（永州市中心医院）
摘要：目的 研究乳腺癌患者血清色素上皮衍生因子（PEDF）、基质金属蛋白酶7（MMP-7）水平并探讨其在在乳腺癌中的临床意义。方法 收集本院 2017年3月至2017年10月间经术后病理证实为乳腺癌的患者45例，选取同期于本院行正常体检的健康志愿者及术后病检证实为乳腺良性病变者各45例作为对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测二者在三组中各患者的表达水平，分析其与常见临床病理特征的相关性。结果 乳腺癌患者外周血中PEDF的浓度显著低于对照良性疾病组(P<O．05)，MMP-7的浓度显著高于对照良性疾病组(P<O．05)；乳腺癌患者PEDF术后一周的血清浓度显著升高(p<O．05)，MMP-7术后一周的血清浓度下降(p<O．05)；乳腺癌患者PEDF血清浓度与患者年龄、病理类型、是否绝经、HER-2状态无关(P>0.05)，而与肿瘤大小、浸润水平、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)；MMP-7血清浓度与患者年龄、肿瘤大小、病理类型、TNM分期、是否绝经的无关(P>0.05)，与浸润程度、淋巴结转移、HER-2状态有关(P<0.05)；乳腺良性病变患者PEDF、MMP-7术前术后外周血中的浓度差别无显著性(P>0.05)。结论 血清的PEDF的低表达与MMP-7的高表达与乳腺癌的恶行生物学行为有关，早期检测血清PEDF、MMP-7含量可能对乳腺癌的预后及指导治疗有一定意义。
关键词：乳腺癌；临床病例特征；PEDF；MMP-7
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，发病率及死亡率一直居于女性恶性肿瘤的首位[1]。随着健康意识的提升以及筛查、治疗方法的进步，乳腺癌的诊断及预后较前已有了明显的改善，但是复发及转移仍是其死亡的重要原因[2]，目前仍没有合适的预测其生物学行为的指标。色素上皮衍生因子（PEDF）是丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族的成员之一，在抑制血管生成、抗肿瘤增殖及免疫调节等方面发挥着重要作用[3-5]。MMP-7做为基质金属蛋白酶家族成员之一，能有效降解细胞外基质且诱导肿瘤间质细胞产生多种生物活性酶，从而在肿瘤的生长、侵袭及转移中起重要作用[6]。目前对于二者在其他肿瘤中的研究已有报道，但在乳腺癌中的研究及联合检测，特别是血清中检测的相关报道较为匮乏。本研究旨在研究乳腺癌患者血清色素上皮衍生因子（PEDF）、基质金属蛋白酶7（MMP-7）水平并分析二者与乳腺癌常见临床病理特性的相关性，探讨其在乳腺癌中的临床意义。
1.资料与方法
1.1 一般资料 收集本院 2017年3月至2017年10月间经术后病理证实为乳腺癌的患者45例，其中男性1例，女性44例，年龄25-70岁，TNM 分期分为：I期13例，Ⅱ期14例，Ⅲ期13例，Ⅳ期5例。选取同期于本院行正常体检的健康志愿者及术后病检证实为乳腺良性病变者各45例作为对照组。术前均取肘静脉血，排除心血管疾病、免疫性疾病、肝硬化等全身性肿瘤。术后静脉血于术后第七天清晨空腹时采集。每份静脉血均抽取5ml，取血后放入抗凝采血管。静置１ｈ，４℃，离心力1000g（2500r/min），离心20min。离心后取上层血清1ml，分装至离心管，-20℃超低温冰箱备用同时收集患者临床相关资料。
1.2 试剂与方法 人（PEDF、MMP-7）ELISA试剂盒均购自于上海鑫乐生物科技有限公司。采用酶联免疫吸附法分别检测样本中PEDF、MMP-7的浓度，具体步骤严格按照试剂说明书进行操作。
1.3 统计学处理 应用Spss18.0统计软件，正态计量资料以x±s表示，两组之间的比较采用独立样本t检验。采用Person相关分析两变量间的相关性，P <0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1血清PEDF及MMP-7在各组中的表达
乳腺癌患者外周血中PEDF的表达显著低于对照良性疾病组(P<O.05)，血清 MMP-7的表达明显高于对照良性疾病组(P<O.05),见表一。
表1 术前外周血中PEDF、MMP-7的表达
3 讨论
尽管近年来乳腺癌的诊疗有了很大进步，预后也得到了极大改善，但分子分型较差的乳腺癌患者总体预后仍不乐观[7-8]。目前评估乳腺癌患者预后仍主要依据肿瘤分期、分子分型等指标，但仍没有特异性的预测指标。因此，需要进一步研究筛选可以预测乳腺癌各项生物学行为的可靠指标，以便在临床中有更多参考。
色素上皮衍生因子（PEDF）是由位于染色体17p13上的基因编码的50kDa具有抗血管生成、免疫调节和神经营养功能的丝氨酸蛋白酶抑制剂，此外，PEDF还可以通过Fas/FasL内在死亡途径杀死肿瘤细胞[9]发挥直接的抗增殖作用并诱导肿瘤细胞正常分化[10]。许多研究表明PEDF做为肿瘤抑制基因在肿瘤的侵袭、发展过程中发挥重要作用，动物模型实验中，用慢病毒载体介导使PEDF过表达，能有效延缓胰腺癌及子宫内膜癌肿瘤细胞的生长并且显著阻断新生血管的形成[11]，Jarvis等[12-13]发现PEDF通过双向信号调节巨噬细胞和前列腺癌细胞之间的相互作用，导致肿瘤细胞凋亡和加强免疫细胞的吞噬作用，并且在前列腺癌患者术前检测PEDF可提供关于肿瘤病理级别的相关信息。另据报告显示，肿瘤的生长及侵袭总是伴随着周围血管的发生，PEDF可以通过下调VEGF的表达降低微血管密度来抑制肿瘤肿瘤生长[14]。本研究中发现乳腺癌患者外周血中PEDF的表达显著低于良性病变组，这与Lewis-Wamb[15]的结果较一致，且PEDF的表达水平与肿瘤大小、浸润程度、有无淋巴结转移、TNM分期有关，可能提示其在乳腺癌的发生发展、侵袭等过程中扮演重要角色。对于激素受体阳性的乳腺癌患者，术后体内激素水平的升高是其内分泌治疗失败及肿瘤复发转移的重要因素，Jan等[16]研究表明PEDF 沉默可能是乳腺癌内分泌抵抗的新机制，在内分泌治疗过程中PEDF的重新表达可能是内分泌反应性的重要标志。由于PEDF是内源性产生的，这就降低了其会像其它合成试剂那样产生不良反应或发生耐药的可能性，因而为激素阳性乳腺癌的内分泌治疗提供了一个新的思路。
MMP-7做为基质金属蛋白酶家族成员之一，其分子量最小，受MMP抑制剂的负调节较小，具有强大的基质降解活性和广泛的底物特异性，主要表达于某些肿瘤细胞或肿瘤浸润边缘的间质中，通过蛋白水解、裂解细胞外基质和基底膜的蛋白质，促进癌细胞的侵袭和转移。MMP-7对结缔组织生长因子具有酶水解作用，而体内结缔组织生长因子是VEGF的天然抑制因子，MMP-7的高表达激活成纤维细胞分泌VEGF，从而促进血管生成因子的促进作用，并抑制血管生成因子减少，血管生成于基质，肿瘤营养丰富，对促进肿瘤生长有一定的效果[6]。MMP-7的高表达与多种肿瘤的侵袭浸润相关，因其强大的基质溶解性，激活后将基质溶解并允许细胞穿过基底膜,通过基底膜可以进入循环并可能形成新的转移源[17]，研究发现[18]与正常乳腺组织相比，乳腺浸润性导管癌和导管原位癌MMP-7的阳性表达率显著升高并且与乳腺癌的组织学分型，临床分期和淋巴结转移密切相关，这与本研究的结果基本一致，提示MMP-7不仅参与了乳腺癌的发生和发展．同时参与了乳腺癌的转移进程。基于MMP-7在肿瘤细胞迁徙，扩散，组织侵袭和转移过程中的关键作用，因此进一步对MMP-7在恶性肿瘤中作用机制的深刻探讨，对恶性肿瘤患者的治疗及预后评价具有重要意义。
综上所述，血清的PEDF的低表达与MMP-7的高表达与乳腺癌的恶行生物学行为有关，本研究为其提供了初步的临床证据，早期检测血清PEDF、MMP-7含量可能对乳腺癌的预后及指导治疗有一定意义，但本研究为回顾性研究，并且病例数有限，明确的临床价值需要更大样本、随机和多中心的临床研究取证实。
参考文献
[1]SIEGEL R， NAISHADHAM D，JEMAL A．Cancer statistics，2013[J]．CA Cancer J Clin，2013，63(9)：11-30．
[2]S.J. Liu.The ROCK signaling and breast cancer metastasis Mol. Biol. Rep., 38 (2011), pp. 1363-1366.
[3]M. Mejias, L. Coch, A. Berzigotti, etal.Antiangiogenic and antifibrogenic activity of pigment epithelium-derived factor (PEDF) in bile duct-ligated portal hypertensive ratsGut, 64 (2015), pp. 657-666.
[4]P.J. Grippo, P.S. Fitchev, D.J. Bentrem, etal.Concurrent PEDF deficiency and Kras mutation induce invasive pancreatic cancer and adipose-rich stroma in mice Gut, 61 (2012), pp. 1454-1464.
[5]SP Becerra，V Notario.The effects of PEDF on cancer biology：mechanisms of action and therapeutic potential ，Nat Rev Cancer，13（2013），pp.258-271.
[6]Helge, Stenvold,Tom,et al.Overexpression of matrix metalloproteinase-7 and -9 in NSCLC tumor and stromal cells: correlation with a favorable clinical outcome.[J].Lung cancer (Amsterdam, Netherlands),2012,75(2):235-41.
[7]F. Wang, L. Yu, F. Wang, et al.Risk factors for breast cancer in women residing in urban and rural areas of eastern China.J Int Med Res, 43 (6) (2015), pp. 774-789.
[8]X.J. Shi, W.W. Au, K.S. Wu,et al.Mortality characteristics and prediction of female breast cancer in China from 1991 to 2011.Asian Pac J Cancer Prev, 15 (6) (2014), pp. 2785-2791.
[9]M. Mejias, L. Coch, A. Berzigotti, etal.Antiangiogenic and antifibrogenic activity of pigment epithelium-derived factor (PEDF) in bile duct-ligated portal hypertensive ratsGut, 64 (2015), pp. 657-666.
[10]P.J. Grippo, P.S. Fitchev, D.J. Bentrem, etal.Concurrent PEDF deficiency and Kras mutation induce invasive pancreatic cancer and adipose-rich stroma in mice Gut, 61 (2012), pp. 1454-1464.
[11]Yang H，Grossniklaus HE． Constitutive overexpression of pigment epithelium—derived factor inhibition of ocujar melanom8 gmwth and me—tastasis[J]．Invest 0phthalmol Vis sci，2010，51:28-34.
[12]Guo T,Gu C,Li B.PEDF inhibits growth and invasiveness of endometrial cancer cells in vitro.Panminerva Med. 2012 Dec;54(4):299-304.
[13]Martinez-Marin D,Jarvis C,Nelius T,et al.PEDF increases the tumoricidal activity of macrophages towards prostate cancer cells in vitro.PLoS One. 2017 Apr 12;12(4):e0174968.
[14]He SS，Shi HS，Yin T．AAV—mediated gene transfer of human pigment epithelium—derived factor inhibits Lewis lung carcinoma growth in mice[J].ncol Rep，2012 27;142-1148.
[15]Lewis-Wambi J，Jan R，Huang M. Loss of pigment epithelium-derived factor：a novel mechanism for the development of endocrine resistance in breast cancer [J]. Breast Cancer Res，2012，14(6)：146-148.
[16]Jan R，Huang M，Lewis - Wambi J. Loss of pigment epithelium -derived factor： a novel mechanism for the development of endocrine resistance in breast cance［r J］. Breast Cancer Res,012,4（6）:146.
[17]Helge, Stenvold,Tom,et al.Overexpression of matrix metalloproteinase-7 and -9 in NSCLC tumor and stromal cells: correlation with a favorable clinical outcome.[J].Lung cancer (Amsterdam, Netherlands),2012,75(2):235-41.
[18]Zhang W, Li F, Zhang FY，et a1. Matrix metalloproteinase -7, to study the expression and significance of E-cadherin and VEGF in breast cancer [J]. China herald of medicine, 2012,09 (18): 71-74.
基金项目：湖南省卫生计生委科研计划课题项目（B2017177）
论文作者:申阳 江拥军 唐朝晖 李生富 周恒波 刘云峰 唐文杰 段四海
论文发表刊物:《航空军医》2018年10期
论文发表时间:2018/8/16
标签：乳腺癌论文; 肿瘤论文; 血清论文; 患者论文; 基质论文; 术后论文; 细胞论文; 《航空军医》2018年10期论文;