（哈尔滨市血液病肿瘤研究中心，实验室 150010）
摘要：目的 探讨细胞化学染色法在急性白血病（AL）分型的应用及诊断价值。方法 选取我院2017年1月~2018年6月期间收治的急性白血病患者50例，应用细胞化学染色中各亚型三种细胞化学染色结果进行分析。结果 对急性白血病患者分型中P0X、CE、PAS 区别急性淋巴细胞白血病（ALL）与急性非淋巴细胞白血病（ANLL），NAE用于判定粒系与单核系白血病的区分。结论 细胞化学染色是急性白血病确诊分型和鉴别诊断客观指标，提高急性白血病的诊断率，方法稳定，操作简便，值得临床推广应用。
关键词：白血病；细胞化学染色；分型；临床应用
细胞化学染色法即利用化学反应显示细胞内各种成分的存在和数量。这是一大类染色法，从被显示的物质可分为核酸、蛋白质、脂类、糖类、酶或其他物质的染色等。临床上可为某些血液病的诊断、鉴别诊断、疗效及预后观察，提供极重要的依据[1]。急性白血病分为急性淋巴细胞性白血病（ALL）和急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）两大类。通过细胞化学技术研究对白血病患者血细胞成分、结构及代谢的改变，是急性白血病分型和鉴别诊断的重要方法，现分析如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2017年1月~2018年6月期间收治的急性白血病患者50例均为初诊，其中男24例，女26例，年龄最小2岁，最大76岁，平均年龄42±2.5岁。
1.2 方法
采用细胞化学染色，
①过氧化物酶（POX）染色：取0.1％TMB乙醇溶液1ml，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10μm（临用时配制），在新鲜干燥的血片上，加以上新配制的试剂0.5ml，放置1ml后，再加稀释的过氧化氢溶液0.7ml，吹匀，染色6 min。倾去染液，待干，再用瑞士染液复染15～20 min。用水冲洗后，待干，用油镜检查。
②特异性酯酶染色（CE）：新鲜干燥涂片，用甲醛-甲醇固定液固定30 s，或用甲醛蒸汽熏5～10 min。水洗，凉干。放入作用液，37℃ 30 min。水洗，苏木素染液复染1～2 min。水洗，凉干，镜检。
③非特异性酯酶染色（NAE）：新鲜涂片置10％甲醛生理盐水中5 min或甲醛蒸汽固定5～10 min。流水冲洗5 min，晾干。放入作用液，37℃ 1 h。水洗后，用甲基绿水溶液复染5 min。水洗，干后镜检[2]。用氟化钠抑制试验作对照，在40ml作用液中加入氟化钠15 mg，其余方法同上。两种方法染色后用油镜计数100或200个被检细胞，分别计算出抑制前和抑制后的阳性率和积分。
④糖原（PAS）染色：新鲜干燥血片或骨髓片于95％乙醇中固定10min。蒸馏水冲洗数次，待干。10g/L过碘酸水溶液中浸10min。蒸馏水冲洗数次，待完全干燥。放入雪夫液30min。用自来水冲洗约5 min，再用蒸馏水冲洗，然后用20g/L甲基绿复染20 min，水洗，晾干。
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1.3 阳性率与积分计算
“+”记为1分，“+ +”记为2分，“+ + +”记为3分，“+ + + +”记为4分，阳性反应的细胞换算为积极分后相加求和。
1.4统计学分析
所有数据资料采用SPSS20.0统计学软件进行处理分析，计数资料采用平均值±标准差即（ ±s）表示，组间采用t检查；计数资料采用百分率（%）表示，组间采用x2检验，P<0.05表示为组间差异具有统计学意义。
2 结果
ALL原始细胞POX均为阴性，M1 8例，POX积分值为6.1；M2 12例，POX积分值为153.9；M3 4例，POX积分值为361.5；M4 6例，POX积分值为90.9；M5 11例，POX积分值为56.8。
CE染色ALL均为阴性，M1 8例，CE积分值为97.8；M2 12例，CE积分值为81.2；M3 4例，CE积分值为315.5；M4 6例，CE积分值为103.5；M5 11例，CE积分值为43.5；粒系的CE随着细胞的成熟而增加。
PAS染色ALL阳性细胞中红色颗粒粗，有的成块状，ALL患者PAS积分68.8，M1 8例，PAS积分值为54.5；M2 12例，PAS积分值为125.2；M3 4例，PAS积分值为167.9；M4 6例，PAS积分值为128.8；M5 11例，PAS积分值为123.8。
NAE染色，ALL者NAE积分18.6，M1 8例，NAE积分值为32.8；M2 12例，NAE积分值为45.8；M3 4例，NAE积分值为187.9；M4 6例，NAE积分值为88.8；M5 11例，NAE积分值为150.2。M3在细胞化学染色中以积分高为其特点，居急性非淋巴细胞白血病之首。
3 讨论
血细胞化学染色是根据化学反应的原理，应用涂片染色的方法，观察血细胞的化学成分及其变化的重要方法，它以细胞形态学为基础，对血细胞内的各种化学物质作定性、定位、半定量分析[3]。各种类型血细胞的化学成分、分布及其含量不完全相同。在病理情况下，血细胞的化学成分可以发生改变。细胞化学染色在临床上用于辅助判断急性白血病的细胞类型。
过氧化酶染色（POX），粒细胞浆含量丰富，晚期原始粒细胞以后各阶段均呈阳性反应；单核细胞浆含量较少，幼单核细胞及其以后阶段单核细胞呈弱阳性反应；淋巴细胞、浆细胞、红细胞系及巨核细胞系不含有，呈阴性反应。特异性酯酶染色（CE）为中性粒细胞所特有，分化型原粒细胞呈弱阳性，早幼粒细胞强阳性，随细胞成熟反应减弱；嗜酸性细胞、淋巴细胞、单核细胞一般呈阴性反应[4]。非特异性酯酶染色（NSE）单核细胞呈强阳性反应，并为NaF所抑制；粒细胞为阴性或弱阳性反应，不为NaF抑制；淋巴细胞呈阴性反应。糖原染色（PAS）用于白血病类型和淋巴系增生良恶性鉴别：粒细胞系原始粒细胞多为阴性，早幼粒细胞以后各阶段细胞均呈阳性，并随成熟而增强；单核细胞系幼稚单核细胞为阳性；成熟巨核细胞和血小板呈阳性反应；淋巴细胞系约20％呈阳性，恶性增生时如恶性淋巴瘤、霍奇金病、急性或慢性淋巴细胞白血病，淋巴细胞的积分值升高；病毒性感染淋巴细胞积分值在正常范围。
细胞化学染色是急性白血病临床诊断、分型和鉴别诊断中不可缺少的客观指标，方法稳定，操作简便，便于广大基层医院接受。
参考文献
[1]李喆，贺其图. 细胞化学染色在急性白血病分型中应用的探讨[J]. 内蒙古医学杂志，2010，42（1）：111-113.
[2]宫继勇，毕早斌，田万林. 细胞化学染色在急性白血病分型中的应用[J]. 蚌埠医学院学报，2007，32（2）：212-213.
[3]唐亚辉，杨平地，张东，等. 细胞化学染色在急性白血病分型中意义的探讨[J]. 转化医学杂志，2002，15（4）：221-223.
[4]丁红，崔雯，杨继芳，等. 四种细胞化学染色与免疫学分型对急性白血病诊断的对比分析[J]. 云南医药，2005（1）：37-39.
论文作者:王威
论文发表刊物:《航空军医》2018年18期
论文发表时间:2018/11/30
标签：细胞论文; 白血病论文; 积分论文; 值为论文; 淋巴细胞论文; 粒细胞论文; 化学论文; 《航空军医》2018年18期论文;