张国华[1]2000年在《肾素血管紧张素系统的活化在环孢霉素A肾病中的作用》文中认为目的和意义 环胞霉素A（CsA）目前仍然是器官移植抗排斥以及自身免疫性疾病治疗的主要药物之一。CsA引起的慢性肾毒性是限制该药长期使用的一个主要副作用。细胞外基质沉积，肾小管萎缩，肾小球入球动脉透明样变是其主要特点。该病的发病机制目前尚未完全阐明。近年来盐缺失大鼠慢性CsA肾毒性模型试制成功为研究慢性CsA肾毒性提供了必要条件。盐缺失大鼠肾素-血管紧张素系统（RAS）处于激活状态，临床观察也发现，在肾移植术后长期使用CsA导致移植肾慢性肾毒性病人，移植肾肾小球旁器（JGA）肥大，这些都表明RAS活化与慢性CsA肾毒性密切相关。本研究旨在探讨RAS活化在CsA引起的慢性肾间质纤维化中的作用，以及阻断RAS对慢性肾间质纤维化进程的影响，为临床预防和治疗CsA肾毒性提供理论依据。 材料与方法 实验分组：本实验采用体重225-250g的雄性SD大鼠，用低盐饮食（钠含量0.05％）饲养7天后随机分成1）对照组（VH），2）CsA处理组（CsA），3）CsA+盐酸维拉帕米（10mg·kg~-·~1d~(-1)，广州白云山制药厂）处理组（CsA+V），以排除血压降低的影响。4）CsA+Enalapril（10mg·kg~-·~1d~(-1)）处理组（CsA+E）和5）CsA+Losartan（CsA+L）（10mg·kg~(-1)·d~(-1)）处理组，每组7只。CsA为橄榄油制剂（Sandoz），使用前以生理盐水配成10mg/ml）。除对照组外各组皮下注射CsA剂量均为（15mg·kg~(-1)·d~(-1)），每日一次，对照组注时等体积的橄榄油。所有大鼠继续以低盐饮食，自山饮水，第28 天处死动物观察以下项目： 1、通过放射免疫测定血循环及肾组织肾素、血管紧张素＊的水平并用免疫组织化学法或／和 Northern blot检测肾组织血管紧张素＊ l型受体（AT）、TGF pl、H聚糖蛋白。增殖细胞核抗原（PCNA）。Fas的表达。采用T口NEL法以检测大鼠肾小管间质细胞凋亡的发生。此外，用原位杂交检测HGF mRNA的表达。 实验过程中，采用MRB—IllA型电脑大鼠血压自动记录仪（上海血压研究所制造）监测血压。 肾功能检测：血、尿肌酥由日立 717 OA自动生化分析仪检测，尿N一乙酚氨基葡萄糖昔酶（＊＊G）用比色法测定（福州太阳公司试剂盒），尿渗透压由Model 3MO渗透压测定仪完成。 所有大鼠肾组织标本10％中性福尔马林固定，石蜡包埋，切片厚4u m，PAS、Mass。n染色后，在装有测微尺的 20 X目镜下分别对肾间质纤维化，肾小管萎缩程度进行评定计分。 主要结果如下： l、CsA处理组肾小球滤过功能较未用CsA处理的对照组有明显下降（P＜0．of），Enal叩ril和 Losartan处理并不能改善 CsA弓起的肾勺球功能减退。 2、QA 处理组尿渗量明显低于未用 乙A处理的对照组，ho刀5：Enalapril处理组。Losartan处理组、维拉帕米处理组与CsA处理组相比，虽有升高，但统计学上无显著差异，P均＞0刀5。CSA处理组NAG明显高于未用 CSA处理的对照组，P＜0刀5：Eflslapfil处理组、LOS8rtdri处理组、维拉帕米处理组NAG明显低于乙A处理组，P均＜0．05。 3、注射 CSA 28天后，大鼠有明显的肾间质纤维化，而未用 CSA处理的对照组肾间质几乎无改变，CSA处理组肾问质纤维化、肾小管萎缩汁分均明显低于未用 CsA处理的对照组，P均叩刀of；Enalapril处理组、Losartan处理组肾间质纤维化、肾小管萎缩计分均明显低于CsA处理组，P＜0刀5或P＜0刀1：而维拉帕米处理组与CSA处理组无明显差别，P＞0刀5。 4、放射免疫测定结果表明，CSA处理组大鼠循环、肾组织肾素活性， IO 循环、肾组织 Aug 11浓度均明显高于未用 CsA处理的对照组，P均＜0刀5。 Losartan处理组循环、肾组织肾素活性均明显低于CsA处理组，P＜0刀1， Enalapril和 Losartan处理组循环、肾组织 Aug 11浓度明显低于 CsA处理 组，P均＜0刀5。维拉帕米处理组与CSA处理组无明显差别，P＞0刀5。肾 组织局部 Aug 11浓度与肾间质纤维化程度呈明显正相关，r叫．9，P＜0．of。 免疫组织化、Northern blot检测结果表明：CsA使大鼠肾组织 ATIR表达 下调。应用Enalapril或Losartan处理后、ATIR表达明显高于oA处理组， P分别＜0刀5 和＜0刀1。而维拉帕米处理组与CSA处理组无明显差别， P＞0刀5。 5、CSA 处理组 TGF pl mRNA 表达明显高于对照组，P＜0刀 1。 Enalapril、Losartan处理组TGF p lmRNA表达明显低于CsA处理组J 分别＜0．05 和＜0刀1）：而维拉帕米处理组与 QA处理组无明显差别， P＞0．05。免疫组化结果表明：单纯CsA处理组＊＊F pl、细胞外基质二 聚糖蛋白较对照组明显增加，Enalapril、Losartan处理组TGF pl、二聚 糖蛋白表达明显少于
张国华, 张训, 侯凡凡, 王力[2]2003年在《肾素血管紧张素系统激活在环孢霉素A肾病中的作用》文中研究指明目的 :探讨肾素血管紧张素系统 (RAS)的激活在环孢霉素 A (Cs A)肾病中的作用。方法 :低盐饮食大鼠皮下注射 Cs A(1 5 mg· kg- 1· d- 1 ) 2 8d制成 Cs A肾病模型。 Cs A肾病大鼠分别胃内灌入自来水、盐酸维拉帕米、依那普利 ,剂量均为 1 0 m g· kg- 1· d- 1。采用放射免疫法检测各组实验动物血管紧张素 (Ang )水平 ;Northern杂交检测肾组织血管紧张素 1型受体 (AT1 R) m RNA的表达 ,同时对各组实验动物肾间质纤维化程度进行半定量计分。结果 :Cs A处理组血浆和肾组织 Ang 水平为 (4 92± 92 ) ng/L 和 (2 9.8± 6 .0 ) ng/g,均明显高于对照组 (1 90± 36 ) ng/L和 (8.7± 1 .7) ng/g,P均 <0 .0 0 1 ;而依那普利可以明显降低血浆和肾组织 Ang 水平 (P均 <0 .0 5 )。 Cs A处理后出现明显的肾间质纤维化 ,依那普利能明显减轻肾间质纤维化 ,盐酸维拉帕米对肾间质纤维化无显著改善。结论 :RAS的激活在 Cs A肾间质纤维化过程中起重要作用 ,阻断 RAS可以明显减轻 Cs A引起的肾间质纤维化。
参考文献：
[1]. 肾素血管紧张素系统的活化在环孢霉素A肾病中的作用[D]. 张国华. 第一军医大学. 2000
[2]. 肾素血管紧张素系统激活在环孢霉素A肾病中的作用[J]. 张国华, 张训, 侯凡凡, 王力. 中国危重病急救医学. 2003