为抗AD药物的发现提供了更多靶点。目前,大量的合成或天然的分子化合物已经用来减少β-淀粉样蛋白的生成(例如β-分泌酶抑制剂),阻止β-淀粉样蛋白或tau蛋白的聚集,螯合金属离子,减轻活性氧损伤,抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)或单胺氧化酶(MAO)以达到治疗AD的目的。然而,单一靶点存在着局限性,这就使得寻找组合方法治疗AD变得更加迫切。本研究依据雌激素受体β亚型细胞信号转导理论,建立基于细胞和报告基因的药物筛选模型。在药物筛选的过程中将功能性反应作为筛选指标,在细胞水平上对可以改变转录因子活性或影响细胞调控的小分子进行筛选,根据这一原理我们首先构建含有雌激素应答序列(estrogen responsive element,ERE)靶序列和报告基因的诱导性表达载体,并将其转染入人胚胎肾细胞(HEK293)中等到稳定转染重组表达载体的单克隆细胞株,并对此模型进行评价,结果显示本研究建立了高效、灵敏、可以筛选具有雌激素β亚型激动剂样活性的化合物的细胞模型,利用本细胞模型筛选有机小分子化合物342个,筛选样品达1000多次。人参皂苷Re表现出弱的雌激素受体β亚型激动剂样活性作用。我们同样还建立了基于报告基因和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路的细胞筛选模型,构建含有NF-κB靶序列和报告基因的诱导性表达载体,并将其转染入人胚胎肾细胞(HEK293)中得到稳定转染的重组表达载体的单克隆细胞株,并对此模型进行评价。人参皂苷Re可以抑制脂多糖引起的NF-κB信号通路的诱导表达增加。实验结果表明,人参皂苷Re对神经细胞的保护作用机理不是单一的,其药效是多种机理综合作用的结果。应用5mmol·L~(-1)高浓度的谷氨酸(glutamate,Glu)与PC12细胞短暂共孵育后无血清培养24h,能引发迟发性神经毒性,100μmol·L~(-1)和10μmol·L~(-1)人参皂苷Re对Glu诱导的PC12细胞损伤有保护作用,能增加细胞的存活率并抑制LDH释放。10μmol·L~(-1)人参皂苷Re能降低D-Hanks液中的静息状态游离钙的浓度;100μmol·L~(-1)和10μmol·L~(-1)人参皂苷Re能抑制KCl诱导的[Ca~(2+)]i增高;1mmol·L~(-1)、100μmol·L~(-1)和10μmol·L~(-1)人参皂苷Re抑制Glu诱导的[Ca~(2+)]i增高,因此人参皂苷Re可能通过抑制细胞膜上的钙通道,减少细胞外钙内流和细胞内钙释放而减低细胞内游离钙的增加,从而对谷氨酸诱导的神经毒性有保护作用。本实验还从膜脂流动性等指标观察了人参皂苷Re对谷氨酸所致大鼠原代神经细胞损伤的保护作用。建立大鼠原代神经细胞谷氨酸损伤模型,以1,6-二苯基-1,3,5-己叁烯(DPH)为探针,用荧光偏振法测定荧光偏振度(P)值和微粘度(η),研究细胞膜脂流动性的改变;MTT(四甲基偶氮唑盐)法、培养介质乳酸脱氢酶(LDH)活力测定观察人参皂苷Re的保护作用。结果人参皂苷Re组荧光偏振度和微粘度低于谷氨酸损伤组,且呈现剂量依赖关系。人参皂苷Re组原代神经细胞LDH的释放减少,吸光度增加,但人参皂苷Re对正常细胞增殖无影响。说明人参皂苷Re对谷氨酸所致的大鼠原代神经细胞损伤具有保护作用,其保护作用可能与人参皂苷Re改善神经细胞膜脂流动性有关。实验结果表明,经10μmol·L~(-1)Aβ_(1-40)处理后的SHSY5Y细胞对MTT的还原能力下降,细胞活力明显下降,LDH释放增加。人参皂苷Re 10μmol·L~(-1)能明显改善细胞存活能力,降低LDH释放。我们选用SD大鼠为研究对象,制备了阻断大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血(MCAO)再灌注模型,考察人参皂苷Re对大鼠脑缺血再灌注后线粒体肿胀度的影响和H~+-ATP酶的作用。研究结果表明,人参皂苷Re(5、10、20mg/kg)连续7天灌胃给MCAO再灌注大鼠后,可以降低线粒体的肿胀度,防止H~+-ATP酶活性的降低。综上结果表明:人参皂苷Re对与阿尔茨海默病相关的多个靶点都有作用。人参皂苷Re有雌激素受体β亚型激动剂样活性,具有抗炎作用,抑制钙超载,拮抗β淀粉样蛋白的损伤,改善神经细胞膜脂流动性,减轻线粒体的肿胀度,抑制线粒体H~+-ATP酶活性的下降。
焦玥, 王丹巧[7]2008年在《中医药治疗帕金森病的研究进展》文中进行了进一步梳理帕金森病(PD)的经典治疗用药左旋多巴远期疗效欠佳、副作用大。中医和中西医结合治疗 PD 显示出一定优势:个体针对性强,早期干预 PD 并发症。中药与西药联用,显示出增强疗效、减少毒副作用的效果。随着中药新药的不断开发,中西医结合治疗帕金森病及多种老年退行性疾患将在治疗疾病,延缓病程发展等方面发挥重要的作用。
吴艳, 杜娟, 张晓雷[8]2019年在《参附注射液联合左旋多巴对帕金森病小鼠黑质组织形态及酪氨酸羟化酶水平的影响》文中研究说明目的 研究参附注射液联合左旋多巴对帕金森病小鼠黑质组织形态及酪氨酸羟化酶水平的影响。方法 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射制备帕金森病小鼠模型,分别给予左旋多巴、参附注射液、参附注射液+左旋多巴14 d后,检测小鼠神经行为学,ELISA法检测血液及脑组织中酪氨酸羟化酶(TH)水平,HE染色观察脑组织黑质区神经元,免疫组化染色、Western blot法检测脑组织黑质区TH蛋白表达。结果 参附注射液可显着缩短爬杆时间,增加悬挂能力评分,提高TH水平及蛋白表达(P<0.05,P<0.01),联合左旋多巴应用时上述指标改善更明显(P<0.05,P<0.01)。结论 参附注射液对帕金森病小鼠有神经保护作用,联合左旋多巴时效果更强。
参考文献：
[1]. 人参皂苷-Re对帕金森病模型小鼠脑内多巴胺能神经元保护作用机制的研究[D]. 徐琲琲. 沈阳药科大学. 2004
[2]. 银杏叶提取物对PD小鼠脑内神经干细胞增殖作用的实验研究[D]. 张琳. 北京中医药大学. 2007
[3]. 益智仁挥发油对实验性帕金森病的作用研究[D]. 黄凌. 重庆医科大学. 2008
[4]. 中药颤复宁对帕金森病的治疗作用及其机理[D]. 孟海伟. 山东大学. 2005
[5]. 中医药治疗帕金森病的研究进展[J]. 焦玥, 王丹巧, 王巍. 中国中医基础医学杂志. 2008
[6]. 人参皂苷Re基于多靶点理论的抗阿尔茨海默病作用研究[D]. 陈立敏. 沈阳药科大学. 2007
[7]. 中医药治疗帕金森病的研究进展[C]. 焦玥, 王丹巧. 世界中医药学会联合会老年医学专业委员会成立大会暨第一届学术会议论文集. 2008
[8]. 参附注射液联合左旋多巴对帕金森病小鼠黑质组织形态及酪氨酸羟化酶水平的影响[J]. 吴艳, 杜娟, 张晓雷. 中成药. 2019
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