一、山羊心脏中心纤维体内的骨髓组织（论文文献综述）
吕建芳[1]（2021）在《肾精亏虚对SD雄性大鼠骨髓造血功能的影响及其机制研究》文中认为目的建立SD雄性大鼠肾精亏虚模型,以骨髓造血干细胞为切入点,观察其凋亡情况,研究肾精亏虚对骨髓造血功能的影响,探讨其作用机制。观察龟鹿二仙胶对肾精亏虚骨髓抑制性贫血大鼠的治疗效果,通过其对大鼠的血象、骨髓象以及骨髓造血干细胞凋亡的影响,分析其“从肾论治”治疗肾精亏虚引起的骨髓抑制性贫血的作用机制。方法1、理论研究:系统回顾古今文献,阐述肾精、髓、血的中医理论研究及现代医学研究,立足肾精、髓以及血之间的关系,为肾精亏虚导致贫血提供中医理论依据。剖析龟鹿二仙胶的组方以及总结补肾填精法的现代医学临床应用。2、动物实验:SD雄性大鼠30只,SPF级,8周龄,体重270±20g,随机分为空白组、模型组、补肾组,每组10只。采用模拟地震振动、光电刺激复合应激恐吓以及长期小剂量苯皮下注射和短期大剂量环磷酰胺腹腔注射,建立肾精亏虚大鼠模型。整个造模过程用时49天。前4周模型组和补肾组大鼠按体质量皮下隔天注射苯（lm L/kg）,第25d开始用环磷酰胺（25mg/kg）腹腔注射,连续注射3d,同时每天用仿地震平台模拟地震振动（2次/日,共15-20分钟）以及光电刺激箱足底电击刺激（每日不定时1-3次）。空白组正常喂养。在第4周最后一天随机抽取模型组和补肾组各1只大鼠查外周血象及血清睾酮,检测模型是否成功。第29天开始,补肾组用龟鹿二仙胶灌胃,根据大鼠与人体表面积折算剂量比值,灌胃剂量为11g/Kg,分两次灌胃。给药期间每隔一天称重,根据体重调整给药剂量,连续21天。模型组和空白组大鼠给予等量去离子水灌胃,连续21天。造模过程中,每天观察各组大鼠的皮毛、进食量、活动状态等一般情况。造模结束后,每组大鼠通过眼内眦静脉取血法测外周静脉血红细胞（RBC）和血红蛋白（HGB）,观察其贫血程度;采用ELISA检测血清睾酮T以及用精子分析仪检测附睾精子质量,评价其生殖功能;取睾丸组织包埋切片,HE染色,观察其形态学的改变;分离胫骨,取新鲜骨髓,用PBS制备单细胞悬液,采用血红细胞计数板计数单核细胞数;取新鲜骨髓,制成骨髓涂片,瑞氏-吉姆萨染色,观察骨髓细胞的形态学改变;股骨包埋、切片,HE染色,观察骨髓增生情况;取新鲜骨髓包埋超薄切片,观察其超微病理改变。采用ELISA法检测各组EPO的含量;用流式细胞仪以及TUNEL法检测各组大鼠骨髓组织CD34+细胞凋亡情况;采用WB法检测各组大鼠骨髓Bcl-2、Bax、caspase-3、Fas和Fasl蛋白含量;采用RT-PCR法检测各组大鼠骨髓Bcl-2、Bax、caspase-3、Fas和Faslm RNA的表达水平。3、统计学处理:各组组间进行比较,所得数据均以均数±标准差（sx?）表示,采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,单因素方差分析组间比较,采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。结果（1）与正常组相比,模型组大鼠出现毛发干枯、耸立不齐、进食量下降,活动度减少等现象。补肾组大鼠毛发恢复光泽、进食量增加、活动度增加,肾虚症状得到改善。（2）与空白组比较,模型组血红细胞（RBC）数量、血红蛋白（HGB）含量从14d开始下降,有显着性差异（p<0.01）;与模型组比较,补肾组血红细胞（RBC）数量、血红蛋白（HGB）含量从42d开始升高,有显着性差异（p<0.05）。（3）与空白组比较,模型组血清EPO含量下降,有显着性差异（P<0.01）;与模型组比较,补肾组血清EPO含量升高,有显着性差异（P<0.01）。（4）睾丸病理切片显示,空白组睾丸曲细精管被膜完整,支持细胞形态正常,曲细精管管腔内可见大量精子;模型组曲细精管生精上皮明显变薄,细胞层次杂乱,支持细胞形态断裂,曲细精管管腔内精子细胞、精子数量明显减少;补肾组曲细精管被膜完整,细胞排布紧密,生精细胞数略有减少,部分区域可见脱落的少量生精细胞,但结构清楚,层次较分明,管腔内有较多精子。（5）与空白组比较,模型组附睾精子浓度及精子活力均下降（P<0.05）;模型组血清T含量明显下降（P<0.01）;与模型组比较,补肾组附睾精子浓度及精子活力均明显升高（P<0.01）,补肾组血清T含量升高,有显着性差异（P<0.01）。（6）骨髓象显示,与空白组比较,模型组骨髓有核细胞数量减少（P<0.05）;与模型组比较补肾组骨髓有核细胞数量增加,有显着性差异（P<0.05）。骨髓涂片可见空白组骨髓造血结构完整,组织丰富;模型组骨髓增生降低,巨核细胞减少;补肾组造血网织红细胞虽增加,但仍没有恢复正常水平。骨髓病理切片显示:空白组造血细胞多且分布均匀,骨髓造血组织支架结构紧密,脂肪细胞数量少;模型组造血组织面积减少,巨核细胞少见,造血细胞数目减少,内皮细胞、脂肪细胞等非造血细胞数目增多;补肾组造血结构组织基本修复,巨核细胞增多,造血细胞增加,仍可见脂肪细胞等非造血细胞。（7）骨髓超微病理形态学检测示:空白组大鼠可见造血干细胞为圆形,单核,核大,细胞质少,可见线粒体,线粒体内膜折叠成较深的嵴。模型组大鼠造血干细胞可见线粒体数量减少,嵴变浅或消失,线粒体肿胀,可见凋亡小体。补肾组大鼠造血干细胞有核细胞增多,凋亡小体少见,线粒体的数量增多,线粒体嵴有所恢复。（8）与空白组比较,骨髓石蜡包埋切片TUNEL法检测发现模型组可见较多凋亡CD34+细胞的绿色荧光点,流式细胞仪检测骨髓CD34+细胞凋亡的数量明显增加（P<0.05）;与模型组比较,补肾组石蜡包埋切片TUNE L法检测骨髓组织绿色荧光点数量减少,流式细胞仪检测CD34+细胞凋亡的数量降低（P<0.05）。（9）WB检测大鼠胫骨骨髓新鲜组织中Bcl-2、Bax、caspase-3、Fas和Fasl蛋白表达结果与空白组比较,模型组Bcl-2蛋白含量表达降低（P<0.05）,Bax、caspase-3、Fas和Fasl蛋白含量表达均升高（P<0.05）。与模型组比较,补肾组Bcl-2蛋白含量表达升高（P<0.05）,Bax、caspase-3、Fa s和Fasl蛋白含量表达均减少（P<0.05）。（10）RT-PCR检测大鼠胫骨骨髓新鲜组织Bcl-2、Bax、caspase-3、Fa s和Faslm RNA含量与空白组比较,模型组Bcl-2m RNA含量降低（P<0.05）,Baxm RNA、caspase-3m RNA、Fasm RNA和Faslm RNA含量均升高（P<0.05）。与模型组比较,补肾组Bcl-2m RNA蛋白含量升高（P<0.05）,Baxm RNA、caspa se-3m RNA、Fasm RNA和Faslm RNA含量均减少（P<0.05）。结论“肾藏精,生髓,化血”,肾藏先天之精,肾气促脾胃化生水谷精微而藏之,而“精血同源”,肾精是化生血液的重要物质基础。肾精亏虚则血液化生无源而导致血虚。肾主人体发育,也主骨髓生长发育,肾精充足,则骨髓充盈,反之肾精不足,骨髓空虚。骨髓具有化生血液的作用,髓化生血液主要取决于肾的功能,肾精亏虚则会导致骨髓功能低下,化生血液出现障碍而致血虚。本课题基于中医“肾藏精、精生髓,髓生血,精化血”理论,以肾精亏虚则会导致血虚为实验的病理依据,以造血干细胞作为切入点。研究肾精亏虚对造血功能的影响及其作用机制。以“恐伤肾”传统病因造模结合药物干预病理造模,采用模拟地震平台复合光电刺激法结合长期小剂量的苯和短期大剂量的环磷酰胺药物干预,建立肾精亏虚大鼠模型。大鼠出现肾虚症状,血液检查可以看到血红细胞数量和血红蛋白含量降低,血清EPO含量下降,血清睾酮含量降低。骨髓象可以见到骨髓有核细胞数量减少,骨髓造血组织结构疏松、造血面积减少、造血细胞减少。超微病理形态学可以观察到骨髓造血干细胞线粒体肿胀,线粒体嵴变浅,出现凋亡小体的超微病理改变。龟鹿二仙胶灌胃治疗后,能够改善肾精亏虚的症状,促进血红细胞数量和血红蛋白含量增高,血清EPO含量升高,血清睾酮含量增加,骨髓有核细胞数量增加,骨髓造血组织得到修复。骨髓造血干细胞线粒体数量增加,凋亡小体减少,减少骨髓CD34+细胞的凋亡。本实验结论归纳如下:（1）利用“仿地震平台及光电刺激+苯+环磷酰胺”成功建立肾精亏虚雄性大鼠模型。（2）肾精亏虚大鼠血清EPO含量下降,骨髓组织抑凋亡蛋白Bcl-2蛋白、Bcl-2m RNA含量下降,促凋亡蛋白Bax蛋白及Baxm RNA表达增加,激活了线粒体/细胞色素c通路,发生级联效应,激活Caspase-3蛋白,诱导骨髓CD34+细胞的凋亡。骨髓Fas和Fasl蛋白及Fas和Faslm RNA含量升高,激活了死亡受体途径,激活Caspase-3蛋白,诱导CD34+细胞细胞的凋亡。CD34+细胞过度凋亡,骨髓造血干细胞活性降低,可能是肾精亏虚导致骨髓抑制影响骨髓造血功能的机制之一。（3）首次采用龟鹿二仙胶治疗肾精亏虚,改善骨髓造血功能。龟鹿二仙胶能有效缓解肾精亏虚大鼠的症状,治疗骨髓抑制性贫血有效。提高血清EPO含量,促进抑凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达,抑制促凋亡蛋白Bax蛋白、Fas和Fasl蛋白的表达,减少Caspase-3蛋白的表达,抑制CD34+细胞的凋亡,从而保护造血干细胞。刺激骨髓造血干细胞的增殖,避免其发生过度凋亡,可能是龟鹿二仙胶发挥其疗效机制之一。（4）从生成来源和生物学功能来看,EPO可能是肾精的物质基础之一。（5）造血干细胞是肾精在细胞层次的表现形式,是“肾精化血”功能的执行者。
陈睿[2]（2021）在《低氧预处理增强间充质干细胞对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制研究》文中研究说明[目 的]1.分离、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞（bonemarrow-derivedmesenchymalstem cell,BMMSC）,比较常氧培养BMMSC（n-BMMSC）、低氧预处理BMMSC（hypoxia-precondition BMMSC,hp-BMMSC）增殖活力、归巢到损伤肝脏能力的差异。2.比较 n-BMMSC、hp-BMMSC、雷帕霉素干预的 hp-BMMSC（rapa-hp-BMMSC）对肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemiareperfusioninjury,HIRI）模型大鼠肝脏保护效应的差异及随时间的变化。3.研究不同处理的BMMSC减轻HIRI效应差异的分子机制,为增强BMMSC对HIRI的疗效和提高BMMSC治疗效率提供机制参考。[方法]1.分离培养SD大鼠BMMSC,诱导成骨、成脂肪、成软骨分化后染色,结合流式细胞术检测其表面的间充质干细胞标志分子以鉴定BMMSC。2.1%O2、5%CO2、94%N2培养 24h 建立 hp-BMMSC 模型,用 CCK-8 试剂盒检测 21%O2 培养的 n-BMMSC、hp-BMMSC、rapa-hp-BMMSC 的增殖活力,明确hp-BMMSC的增殖活力能否被rapa干预抑制。3.用荧光染料CM-Dil标记n-BMMSC、hp-BMMSC后经门静脉输注给HIRI模型大鼠,再灌注12 h后取材观察以比较两者归巢到损伤肝脏的差异。4.阻断大鼠70%肝脏血供45 min构建HIRI模型,再灌注开始后经门静脉分别输注n-BMMSC、hp-BMMSC、rapa-hp-BMMSC悬液或等量新鲜细胞培养基,12 h、24 h、48 h后检测血清转氨酶、SOD、MDA水平,评估肝脏病理损伤,Western Blotting法检测IL-6、IL-1β、TNF-α的表达以比较不同细胞治疗对HIRI保护效果的差异。5.用 RT-qPCR 和 Western Blotting 检测不同 BMMSC 中mTOR、HIF-1α的mRNA和蛋白表达以研究hp增强BMMSC对HIRI保护效应的分子机制。[结果]1.大鼠BMMSC经诱导成骨、成脂、成软骨分化并染色证实,具有诱导多向分化的潜能;流式细胞术检测BMMSC的MSC标志分子阳性率达到鉴定MSC的标准。因此,本实验成功地分离并鉴定了大鼠BMMSC。2.1%O2培养24 h是最佳的hp-BMMSC方案,其增殖活力较n-BMMSC显着提高。3.相同剂量下,hp-BMMSC归巢到HIRI肝脏的阳性率较n-BMMSC显着升高,这表明hp后BMMSC的迁移、归巢到损伤肝脏的能力增强。4.n-BMMSC降低了肝脏转氨酶,降低肝组织MDA并升高SOD活性,抑制了炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达,这一效应在再灌注前12h最明显。相比n-BMMSC,hp-BMMSC进一步增强了上述肝脏保护效应,但rapa-hp-BMMSC的肝脏保护作用较n-BMMSC无明显变化。5.hp-BMMSC中的mTOR、HIF1α的mRNA和蛋白表达均显着上调,而rapa干预后以上mTOR、HIF-1α的表达上调被明显抑制,提示hp-BMMSC增强对HIRI的保护效应可能受mTOR-HIF-1α轴调控。[结论]1.机械分离、选择性贴壁培养结合诱导分化染色和流式细胞术鉴定可以获得批量大鼠BMMSC,为后续实验提供了稳定的细胞来源。2.hp是提高BMMSC增殖活力,增强其归巢能力的有效方法。相较常氧培养,hp增强了 BMMSC在HIRI中抑制炎症因子介导的损伤、促进肝功能恢复肝脏保护的效应。3.再灌注前12 h是HIRI中肝脏免疫应答最活跃、炎症性损伤最重的阶段。无论n-BMMSC还是hp-BMMSC,对肝脏的保护效应在这一时段内最明显。4.hp-BMMSC可能通过mTOR-HIF-1α信号轴调控其对低氧微环境的适应,从而维持干细胞特性并增强对HIRI的保护作用。
闫欢欢[3]（2020）在《贻贝仿生导电性苯胺齐聚物生物材料的制备及在组织工程中的应用》文中认为随着生物医用高分子材料的发展,导电高分子以其独特的物理和化学性质在生物医学领域被广泛研究和应用探索。导电高分子,如聚苯胺、聚噻吩等在提供导电性的同时,本身表现出良好的氧化还原活性即电活性,能够诱导细胞生长和分化。但这些导电聚合物用于组织工程时,不可降解性、不可吸收性和加工性差等成为限制它们应用的主要因素,因此多种类型的可降解导电性和电活性高分子被设计和合成。苯胺齐聚物（如苯胺三聚体、四聚体等低聚体）具有规整的分子结构、可逆的氧化还原性和较好的生物相容性,且可在生理环境中通过肾脏清除并排出体外。因此,开发基于苯胺齐聚物的可降解功能支架材料用于组织工程修复具有重要的意义。外加电刺激被报道可以有效的调控细胞行为和促进组织再生,而包含苯胺齐聚物的导电生物材料可以实现局部定位电刺激,提高电刺激效率,从而更好的调控细胞粘附、迁移、增殖和分化。然而,简单有效地合成出生物相容、成型方便的导电性和电活性聚合物依然是组织工程中的难点和挑战,有待进一步设计和挖掘。因此,我们设计并合成了一系列新颖的导电性和电活性聚合物,进一步通过静电纺丝和静电滴球技术等分别制备了图案化导电性纳米纤维毡和电活性微球等不同应用形式的材料,然后通过体内和体外实验,系统地评价了它们潜在的生物医用前景,全文主要包括以下四部分的内容。（1）我们以苯胺四聚体、多巴胺和聚乙二醇为原料,通过自由基加成反应合成了具有粘附性的导电无规共聚物poly（ATMA-co-DOPAMA-co-PEGMA）（PAT）。该材料不仅保持一定的导电性和电活性,还具有良好的亲水性和血液相容性,结合电刺激具有协同提高MC3T3-E1细胞增殖、碱性磷酸酶活性、细胞外基质钙沉积和成骨基因表达的特性。贻贝来源多巴胺分子的引入赋予材料良好的粘附性和生物相容性,使其应用形式更灵活、更广泛。（2）在高碘酸钠作用下,将上述电活性共聚物（PAT）通过其多巴胺段的氧化还原反应修饰于可降解PLGA/HA微球上,制备出电活性微球（PAT@HA/PLGA）。进一步地将含YKYKY的胰岛素样生长因子（IGF-1）在酪氨酸酶作用下转变为DOPA-IGF-1并固定于微球表面,制备出具有电活性和生物活性的可降解微球。体外细胞培养表明,所制备的微球具有良好的生物相容性,显着提高成骨细胞增殖效率和分化的特性。将不同功能性微球注射到5 mm尺寸的大鼠颅骨临界缺损处,植入8周后的修复结果表明,电活性和生物活性微球可显着促进缺损处新骨的生成和骨愈合效果。（3）将PAT共聚物和聚己内酯（PCL）复合,通过静电纺丝方法制备出生物降解的图案化导电性纳米纤维毡,利用PAT内的DOPA分子将神经生长因子（NGF）修饰于纤维表面,进而应用于神经组织工程。获得的导电纤维毡具有连续交替的谷和脊图案化结构。在电刺激下,具有特定形貌的的导电性纤维毡固定有NGF后,对神经干细胞（NSCs）的增殖和分化具有正向协同作用,促进NSCs向神经元方向分化,并抑制向星形胶质细胞方向的分化,表明有利于神经的再生与修复。（4）将苯胺三聚体和PCL通过逐步加成反应合成了导电聚合物（PCL-IPDI-AT）,以高温溶剂蒸发法制备了形状记忆性的导电弹性体薄膜,并初步探索了其体外生物相容性和应用性。该共聚物薄膜具有尺寸均一的多孔结构、优异的可拉伸性和形状记忆性。这种具有导电性、一定粗糙度和多孔结构的导电弹性体材料在电刺激下促进了成骨细胞的生长和成骨分化。综上所述,我们制备的多种应用形式的导电性和电活性功能支架材料不仅加快细胞间电信号的传导,而且在外加电刺激的作用下可调控植入材料表面的细胞行为,进而有效的促进了细胞的功能性分化以及体内缺损组织的修复和再生。
彭仁军[4]（2020）在《二甲基亚砜对急性放射病多组织器官损伤的防护作用及其机制研究》文中研究表明近年来,核及其相关技术在医疗、能源、工业、军事等领域应用日益广泛,与此同时,急性放射损伤的风险也日益增加,一旦发生核袭击或大型核事故,大量的平民和应急救援人员需要放射防护,寻找安全有效、方便给药、预防时间窗长的广谱类抗放药物一直是国家安全和医疗救护的迫切需求。短时间内机体受照剂量超过1Gy而引起的全身性疾病被称为急性放射病（Acute radiation syndrome,ARS）。根据受照剂量和主要发病症状,ARS分为骨髓型急性放射病（Hematopoietic acute radiation syndrome,H-ARS）、肠型急性放射病（Gastrointestinal acute radiation syndrome,GI-ARS）和脑型急性放射病。骨髓造血组织是对射线最敏感的组织之一,H-ARS发病时大量的造血干祖细胞（Hematopoietic progenitors and stem cells,HPSC）死亡,引发外周全血细胞减少,患者可能死于继发的感染和出血。目前用于治疗H-ARS的抗放药物十分有限,没有用于预防H-ARS的获批上市的药品。GI-ARS发病时机体受照剂量更大,小肠隐窝细胞大量死亡,肠道上皮黏膜屏障破坏,患者多因继发脱水、电解质紊乱和败血症等在两周内死亡,由于没有特效防治药物,目前没有治愈的先例。ARS病人常常包含多组织器官的放射损伤（Radiation-induced multiple tissue and organ injuries,RI-MTOI）,除骨髓和胃肠外,机体其他器官如皮肤、口腔黏膜、肺脏、肾脏等对射线也非常敏感,表现为急性放射损伤或急性放射病的迟发效应（Delayed effects of acute radiation exposure,DEARE）。RI-MTOI可加重为多器官功能障碍（Radiation-induced multiple organ dysfunction syndrome,RI-MODS）,这是目前治疗的难点。不幸的是,针对RI-MTOI的防治措施鲜有报道。电离辐射及其电离水分子生成的自由基均可破坏蛋白质、脂质、DNA等生物大分子的结构,改变细胞的代谢和功能,诱导细胞损伤或死亡。自由基介导的损伤被认为是电离辐射损伤的主要方式,DNA损伤是介导细胞损伤或死亡最重要的原因之一。氨基硫醇类化合物WR2721（Amifostine）是一种研究最为深入的自由基清除剂,多种照射动物模型中都证明,WR2721几乎可以防护所有正常组织的放射损伤,但同时WR2721存在毒副作用明显、照前给药有效时间短（15-30min）,口服给药无效等缺点,目前仅批准用于减轻临床上肿瘤放化疗引起的正常细胞损伤,不能作为抗放药应用于核紧急事件。二甲基亚砜（Dimethyl sulfoxide,DMSO）也是一种含硫酰基团的自由基清除剂,文献报道DMSO有多种生物活性,包括止痛、镇静、利尿、抑菌等,1978年FDA批准DMSO用于治疗间质性膀胱炎。1962年Ashwood Smith首先报道DMSO腹腔给药可提高致死剂量照射后小鼠的存活率,实验室前期研究也证明DMSO可以预防放射引起的口腔黏膜炎。DMSO口服吸收迅速,在体内很少被代谢分解,包括灵长类在内的多种动物实验证明DMSO口服给药毒性非常低,由此我们推测DMSO口服可能也有抗放作用。本研究系统评价了DMSO口服给药对急性放射病造血和胃肠组织损伤的防护作用,观察了大剂量照射后长期存活小鼠多种组织器官的损伤特点及DMSO对RI-MTOI潜在的防护作用。成体干细胞（Adult stem cells,ASC）在骨髓和胃肠照后组织重建中起核心作用,所以减轻射线对ASC的损伤,减少照后ASC的死亡,促进照后ASC重建组织是防治H-ARS和GI-ARS的关键策略。电离辐射引起的造血干细胞（Hematopoietic stem cell,HSC）的凋亡是干细胞死亡的主要方式,敲除小鼠的p53或PUMA基因后可以抑制HSC凋亡,提高放射耐受性,说明p53-PUMA是介导细胞凋亡的重要信号通路。放射还会引起HSC长期损伤,表现为自我更新能力和重建造血能力的减弱。DMSO能否抑制照后HSC凋亡,保护HSC功能,减轻放射所致的短期和长期造血抑制,还有待阐明。正常造血组织的放射损伤在放疗时更为常见,放射防护剂若不能区分造血干细胞与白血病干细胞将影响白血病放疗的疗效,因此DMSO对白血病细胞有无放射防护作用,值得深入研究。小肠干细胞（Intestinal stem cell,ISC）位于隐窝底部,证据表明Lgr5可作为ISC的表面标记物,且Lgr5干细胞在肠上皮放射损伤后的重建中必不可少。高能射线可造成ISC多种类型的DNA损伤,其中以DNA双键断裂（Double strand breaks,DSBs）最为严重,一般认为DMSO通过清除自由基减少DSBs来发挥抗放作用,近年来又有报道低浓度DMSO不能减轻体外照射细胞的DNA损伤,但能促进DNA损伤修复。实验室在前期也发现DMSO可以促进照后小鼠舌上皮干细胞DNA损伤修复,DMSO对ISC是否也有类似的作用,还有待研究。隐窝细胞的凋亡在GI-ARS发病过程中的作用一直存在争议。一方面敲除促凋亡基因PUMA后可抑制照后隐窝细胞凋亡,促进隐窝再生;另一方面,敲除p53可以抑制照后隐窝细胞凋亡,但不能抑制细胞的增殖性死亡（Mitotic death）,结果反而加重了GI-ARS的病情。DMSO能否通过抑制凋亡保护ISC,还不清楚。因此,为探讨DMSO对H-ARS和GI-ARS的防护效应及其机制,本研究首先使用全身照射小鼠构建H-ARS和GI-ARS模型,明确DMSO对H-ARS和GI-ARS的防护效应;然后以γ射线损伤后的骨髓或小肠为主要研究对象,采用流式细胞术、体外细胞集落培养实验、体内竞争移植实验分析HSC的数量和功能,运用Caspase3/7流式检测、p53-/-和PUMA-/-小鼠分析DMSO对HSC凋亡的影响,探究DMSO对H-ARS的防护机制;随后,采用Brd U免疫组化分析隐窝细胞增殖,Tunel、Cleaved Caspase 3免疫组化分析隐窝细胞凋亡,γ-H2AX、53BP1免疫组化分析隐窝细胞DNA损伤和修复,震荡切片技术直接观察隐窝内Lgr5ISC,探究DMSO对GI-ARS的防护机制;此外,我们还通过观察大剂量照射后长期存活小鼠,评价DMSO对多器官DEARE的影响;构建了Mll-AF9细胞诱导的急性髓系白血病小鼠模型,评价DMSO对白血病细胞的放射防护作用。通过以上研究,取得的结果和结论如下:1,DMSO单次口服给药可以促进照后骨髓有核细胞和外周血象恢复,提高致死剂量（9.0Gy）和超致死剂量（9.5Gy）照后C57小鼠存活率至100%,剂量修正系数（Dose modifying factor,DMF）为1.24（95%置信区间,1.22-1.26）,有效给药时间为照前4h到15min。DMSO不但能防护HPSC的急性放射损伤,还能提高照后远期HSC重建造血能力,减轻放射所致的长期骨髓造血抑制。此外,DMSO按最佳防护效应的给药剂量（10g/kg）连续口服两个月,小鼠的生长速度,外周血象,多脏器生理功能未见明显异常,提示DMSO单次口服给药的安全性很高;2,研究DMSO防护H-ARS时发现,DMSO不能减少照后Caspase3/7+LKS细胞数量,对p53-/-和PUMA-/-来源的HPSC仍有放射防护作用;研究DMSO防护GI-ARS时发现,在DMSO的有效防护照射剂量范围内（8-22Gy）,DMSO不能减少照后隐窝不同位置细胞的凋亡,也不能减少绒毛基质层细胞的凋亡,可以促进照后p53-/-和PUMA-/小肠隐窝再生-,以上结果说明,DMSO对HSC和ISC的放射防护作用均不依赖于抑制凋亡;3,DMSO体内给药或体外给药均能提高照后小鼠骨髓造血细胞的集落形成能力和竞争移植能力,说明DMSO可以直接作用于HSC,减轻HSC的放射损伤。DMSO不能抑制体外照射后Mll-AF9白血病细胞的凋亡、集落形成能力及体内扩增能力,但能延长小鼠白血病模型放疗后的存活时间,提示DMSO对白血病干细胞没有放射防护作用。除小鼠外,DMSO对体外照射的人脐带造血干祖细胞也有保护作用;4,DMSO单次口服给药可以提高大剂量全身照射后C57小鼠小肠再生隐窝数量,延长GI-ARS小鼠存活时间,联合骨髓移植后对≤19Gy照后C57小鼠防护率为100%,最大防护剂量达22Gy（40%存活）,可将照射剂量-存活曲线平移7Gy,DMF值为1.48（95%置信区间,1.46-1.50）。DMSO照前12h给药即能显着增加16Gy照后小肠再生隐窝数量,照前6h给药联合照后骨髓移植小鼠存活率为70%,提示DMSO有效给药时间不少于照前6h。与阳性对照药WR2721相比,DMSO防护GI-ARS的有效给药时间更长,有效防护照射剂量更大;5,γH2AX和53BP1免疫组化结果发现,DMSO不能减轻照后早期隐窝细胞DNA损伤,但能促进DNA损伤修复;Brd U免疫组化提示,DMSO对15Gy照后6-12h放射引起的隐窝细胞周期阻滞没有影响,但能促进照后24h更多细胞重新进入S期;震荡切片直接观察显示,DMSO可以减少照后早期Lgr5干细胞死亡,促进Lgr5干细胞恢复;谱系追踪结果进一步证明DMSO可以促进Lgr5干细胞增殖分化为小肠绒毛。以上结果说明,DMSO通过促进照后ISC DNA损伤修复而减少ISC死亡,进一步促进ISC重建小肠绒毛;6,对经DMSO防护后的17-22Gy全身照射后存活的小鼠的观察,发现DMSO可以延长小鼠总生存时间至200-500天,减轻照后肺脏、肾脏、肝脏、心脏的迟发性放射损伤,多脏器生理功能未见明显异常,提示DMSO对放射所致的多组织器官损伤有一定的防护作用。总之,本研究首次报道了口服DMSO对H-ARS和GI-ARS的防护作用;特别地,DMSO对GI-ARS的防护作用超过了所有目前已报道的放射防护剂。DMSO具备安全低毒,口服预防给药效果突出,较广的有效给药时间窗口,能保护多组织器官放射损伤等特点,可作为一种理想的放射防护剂候选药物,预防给药应用于核突发事件和核医学治疗时的人体防护。机制上,我们发现DMSO可以减轻照后成体干细胞损伤,促进干细胞重建组织,其防护作用不依赖于凋亡,这可能是DMSO发挥放射防护作用的共同机制。我们的研究为机体多组织器官放射损伤共性发病机制与防护研究提供了新的认识。
朱明明[5]（2020）在《高原低氧大鼠骨髓微血管增生及基膜降解的分子机制研究》文中进行了进一步梳理高原是一种特殊的自然环境,其典型特点是低压、低氧。多年生活在高海拔地区缺氧环境下,容易引起红细胞过度增多和低氧血症,其严重影响着高原人群的健康。由于机体长期在高海拔、低氧状态下,红细胞过度积累,引起血液黏滞度增加,血流减慢,机体发生微血管增生以改善血液循环,以代偿供氧,其发生机制尚未阐明。在肿瘤性疾病局部缺氧条件下,IL-6/JAK2/STAT3参与调控其微血管生成以促进肿瘤的转移及进展。机体在低氧条件下,IL-6分泌增加,进而加强调控下游靶基因JAK2/STAT3的P-JAK2、P-STAT3的表达,从而激活其靶基因MMP-9的表达。在一系列缺血缺氧性疾病中,MMP-9的高表达促进其微血管的再生及基膜降解。然而,JAK2/STAT3通路和MMP-9是微血管生成及基膜降解过程中极为重要的因子,有关JAK2/STAT3和MMP-9在肿瘤微血管生成中的变化得到广泛的研究。然而,在长期低氧下,IL-6/JAK2/STAT3/MMP-9通路在骨髓中变化如何,是否参与微血管增生及基膜降解,目前还不清楚。血管基膜是一种复杂的致密网状结构,其组成成分包括:层黏连蛋白,IV型胶原蛋白及纤维连接蛋白等。MMP-9主要的生物学功能是降解IV型胶原纤维。在低氧条件下,MMP-9的高表达,会导致机体血管基膜发生降解。其中,COL4A1作为极为重要的IV型胶原纤维,与MMP-9在基膜降解过程中的变化如何,目前还不清楚。第一部分慢性低氧下,大鼠骨髓微血管变化与IL-6/JAK2/STAT3/MMP-9通路的相关研究目的骨髓系成人造血的主要部位,骨髓微血管是其微环境的主要结构基础。JA K2/STAT3和MMP-9参与促进微血管生成的病理生理过程,然而JAK2/STAT3对MMP-9的调控作用还需要进一步验证,目前还尚未见到IL-6/JAK2/STAT3/M MP-9通路是否调控低氧引起的微血管增生及基膜降解的研究。本研究通过测定外周血中RBC、HB、HCT,血清中IL-6的水平以及骨髓中P-JAK2蛋白、P-ST AT3蛋白及MMP-9 m RNA和蛋白水平,同时检测微血管密度及基膜降解情况,并与对照组进行比较分析,在应用STAT3抑制剂后,进一步测定以上指标,进一步验证,寻找它们之间的关系。试图探讨IL-6/JAK2/STAT3/MMP-9通路在骨髓微血管增生及基膜降解的机制中的作用。方法建立大鼠动物模型,以雄性SD大鼠分为对照组（Control）、低氧组（CH group）、低氧加抑制剂组（CH+Inhibitor group,抑制剂SH-4-54采用灌胃给药30天,7.5 mg/kg/d）[29]、低氧加溶剂对照组（CH+Solvent group,溶剂为0.9%生理盐水+1.3%的DMSO）,每组各30例为研究对象,其中低氧模型制备均在高原医学研究中心低压氧舱内进行,模拟海拔5000 m,24h/d,连续30d。30 d后,检测大鼠血常规。Elisa法测定各组大鼠血清中IL-6的水平,采用实时荧光定量RT-PCR法检测各组大鼠骨髓中MMP-9 m RNA的表达水平,运用Western blot法分析各组大鼠骨髓中MMP-9蛋白含量,运用免疫共聚焦显微镜观察各组大鼠骨髓中MMP-9的表达及微血管增生及基膜降解情况,即用免疫荧光MMP-9标记血管内皮细胞后,通过共聚焦显微镜观察各组组织中MMP-9阳性微血管密度计数以及通过电子显微镜观察血管基底膜的降解情况,运用STAT3抑制剂SH-4-54阻断该通路后再次检测以上指标进行功能验证,进行组间检测指标的对比分析。结果（1）在经过低氧30天处理组中,大鼠血常规（RBC、HB、HCT）指标均高于常氧对照组（P<0.050）;（2）在低氧组、低氧加抑制剂组、低氧加溶剂对照组中,大鼠骨髓微血管密度（MVD）均高于常氧对照组,且血管基膜发生明显降解（P<0.05）。（3）与常氧对照组相比,在低氧组、低氧加抑制剂组、低氧加溶剂对照组中,大鼠血清中IL-6水平明显高于常氧对照组（P<0.05）,骨髓中P-JAK2、P-STAT3及MMP-9的蛋白含量均高于常氧对照组（P<0.05）,MMP-9的m RNA水平明显增高（P<0.05）。（4）在低氧组、低氧加抑制剂组、低氧加溶剂对照组中,大鼠骨髓微血管密度（MVD）及基膜降解情况与该组MMP-9蛋白和m RNA的表达水平一致。（5）应用STAT3抑制剂后,在低氧加抑制剂组,与低氧组比较,大鼠骨髓的P-STAT3蛋白及MMP-9蛋白和m RNA的表达水平明显降低（P<0.05）。（6）在低氧加抑制剂组中,与低氧组相比,大鼠骨髓微血管密度（MVD）减少及基膜降解减轻（P<0.05）。（7）在低氧加抑制剂组,大鼠骨髓的P-JAK2蛋白含量明显低于低氧组（P<0.05）。（8）在低氧加抑制剂组,大鼠血清中IL-6水平及血常规（RBC、HB、HCT）指标均低于低氧组（P<0.05）。（9）与低氧加溶剂对照组相比,低氧组中大鼠骨髓中P-JAK2、P-STAT3及MMP-9的蛋白含量及MMP-9 m RNA的表达水平没有明显差异（P>0.05）。（10）与低氧加溶剂对照组相比,低氧组中大鼠血清中IL-6的含量和血常规（RBC、HB、HCT）指标没有明显差异（P>0.05）。结论1.慢性低氧下,大鼠骨髓微血管增生及基膜降解,此外,骨髓中IL-6、P-JAK2、P-STAT3及MMP-9表达升高。2.应用STAT3抑制剂后,P-STAT3和MMP-9表达降低。3.慢性低氧下,大鼠骨髓微血管生成及基膜降解与IL-6/JAK2/STAT3/MMP-9通路有关。第二部分不同时间低氧暴露下大鼠骨髓血管基膜变化与MMP-9和COL4A1相关研究目的缺氧会造成机体多系统多脏器损伤,其中不同程度的血管基膜损伤尤为常见。基膜的重要组成部分包括IV型胶原纤维,其中COL4A1是重要成员之一。MMP-9在低氧条件下表达增高,其发挥主要生物学功能,降解IV型胶原纤维。我们前期研究发现,低氧损伤血管基膜,其机制目前尚不清楚。本研究通过建立不同时间的低氧动物模型,了解大鼠骨髓中MMP-9在不同低氧条件下的表达及对血管基膜中COL4A1在骨髓中的影响及变化。方法建立大鼠动物模型,以雄性SD大鼠分为对照组（Control group）、低氧3-d组（3 days group）、低氧7-d组（7 days group）、低氧10-d组（10 days group）,每组各20例为研究对象,其中低氧模型制备均在高原医学研究中心低压氧舱内进行,模拟海拔7000m,24h/d,分别饲养3d、7d、10d后检测大鼠血常规。采用实时荧光定量RT-PCR法检测各组大鼠骨髓中MMP-9 m RNA的表达水平,运用Western blot法分析各组大鼠骨髓中MMP-9及COL4A1的蛋白含量,运用免疫组化特异性染色观察各组大鼠骨髓中COL4A1的表达,运用电子显微镜观察大鼠在不同时间急性缺氧条件下血管基膜的降解情况。结果（1）大鼠血常规（RBC、HB、HCT）指标表达水平随着缺氧时间延长,逐渐增高;低氧10天组血常规各指标高于低氧7天组（P<0.05）;低氧7天组血常规各指标高于低氧3天组（P<0.05）;低氧10天、低氧7天和低氧3天组血常规各指标均高于各自常氧对照组（P<0.05）。（2）低氧条件下,大鼠骨髓MMP-9 m RNA及蛋白表达水平,低氧10天组明显高于低氧7天组（P<0.05）;低氧7天组高于低氧3天组（P<0.05）;低氧10天、低氧7天和低氧3天组MMP-9表达均高于常氧对照组（P<0.05）。（3）大鼠骨髓中COL4A1蛋白含量随着低氧时间延长逐渐下降;低氧10天组明显低于低氧7天组（P<0.05）;低氧7天组低于低氧3天组（P<0.05）;低氧10天、低氧7天和低氧3天组均低于常氧对照组（P<0.05）。（4）大鼠骨髓中血管基膜降解情况随着低氧时间延长逐渐加重,低氧10天基膜降解重于低氧7天组（P<0.05）;低氧7天基膜降解重于低氧3天组（P<0.05）;低氧10天、低氧7天和低氧3天均发生基膜降解与常氧对照组相比（P<0.05）。（5）低氧条件下,大鼠骨髓中COL4A1的表达与基膜降解的严重程度一致MMP-9的水平增高与COL4A1的表达下降一致。结论1.低氧条件下,大鼠骨髓微血管基膜发生降解。2.不同时间低氧下,大鼠骨髓中MMP-9表达增多,COL4A1表达下降。3.在低氧条件下,大鼠骨髓血管基膜降解与MMP-9及COL4A1有关。
刘运华[6]（2020）在《滋肾益髓生血方对AA小鼠骨髓保护作用及T-bet/GATA-3影响的实验研究》文中认为再生障碍性贫血（AplasticAnemia,AA）是由遗传、物理、化学、生物以及各种不明原因引起的骨髓衰竭性疾病,AA患者红细胞、白细胞与血小板减少,可出现严重的贫血、出血和感染。AA的发生与免疫功能异常有密切关系,T淋巴细胞依据膜表面分子抗原的不同,分为主要介导细胞毒性免疫的CD8+T和调节免疫的CD4+T细胞两个亚群,CD4/CD8比例失衡与AA骨髓造血组织的免疫破坏密切相关。原始的CD4+T细胞又称为Th0细胞,Th1与Th2分别是由Th0通过STAT1和STAT6途径分化而来的,树突状细胞细胞分泌的IL-12等可以促进Th1细胞活化,并分泌介导第Ⅳ型免疫反应的Ⅰ型细胞因子,主要包括IFN-γ、IL-2、TNF-α等;激活的Th2细胞主要分泌Ⅱ型细胞因子,主要包括IL-10、IL-5、IL-4、和IL-13等,获得性AA的免疫发病机制与Th1细胞的极化和Th1/Th2失衡有关。GATA-3是可调控CD4+T细胞向Th2细胞分化的转录因子,它能特异性启动Th2细胞因子的表达;特异转录因子T-bet能够启动Th0细胞向Th1细胞极化过程,还能通过IFN-γ等诱导T细胞以及NK细胞启动T-bet转录因子的表达,阻断Th2细胞的极化。目前,临床主要采用免疫抑制剂环磷酰胺等来治疗,但存在副作用大等不利影响,而临床运用中医药往往能取得很好的疗效。滋肾益髓生血方是依据中医“肾藏精,精充髓,髓生血”理论组方的中药复方,我们前期动物实验发现滋肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导的AA大鼠的骨髓衰竭的改善情况较温肾益髓法和补肾益髓生血法更好。因此,本研究采用60Co-γ辐射联合免疫细胞注射构建AA小鼠模型,通过瑞士-吉姆萨染色、流式细胞术检测、HE染色、酶联免疫检测、免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法,研究滋肾益髓生血方对AA小鼠转录因子T-bet与GATA-3的影响,为中医“肾藏精,精生髓”的理论提供实验依据。目的:采用60Co-γ辐射联合免疫细胞注射构建AA小鼠模型,以康力龙作为对照药物,探讨滋肾益髓生血方对AA小鼠的药效学作用,流式细胞术检测AA小鼠T淋巴细胞CD3、CD4、CD8以及CD4/CD8的变化,瑞士-吉姆萨染色观察AA小鼠骨髓细胞形态变化,酶联免疫法研究AA小鼠血清中IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-5、IL-13、IL-4、IL-10等7种细胞因子的变化;免疫组织化学研究AA小鼠脾脏组织T-bet和GATA-3蛋白表达情况;Western Blot和RT-PCR检测AA小鼠骨髓T-bet与GATA-3蛋白及mRNA的表达。方法:1.药效学实验:55只清洁级雄性近交系BALB/c小鼠,随机分成正常组10只,剩余45只用60Co-γ照射5.5 Gy造模,辐射结束后,迅速经尾静脉完成DBA/2小鼠的活体免疫细胞混悬液注射,注射量为每只1×106个免疫细胞,诱导小鼠AA模型;存活的小鼠分为模型组、康力龙组与滋肾益髓生血组,每天给药并观察各组小鼠一般状态,每周称量记录体质量变化;在灌胃给药4周结束时,摘眼球取抗凝血,检测各组小鼠外周血中HGB、RBC、WBC、PLT变化,取小鼠股骨制备骨髓悬液,用血球计数板在倒置显微镜下观察计数小鼠骨髓有核细胞数;制备血涂片,用瑞士-吉姆萨染色法观察AA小鼠血细胞变化;制作骨髓涂片,用瑞士-吉姆萨染色观察AA小鼠骨髓细胞形态变化;制作AA小鼠脾脏组织切片,采用HE染色法观察其病理形态变化。2.流式细胞术:检测AA小鼠外周免疫细胞CD3、CD4、CD8以及CD4/CD8的变化。3.酶联免疫:检测 AA 小鼠血清中 IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-5、IL-13、IL-4、IL-10 细胞因子的变化。4.免疫组织化学:检测AA小鼠脾脏组织中T-bet、GATA-3蛋白的表达量变化。5.Western Blot:检测AA小鼠骨髓组织中T-bet、GATA-3蛋白的表达量变化。6.RT-PCR:检测AA小鼠骨髓组织中T-betmRNA、GATA-3mRNA的表达量变化。结果:1.滋肾益髓生血方对60Co-γ联合免疫诱导AA小鼠药效学影响1.1 一般状态:滋肾益髓生血方等治疗组均能明显改善AA小鼠的一般状态,提高活动度和饮食量,维持AA小鼠的体质量。1.2体质量:与正常组小鼠相比,模型组AA小鼠体质量较低（P<0.01）;而滋肾益髓生血方组小鼠体质量数值均明显高于模型组（P<0.01）。1.3外周血:与正常组小鼠相比,模型组AA小鼠WBC、HGB的数值显着降低（P<0.01）;RBC数量呈降低（P<0.05）,PLT变化无统计学意义（P>0.05）;与模型组比较,滋肾益髓生血方组的HGB数值均显着升高（P<0.01）,康力龙组的WBC和RBC均显着增加（P<0.01,P<0.05）。1.4血涂片:与正常组小鼠相比,模型组AA小鼠血细胞数量偏少,异常形态的红细胞较多,滋肾益髓生血方组有一定的改善。1.5骨髓涂片:模型组AA小鼠骨髄出现较多大脂肪滴与纤维等非造血组织,骨髓各系幼稚细胞数量降低;滋肾益髓生血方组的AA小鼠骨髓中的非造血细胞明显减少,骨髓衰退情况明显好转。1.6 骨髓有核细胞数:与正常组相比,模型组AA小鼠骨髓有核细胞数明显降低,康力龙与滋肾益髓生血方组的小鼠骨髓有核细胞数有升高（P<0.01,P<0.05）。1.7 脾脏HE染色:模型组AA小鼠脾组织淋巴小结形态不规则,红髓和白髓边界分辨不清,白髓边界呈现不规则形,脾血窦和脾索较难辨别清楚;各治疗组小鼠脾脏淋巴结趋于正常形态,红髓白髓边界趋于清晰,血窦和脾索较明显,红白髓明显比模型组更加规则。2.滋肾益髓生血方对60Co-γ联合免疫诱导AA小鼠免疫功能的影响2.1 血清因子:模型组AA小鼠IFN-γ,TNF-α、IL-2、IL-5、IL-13水平均显着升高,IL-4、IL-10均显着降低（P<0.01）。与模型组相比,除康力龙组的IL-5外,康力龙组、滋肾益髓生血组的IFN-y、TNF-α、IL-2、IL-5、IL-13水平均降低（P<0.01,P<0.05）;而IL-4、IL-10水平均有所升高（P<0.01,P<0.05）。2.2 流式细胞术:模型组AA小鼠CD8、CD3、CD4三种免疫细胞的数量均处于低水平（P<0.01）,CD4/CD8比值降低（P<0.01）;与模型组AA小鼠比较,各治疗组的CD4、CD8均有所升高（P<0.01,P<0.05）,滋肾益髓生血组CD3明显升高（P<0.05）。3.滋肾益髓生血方对60Co-γ联合免疫诱导AA小鼠脾脏组织中T-bet、GATA-3蛋白的影响免疫组化结果显示:与正常组小鼠GATA-3蛋白表达量比较,模型组AA小鼠脾组织中GATA-3蛋白表达降低（P<0.01）,与模型组比较,各治疗组小鼠脾组织的GATA-3蛋白表达增多（P<0.01）;康力龙组与滋肾益髓生血组GATA-3蛋白表达无差异（P>0.05）。与正常组小鼠相比,模型组AA小鼠脾组织细胞胞浆中T-bet蛋白表达呈强阳性（P<0.01）,与模型组比较,各治疗组的T-bet蛋白表达明显减少（P<0.01）;康力龙组与滋肾益髓生血组T-bet蛋白表达无差异（P>0.05）。4.滋肾益髓生血方对60Co-γ联合免疫诱导AA小鼠骨髓T-bet、GATA-3蛋白与mRNA的影响4.1 Western Blot检测结果示:模型组AA小鼠骨髓组织中的GATA-3蛋白表达量低于正常组（P<0.01）,滋肾益髓生血组与康力龙组小鼠骨髓GATA-3表达量变化无统计学意义（P>0.05）。模型组AA小鼠骨髓的T-bet表达量高于正常组（P<0.05）,康力龙组和滋肾益髓生血组AA小鼠骨髓中的T-bet表达量低于模型组（P<0.01,P<0.05）。4.2 RT-PCR检测结果示:模型组与各治疗组AA小鼠骨髓的T-bet mRNA表达量高于正常组（P<0.01）,各治疗组AA小鼠骨髓中的T-betmRNA表达量均低于模型组（P<0.01）,与康力龙组相比,滋肾益髓生血组AA小鼠骨髓T-betmRNA表达量均下降（P<0.01）;模型组AA小鼠骨髓的GATA-3 mRNA表达量明显低于正常组（P<0.01）,与模型组相比,康力龙组与滋肾益髓生血组GATA-3 mRNA表达量上升（P<0.01）。结论:1.滋肾益髓生血方能够缓解AA小鼠的一般状态,提高小鼠的体质量,能够升高AA小鼠外周血中RBC、WBC、HGB的数量,增加骨髓有核细胞数,可以减轻AA小鼠脾脏病理损害,降低免疫损伤,保护骨髓造血功能。2.滋肾益髓生血方可以升高AA小鼠外周血中CD3、CD4细胞数量,升高CD4/CD8比例,降低AA小鼠外周血清中IFN-y、IL-2、TNF-α、IL-5、IL-13等细胞因子,升高IL-4、IL-10等细胞因子,从而降低免疫异常活化造成的免疫损伤,维持AA小鼠免疫平衡稳态。3.滋肾益髓生血方可以有效的抑制AA小鼠脾脏和骨髓组织中的T-bet蛋白与mRNA的表达,增加GATA-3蛋白与mRNA的表达;滋肾益髓生血方可能通过调节T-bet/GATA-3相关信号通路,调节机体免疫平衡,延缓AA小鼠骨髓衰竭的进程。
丁燕[7]（2020）在《MYDGF对小鼠非酒精性脂肪肝的保护作用及其机制研究》文中认为研究背景和目的骨髓是否调节全身代谢仍然未知。我们的最新研究表明,由骨髓细胞（bone marrow cells,BMCs）分泌的髓源性生长因子（myeloid-derived growth factor,MYDGF）能够减轻2型糖尿病小鼠的胰岛素抵抗。在这里,我们探讨MYDGF是否能改善非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）,并作为骨髓与肝脏之间的信使分子来调节肝脏脂肪代谢。方法1、骨髓细胞特异性MYDGF敲除小鼠（MYDGF-/-,KO）和野生型对照（MYDGF+/+,WT）小鼠接受高脂饮食（high-fat diet,HFD）喂养,从而建立NAFLD模型。2、通过尾静脉注射腺相关病毒（adeno-associated viruses,AAV）-MYDGF在肝脏中超表达MYDGF,通过骨髓移植（bone marrow transplantion,BMT）和骨髓腔内原位注射AAV-MYDGF在骨髓中超表达MYDGF。通过siRNA沉默骨髓细胞特异性MYDGF敲除小鼠肝脏的IKKβ。3、采用苏木素-伊红染色、油红O染色和电子显微镜方法,检测小鼠肝脏脂质沉积情况;免疫组织化学和天狼星红染色检测肝脏纤维化情况;免疫组织化学染色检测肝脏巨噬细胞浸润情况;RT-PCR方法检测肝脏组织脂质合成基因和炎症因子的表达情况;免疫印迹（western blot,WB）方法检测P-p65、P-IkBα等炎症蛋白表达情况,同时检测pSREBP1c、nSREBP1c、FAS、ACC1和SCD1等脂质蛋白表达情况。4、用棕榈酸（palmitic acid,PA）刺激 PMHs,补充 rMYDGF,或将 PMHs与BMCs共培养,以及利用siRNA沉默PMHs的IKKβ技术观察肝细胞脂质沉积、脂肪生成和炎症反应情况。5、采用油红染色检测各组细胞脂质沉积情况,免疫荧光检测各组细胞P65核转位情况,RT-PCR检测各组肝脏原代细胞脂质合成基因和炎症因子的表达情况,western blot方法检测P-p65、P-IkBα等炎症蛋白表达情况,同时检测pSREBP1c、nSREBP1c、FAS、ACC1 和 SCD1 等脂质蛋白表达情况。结果1、骨髓细胞特异性MYDGF敲除加剧了肝脏炎症、脂肪生成、脂肪变性和纤维化。2、通过尾静脉注射AAV-MYDGF恢复肝脏MYDGF表达,通过骨髓移植和骨髓原位MYDGF注射恢复骨髓MYDGF表达,减轻了肝脏炎症、脂肪生成、脂肪变性和纤维化。3、补充rMYDGF和BMCs共培养均可减轻肝细胞炎症和脂肪沉积。4、在体内和体外沉默IKKβ均减轻了炎症、脂质合成和脂质沉积。5、机制上,MYDGF通过IKKβ/NF-κB信号通路改善NAFLD。结论这些结果表明,MYDGF通过IKKβ/NF-κB信号途径在肥胖相关的NAFLD中起保护作用,并且是骨髓与肝脏之间交流的信号因子。骨髓可能可以作为代谢紊乱疾病（例如NAFLD、肥胖症和糖尿病）新的治疗靶点。
邢波建[8]（2020）在《东北白鹅TLR15基因基本特征及LPS诱导下的表达分析》文中认为Toll样受体（Toll-like receptors,TLRs）是固有免疫系统中一类重要的跨膜信号传递蛋白,通过识别病原微生物保守的分子相关模式启动对病原体的识别,从而实现早期抗感染作用,并为获得性免疫提供相关活化分子。Toll样受体15（Toll-like receptors 15,TLR15）作为禽类所特有的模式识别受体,其在禽类免疫系统的作用分析有助于了解该分子的抗感染作用机制,并为免疫制剂的开发提供基础依据。本研究以东北白鹅为试验对象,对TLR15在相关炎症反应中的作用进行了系列分析。本研究首先采用反转录PCR技术克隆东北白鹅TLR15基因,并通过生物信息学软件分析该基因的结构特征、分类地位和进化关系;同时构建东北白鹅TLR15部分序列原核表达载体,诱导重组蛋白表达,制备兔抗鹅TLR15序列多克隆抗体;其次在细菌脂多糖（LPS）诱导下建立雏鹅炎症反应模型,应用荧光定量PCR技术,分析东北白鹅TLR15基因以及相关免疫因子在不同组织的转录水平;再应用免疫组织化学技术,对TLR15在不同组织的表达水平进行检测。结果表明:1、东北白鹅TLR15基因片段长度2 598 bp,编码865氨基酸残基,1-24位氨基酸形成信号肽区域,650672位氨基酸形成跨膜信号;具有磷酸化位点78个,其中13个位于LRRs区,9个位于胞内区;糖基化位点16个。胞外区序列长度为1 845 bp,含有5个变异位点（第357、451、720、1 120和1 401位）,编码615氨基酸残基,胞外区形成“马蹄形”结构,包含6个LRRs的结构域。经核苷酸序列比较发现,东北白鹅与鸿雁的同源性最高,为99.85%,与爬行动物同源性在40%70%。表明鹅TLR15在进化关系上,与鸿雁最近,与家禽和鸟类较近,与爬行类较远,在哺乳动物中已经退化。2、诱导的重组蛋白分子量为43 kD,免疫后获得的多克隆抗体效价为1:20 000;在LPS诱导下,东北白鹅TLR15及其相关免疫因子（IFN-α、IFN-γ、IL-1β和IL-6）转录水平均高于对照组,其中TLR15、IFN-α和IFN-γ在法氏囊组织转录水平最高（P<0.01）,在心脏和肺脏等组织转录水平较低;IL-6在胸腺中转录水平最高,在肝脏和脾脏中转录水平较低。表明在炎症反应中TLR15及其免疫因子在不同组织的转录水平存在一定的差异。同一组织中,不同因子的转录水平也不相同,法氏囊中高表达IFN和TLR15,骨髓中高表达IL和TLR15。免疫组织化学检测结果显示,TLR15在法氏囊、脾脏和肝脏中表达差异极显着（P<0.01）,在肺组织和肾组织中表达显着（P<0.05）;表明在LPS诱导下,东北白鹅TLR15基因转录水平和翻译水平基本一致。本研究对东北白鹅的TLR15进行了克隆、原核表达及抗体制备,对LPS诱导下TLR15的变化规律进行了分析。为东北白鹅TLR15的抗感染机制提供了理论依据,同时也为免疫增强剂的开发奠定了基础。
苏雪莲[9]（2020）在《细胞松弛素B诱导的细胞凋亡早期细胞力学特性改变研究》文中进行了进一步梳理癌症已成为仅次于心脑血管疾病的第二大人类死亡原因,其主要的治疗方法之一是化疗。但是,由于现有的化疗药物用药后易产生耐药性以及对某些肿瘤细胞的抑制作用差,导致抗癌治疗效果不显着,迫切需要开发新型化疗药物。文献已报道癌细胞的肌动蛋白微丝骨架很不稳定,然而,目前还没有一种针对肌动蛋白微丝骨架的特效药被应用于临床。临床常用的化疗药以微管靶向作用为主,不能有效地干扰癌细胞的微丝骨架聚合而发挥抗癌作用。细胞松弛素作为一类微丝骨架解聚试剂,可用于干扰癌细胞微丝的聚合,研究其对癌细胞的抑制作用,并了解其对肿瘤细胞杀伤机制。一直以来,关于细胞凋亡的研究主要集中在细胞生化、分子生物学、凋亡分子间相互调控以及晚期凋亡细胞的生物力学方面。而对凋亡早期细胞的力学特性改变的研究开展的非常少,特别是微丝骨架的解聚和细胞内分子拥挤度的加剧与线粒体损伤、细胞表面超微结构改变之间的关联性仍然是一个没有被认识和研究的科学问题。这些问题的解决对于认识微丝靶向试剂诱导的细胞凋亡机制和开发抗癌新药具有重要的研究价值。针对上述存在的问题,本研究基于细胞松弛素B（cytochalasin B,CytB）的微丝骨架解聚作用,建立细胞凋亡和细胞内分子拥挤实验模型。采用细胞力学和纳米形态学的方法以及免疫荧光、免疫印迹等分子生物技术,研究凋亡早期细胞力学特性的改变、力学凋亡机制以及细胞力学与生物学凋亡之间的关联性。将细胞力学凋亡机制纳入到以微丝靶向抗癌药物的研发及其毒副作用的研究中,获得如下创新性研究成果:1.通过比较CytB对微丝骨架稳定性不同的宫颈癌Hela细胞和BMSCs的抑制作用,发现在相同的药物浓度下,Hela细胞的生长抑制率和凋亡率均高于BMSCs。且3倍于Hela细胞药物浓度干预BMSCs,其凋亡率仍低于Hela细胞。此外,用药后两种细胞的微丝骨架不同程度地解聚、杨氏模量和体积减小。这些结果表明CytB对Hela细胞有明显的杀伤作用,但对BMSCs存在一定的毒副作用。这种副作用通过破坏细胞的力学结构、改变力学特性,导致细胞损伤,甚至凋亡。2.基于CytB对Hela细胞的杀伤作用,采用AFM、SEM和CLMS对凋亡早期的细胞的力学特性、表面超微结构、细胞内分子拥挤度进行定量研究和定性分析。发现微丝解聚导致细胞的体积减小、表面粗糙度增加以及细胞内分子拥挤度加剧。结合前人用CytB诱导Hela细胞发生线粒体途径凋亡的研究和类细胞内分子拥挤的计算机模型研究的结果,本工作首次引用“分子拥挤模型”来分析和解释由于CytB引起的微丝骨架解聚造成的细胞内分子拥挤与线粒体损伤和细胞表面粗糙度增加之间的相互关系。可知分子拥挤引发细胞内大分子,如微丝碎片、线粒体等向细胞膜侧重新定位和分布,甚至被挤出细胞膜,导致细胞线粒体转运障碍、损伤和表面粗糙度增加,导致细胞凋亡。3.通过用单细胞力学、Western blot、免疫荧光等实验方法,对处于凋亡早期细胞的力学性质、纳米形态学和凋亡相关分子进行定量研究和定性分析。发现细胞杨氏模量和体积的减小、表面粗糙度的增加均发生在PS膜外翻、Fas/CD95活化之前。这些结果表明在生物学上尚未发生凋亡的细胞,其杨氏模量早已改变,细胞活力已经下降。提示细胞杨氏模量的减小可被看作是细胞松弛素诱导的细胞损伤和凋亡的一个力学指标,用于微丝靶向抗癌药物抑癌效果的评价。
王颖薇[10]（2019）在《借助三维动态系统构建高活性BM-MSC复层细胞片治疗心肌梗死》文中指出【目的】借助动态培养系统构建骨髓间充质干细胞（Bone marrow-mesenchymal stem cell,BM-MSC）三维复层细胞片,并在大鼠心肌梗死（Myocardial infarction,MI）模型中研究其治疗效果与相关机制。【方法】使用磷脂酶A2脱细胞方法制备脱细胞猪心包膜（Decellularized porcine pericardium,DPP）,借助天冬氨酸（Aspartic acid,Asp）在DPP上交联VEGF。使用RAD16-I水凝胶搭建BM-MSC三维复层结构,分别在动态培养系统及传统静态培养条件获得动态培养细胞片（Dynamic culture cell sheet,DCcs）及静态培养细胞片（Static culture cell sheet,SCcs）,检测细胞的三维结构、增殖、凋亡及生长因子水平。在大鼠MI模型中,评价DCcs与SCcs 4周内对大鼠梗死心肌的疗效,追踪BM-MSC体内存活情况。【结果】DPP中异种细胞成分被高效去除,天然胶原被完整保留。借助Asp在DPP上以共价交联方式构建DPP-Asp-VEGF支架,VEGF 7天内稳定释放。在细胞片体外培养48 h后,与SCcs相比,DCcs中细胞密度更高,细胞均匀分布,且BM-MSC维持了较好的增殖、生长因子分泌及干细胞标记物表达水平,细胞凋亡率显着减少。体内结果显示,与MI对照组相比,DCcs显着减少梗死心肌面积、改善心功能,促进血管新生;与SCcs相比,DCcs组显着提高BM-MSC体内4周存活率。【结论】使用三维动态培养系统构建得到的DCcs可维持良好的干细胞生物学活性,在大鼠MI模型中DCcs有效减少梗死心肌面积、改善心功能并促进梗死区血管新生。
二、山羊心脏中心纤维体内的骨髓组织（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、山羊心脏中心纤维体内的骨髓组织（论文提纲范文）
（1）肾精亏虚对SD雄性大鼠骨髓造血功能的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 肾藏精理论研究 |
| 1.1 肾精的生成来源 |
| 1.2 肾精的功能 |
| 1.3 肾精的现代医学研究 |
| 2 “髓”的理论研究 |
| 2.1 “髓”的含义及生理功能 |
| 2.2 “髓”的生成与肾精 |
| 2.3 “骨髓”的现代医学研究 |
| 3 “血”的研究理论 |
| 3.1 血的涵义及生理功能 |
| 3.2 血的生成与肾精 |
| 3.3 贫血的现代医学研究 |
| 4 补肾方龟鹿二仙胶 |
| 5 结语 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验1 肾精亏虚对SD雄性大鼠造血功能影响的实验研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 1.4 主要仪器及耗材 |
| 1.5 造模方法及分组、给药 |
| 1.6 检测指标及方法 |
| 1.7 统计方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 红细胞数量(RBC)、血红蛋白(HGB)含量比较 |
| 2.3 血清促红细胞生成素(EPO)、睾酮(T)含量比较 |
| 2.4 附睾精子质量比较 |
| 2.5 睾丸组织病理学比较 |
| 2.6 骨髓象比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 肾精亏虚大鼠模型的建立 |
| 3.2 肾精亏虚大鼠造血组织形态学的改变 |
| 3.3 肾精亏虚对血清EPO含量的影响 |
| 实验2 肾精亏虚对SD雄性大鼠骨髓造血细胞及CD34+细胞凋亡的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物及分组 |
| 1.2 造模方法 |
| 1.3 药物及灌胃 |
| 1.4 仪器设备及试剂 |
| 1.5 检测指标 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组大鼠骨髓造血干细胞的超微病理形态学观察 |
| 2.2 流式细胞仪检测骨髓CD34+细胞凋亡的结果 |
| 2.3 骨髓石蜡包埋切片TUNEL法检测CD34+细胞凋亡结果 |
| 3 讨论 |
| 实验3 肾精亏虚对SD雄性大鼠导致骨髓造血细胞凋亡的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物及分组 |
| 1.2 造模方法 |
| 1.3 药物及灌胃 |
| 1.4 仪器、试剂及耗材 |
| 1.5 检测指标 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 骨髓Bcl-2、Bax、caspase-3、Fas和 Fasl蛋白表达结果 |
| 2.2 骨髓 Bcl-2、Bax、caspase-3、Fas 和 FaslmRNA RT-PCR 结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 肾精亏虚对大鼠骨髓Fas/Fasl蛋白表达的影响 |
| 3.2 肾精亏虚对大鼠骨髓Bcl-2、Bax蛋白及Bcl-2m RNA、Baxm RNA表达的影响 |
| 3.3 肾精亏虚对大鼠骨髓Caspase-3 表达的影响 |
| 讨论 |
| 1.肾精亏虚与贫血的关系 |
| 2.肾精亏虚大鼠模型建立评估 |
| 3.肾精亏虚对骨髓造血功能影响的可能机制 |
| 4.龟鹿二仙胶改善骨髓造血功能的作用机制 |
| 结论 |
| 展望与不足 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1 综述 肾虚与贫血关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 2 发表论文 |
| 致谢 |
（2）低氧预处理增强间充质干细胞对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离与鉴定 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 低氧预处理增强BMMSC对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 间充质干细胞治疗肝脏缺血再灌注损伤的机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的学术成果 |
| 致谢 |
（3）贻贝仿生导电性苯胺齐聚物生物材料的制备及在组织工程中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 导电高分子材料 |
| 1.2.1 导电高分子概述 |
| 1.2.2 导电高分子的合成、结构和掺杂 |
| 1.2.3 导电高分子复合材料 |
| 1.2.4 导电高分子存在的不足 |
| 1.3 含导电高分子齐聚物的生物材料 |
| 1.3.1 含导电高分子齐聚物生物材料概述 |
| 1.3.2 含苯胺齐聚物的生物材料 |
| 1.4 导电性生物材料的应用形式 |
| 1.4.1 导电性薄膜 |
| 1.4.2 导电性纳米纤维 |
| 1.4.3 导电性水凝胶 |
| 1.4.4 导电性复合材料3D支架 |
| 1.5 导电性生物材料的组织工程应用 |
| 1.5.1 骨组织工程 |
| 1.5.2 骨骼肌组织工程 |
| 1.5.3 神经组织工程 |
| 1.5.4 心脏组织工程 |
| 1.5.5 皮肤组织工程 |
| 1.6 电刺激的生物学反应 |
| 1.6.1 电刺激对蛋白质行为的影响 |
| 1.6.2 电刺激对细胞行为的影响 |
| 1.6.3 导电生物材料结合电刺激在组织工程中的应用 |
| 1.7 论文的设计思路和研究内容 |
| 第2章 贻贝仿生的导电性生物粘合剂的制备及在体外成骨诱导方面的研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 主要试剂与仪器 |
| 2.2.2 苯胺四聚体甲基丙烯酰胺(ATMA)单体的合成 |
| 2.2.3 多巴胺甲基丙烯酰胺(DOPAMA)单体的合成 |
| 2.2.4 电活性无规共聚物的合成 |
| 2.2.5 材料的基本表征 |
| 2.2.6 血液相容性测试 |
| 2.2.7 体外生物学实验 |
| 2.2.8 统计学分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 材料的合成和表征 |
| 2.3.2 共聚物的电化学性质及电导率 |
| 2.3.3 共聚物表面的亲水性 |
| 2.3.4 共聚物的粘结强度 |
| 2.3.5 PAT共聚物体外生物相容性评估 |
| 2.3.6 电刺激下PAT共聚物上MC3T3-E1细胞成骨分化评估 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 电活性和生物活性微球的制备及在大鼠颅骨缺损修复中的应用研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 主要试剂与仪器 |
| 3.2.2 材料的合成 |
| 3.2.3 PLGA/HA微球的制备 |
| 3.2.4 PLGA/HA微球的功能化 |
| 3.2.5 材料的基本表征 |
| 3.2.6 QCM-D测定微球对DOPA-IGF-1生长因子的吸附能力 |
| 3.2.7 体外生物学实验 |
| 3.2.8 大鼠颅骨缺损修复研究 |
| 3.2.9 统计学分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 电活性微球的制备与表征 |
| 3.3.2 DOPA-IGF-1在微球上的粘附性表征 |
| 3.3.3 电活性生物活性微球的体外生物学性质研究 |
| 3.3.4 电活性生物活性微球的体内生物学评估(大鼠颅骨缺损修复) |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 图案化导电性静电纺丝纤维毡的制备及在体外神经分化方面的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 主要试剂与仪器 |
| 4.2.2 材料的合成 |
| 4.2.3 PAT/PCL复合材料无序和图案化纤维毡的制备 |
| 4.2.4 静电纺丝材料的掺杂 |
| 4.2.5 材料的基本表征 |
| 4.2.6 ELISA法测定静电纺丝材料对NGF的吸附能力 |
| 4.2.7 体外生物学研究 |
| 4.2.8 统计学分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 PCAT纳米纤维的制备 |
| 4.3.2 PCAT纳米纤维的电化学性质和电导率 |
| 4.3.3 PCAT纳米纤维的亲水性 |
| 4.3.4 静电纺丝纳米纤维毡的形貌 |
| 4.3.5 纺丝纤维对NGF蛋白的粘附能力 |
| 4.3.6 无序纺丝纤维的生物相容性评价 |
| 4.3.7 电刺激下PCAT纤维毡对神经细胞生物活性和分化的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 导电性形状记忆弹性体的制备及在体外成骨诱导方面的应用研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 主要试剂与仪器 |
| 5.2.2 端氨基苯胺三聚体(ACAT)的合成 |
| 5.2.3 PCL的合成 |
| 5.2.4 导电弹性体的合成 |
| 5.2.5 材料的基本表征 |
| 5.2.6 弹性体的宏观记忆性评估 |
| 5.2.7 体外生物学实验 |
| 5.2.8 统计学分析 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 导电性聚氨酯弹性体的合成与表征 |
| 5.3.2 导电性弹性体的热力学性质 |
| 5.3.3 导电性弹性体的形状记忆性 |
| 5.3.4 导电性弹性体的表面形貌 |
| 5.3.5 导电性弹性体的细胞相容性评价 |
| 5.3.6 ALP活性和钙沉积 |
| 5.3.7 成骨基因表达 |
| 5.3.8 成骨蛋白免疫荧光染色和western blotting分析 |
| 5.4 本章小结 |
| 第6章 全文总结和展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
（4）二甲基亚砜对急性放射病多组织器官损伤的防护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 二甲基亚砜对骨髓型急性放射病的防护效应研究 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.5 实验讨论 |
| 1.6 小结 |
| 第二章 二甲基亚砜对骨髓型急性放射病的防护机制研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 实验讨论 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 二甲基亚砜对肠型急性放射病的防护效应研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.5 实验讨论 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 二甲基亚砜对肠型急性放射病的防护机制研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.5 实验讨论 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 作者在学期间取得的学术成果 |
| 主要简历 |
| 致谢 |
（5）高原低氧大鼠骨髓微血管增生及基膜降解的分子机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要符号对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 慢性低氧下,大鼠骨髓微血管变化与IL-6/JAK2/STAT3/MMP-9 通路的相关研究 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器 |
| 2.1.3 主要分析软件 |
| 2.2 实验方法与步骤 |
| 2.2.1 标本采集与处理 |
| 2.2.2 Elisa实验 |
| 2.2.3 组织冰冻切片制备 |
| 2.2.4 荧光共聚焦实验 |
| 2.2.5 微血管密度(microvessel density,MVD)判定标准 |
| 2.2.6 吸柱法提取骨髓组织总RNA及其浓度测定 |
| 2.2.7 RT-PCR实验 |
| 2.2.8 蛋白免疫印迹(Western Blot)实验 |
| 2.2.9 电镜组织包埋及观察 |
| 2.2.10 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 慢性低氧大鼠的一般资料 |
| 3.2 缺氧时血清IL-6水平变化 |
| 3.3 慢性低氧下,JAK2/STAT3 的磷酸化及活化增加,经STAT3 抑制剂处理后出现逆转 |
| 3.4 慢性低氧大鼠骨髓中 MMP-9 表达上调,经 STAT3 抑制剂处理后,MMP-9 表达下调 |
| 3.5 慢性缺氧可增加骨髓MVD,STAT3 抑制剂可明显降低骨髓中的MVD |
| 3.6 BM降解发生在CH大鼠骨髓中,STAT3 抑制剂对其有明显的抑制作用 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 第二部分 不同时间低氧暴露下大鼠骨髓血管基膜变化与MMP-9和COL4A1的相关研究 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 研究对象 |
| 2.1.2 RT-PCR主要试剂 |
| 2.1.3 Western blot主要试剂 |
| 2.1.4 免疫组化主要试剂 |
| 2.1.5 主要仪器 |
| 2.1.6 主要分析软件 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 大鼠组织取材步骤 |
| 2.2.2 组织石蜡切片 |
| 2.2.3 免疫组化 |
| 2.2.4 电镜组织包埋及观察 |
| 2.2.5 Trizol法提取RNA |
| 2.2.6 RT-PCR实验 |
| 2.2.7 蛋白免疫印迹(Western blot)实验 |
| 2.2.8 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 不同时间缺氧对大鼠血常规的影响 |
| 3.2 不同时间缺氧对大鼠骨髓中MMP-9表达的影响 |
| 3.3 COL4A1在不同时间缺氧条件下表达下降 |
| 3.4 不同时间缺氧下大鼠骨髓微血管基膜发生降解 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 全文总结 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 综述1 |
| 参考文献 |
| 综述2 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（6）滋肾益髓生血方对AA小鼠骨髓保护作用及T-bet/GATA-3影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分: 文献综述 |
| 综述一 再生障碍性贫血免疫机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 再生障碍性贫血Th1/Th2细胞亚群失衡与转录因子T-bet和GATA-3的调控作用 |
| 参考文献 |
| 第二部分: 实验研究 |
| 实验一 滋肾益髓生血方对~(60)Co-γ联合免疫诱导AA小鼠的药效学研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 实验二 滋肾益髓生血方对~(60)Co-γ联合免疫诱导AA小鼠免疫功能的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 实验三 滋肾益髓生血方对~(60)Co-γ联合免疫诱导AA小鼠脾组织T-bet、GATA-3蛋白表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 实验四 滋肾益髓生血方对~(60)Co-γ联合免疫诱导AA小鼠骨髓组织T-bet、GATA-3蛋白及mRNA的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
（7）MYDGF对小鼠非酒精性脂肪肝的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 有关MYDGF的介绍 |
| 1.2 非酒精性脂肪肝 |
| 1.3 MYDGF与代谢疾病 |
| 1.4 立题依据与研究目的 |
| 第二章 NAFLD小鼠血浆MYDGF表达 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验试剂及器材 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 溶液配制 |
| 2.2.3 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 动物研究与饮食 |
| 2.3.2 血浆MYDGF含量检测 |
| 2.3.3 血清炎症因子水平测定 |
| 2.3.4 血压监测 |
| 2.3.5 血液学指标的检测 |
| 2.3.6 小鼠肝脏和骨髓组织取材 |
| 2.3.7 石蜡包埋和组织切片的制备 |
| 2.3.8 肝脏组织和骨髓组织免疫荧光 |
| 2.3.9 小鼠肝脏和骨髓总蛋白的提取及含量测定 |
| 2.3.10 免疫印迹(Western blot) |
| 2.3.11 RNA的提取及测定 |
| 2.3.12 统计分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 NAFLD小鼠的MYDGF水平降低 |
| 2.4.2 NAFLD小鼠的炎症反应增高 |
| 2.4.3 MYDGF和NAFLD炎症之间存在相关性 |
| 2.5 总结 |
| 第三章 骨髓细胞特异性MYDGF敲除加剧了NAFLD小鼠的炎症、脂肪生成、肝脂肪变性和纤维化 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验试剂及器材 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 溶液配制 |
| 3.2.3 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 实验动物及其繁殖 |
| 3.3.2 实验动物基因型鉴定 |
| 3.3.3 苏木精-伊红染色(HE染色) |
| 3.3.4 肝脏油红O染色 |
| 3.3.5 肝脏组织透射电镜观察 |
| 3.3.6 免疫组化染色 |
| 3.3.7 天狼星红染色 |
| 3.3.8 经腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT) |
| 3.3.9 胰岛素耐量实验 |
| 3.3.10 摄食量、粪便排出量、粪便脂质含量和体重测量 |
| 3.3.11 统计分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 骨髓细胞特异性MYDGF敲除加重HFD诱导的炎症、脂肪生成、肝脂肪变性和纤维化 |
| 3.4.2 骨髓细胞特异性MYDGF敲除加重NAFLD小鼠代谢恶化 |
| 3.5 总结 |
| 第四章 补充MYDGF减轻NAFLD小鼠炎症、脂肪生成、肝脂肪变性、纤维化和代谢紊乱 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验试剂及器材 |
| 4.2.1 实验试剂 |
| 4.2.2 溶液配制 |
| 4.2.3 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 实验动物及其繁殖 |
| 4.3.2 实验动物基因型鉴定 |
| 4.3.3 实验动物的分组 |
| 4.3.4 统计分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 AAV-MYDGF注射后小鼠中MYDGF的表达增多 |
| 4.4.2 补充MYDGF可减轻NAFLD小鼠的炎症、脂肪生成、肝脂肪变性和纤维化 |
| 4.4.3 补充MYDGF可减轻NAFLD的小鼠的代谢紊乱 |
| 4.5 总结 |
| 第五章 骨髓移植减轻NAFLD小鼠的炎症、脂肪生成、肝脂肪变性、纤维化和代谢紊乱 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验试剂及器材 |
| 5.2.1 实验试剂 |
| 5.2.2 溶液配制 |
| 5.2.3 实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 实验动物的分组 |
| 5.3.2 小鼠骨髓移植 |
| 5.3.3 统计分析 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 成功构建小鼠骨髓移植(BMT)模型 |
| 5.4.2 骨髓移植减轻了NAFLD小鼠的炎症、脂肪生成、肝脂肪变性和纤维化 |
| 5.4.3 骨髓移植减轻了NAFLD小鼠的代谢紊乱 |
| 5.5 总结 |
| 第六章 MYDGF的骨髓细胞特异性过表达改善了NAFLD小鼠的炎症、脂肪生成、肝脂肪变性、纤维化和代谢紊乱 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验试剂及器材 |
| 6.2.1 实验试剂 |
| 6.2.2 溶液配制 |
| 6.2.3 实验仪器 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 实验动物的分组 |
| 6.3.2 小鼠骨髓原位注射 |
| 6.3.3 统计分析 |
| 6.4 实验结果 |
| 6.4.1 成功进行小鼠骨髓腔原位注射AAV-MYDGF |
| 6.4.2 骨髓细胞特异性过表达MYDGF改善了NAFLD小鼠的炎症、脂肪生成、肝脏脂肪变性和纤维化 |
| 6.4.3 骨髓细胞特异性过表达MYDGF减轻了NAFLD小鼠的代谢紊乱 |
| 6.5 总结 |
| 第七章 MYDGF改善体外原代肝细胞的炎症、脂肪生成和脂肪沉积 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 实验试剂及器材 |
| 7.2.1 实验试剂 |
| 7.2.2 溶液配制 |
| 7.2.3 实验仪器 |
| 7.3 实验方法 |
| 7.3.1 原代肝脏细胞提取和处理 |
| 7.3.2 原代肝脏细胞分组和染色 |
| 7.3.3 统计分析 |
| 7.4 实验结果 |
| 7.4.1 确定了原代肝细胞中PA和rMYDGF的最佳孵育条件 |
| 7.4.2 MYDGF改善了原代肝细胞中的脂肪沉积、脂肪生成和炎症反应 |
| 7.5 总结 |
| 第八章 共培养实验MYDGF减弱了肝细胞的炎症和脂质沉积 |
| 8.1 引言 |
| 8.2 实验试剂及器材 |
| 8.2.1 实验试剂 |
| 8.2.2 溶液配制 |
| 8.2.3 实验仪器 |
| 8.3 实验方法 |
| 8.3.1 小鼠骨髓细胞提取 |
| 8.3.2 原代肝脏细胞和骨髓细胞共培养分组和染色 |
| 8.3.3 原代肝脏细胞蛋白免疫印迹 |
| 8.3.4 统计分析 |
| 8.4 实验结果 |
| 8.4.1 在共培养实验中MYDGF改善了原代肝细胞中的脂肪沉积、脂肪生成和炎症反应 |
| 8.5 总结 |
| 第九章 IKKβ/NF-κB信号通路对于MYDGF抗NAFLD发挥重要作用 |
| 9.1 引言 |
| 9.2 实验试剂及器材 |
| 9.2.1 实验试剂 |
| 9.2.2 溶液配制 |
| 9.2.3 实验仪器 |
| 9.3 实验方法 |
| 9.3.1 基因转录报告测定和染色质免疫沉淀(ChIP)测定 |
| 9.3.2 小鼠分组和处理 |
| 9.3.3 原代肝脏细胞分组和处理 |
| 9.3.4 小鼠肝脏和原代肝脏细胞蛋白免疫印迹 |
| 9.3.5 统计分析 |
| 9.4 实验结果 |
| 9.4.1 在体内和体外补充MYDGF可以抑制NF-κB信号和脂肪生成 |
| 9.4.2 IKKβ信号参与了MYDGF对NAFLD小鼠的脂代谢和炎症调控作用 |
| 9.4.3 成功在体内体外构建IKKβ沉默模型 |
| 9.4.4 IKKβ基因沉默抑制了NF-κB信号传导,减轻了肝脏脂肪变性和体内炎症 |
| 9.5 总结 |
| 第十章 讨论 |
| 第十一章 总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 博士研究生期间的成果 |
| 致谢 |
（8）东北白鹅TLR15基因基本特征及LPS诱导下的表达分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 TOLL样受体研究进展 |
| 1.1.1 Toll样受体的发现 |
| 1.1.2 Toll样受体的结构 |
| 1.1.3 Toll样受体的种类 |
| 1.1.4 Toll样受体的分布 |
| 1.1.5 Toll样受体的信号通路 |
| 1.2 禽类TOLL样受体15的研究进展 |
| 1.2.1 鸡TLR15的分子生物学研究 |
| 1.2.2 鹅TLR15的分子生物学研究 |
| 1.3 研究目的与意义 |
| 1.4 研究内容 |
| 第2章 东北白鹅TLR15序列克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 载体和菌株 |
| 2.1.3 酶及主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 引物设计 |
| 2.2.2 鹅肝脏组织总RNA的提取 |
| 2.2.3 鹅总RNA的纯化及反转录 |
| 2.2.4 鹅TLR15基因的克隆 |
| 2.2.5 鹅TLR15生物信息学分析 |
| 2.2.6 鹅TLR15部分基因原核表达载体的构建 |
| 2.2.7 鹅TLR15部分基因的原核表达及多克隆抗体的制备 |
| 2.2.8 抗血清的制备及检测 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 鹅肝脏组织总RNA的提取及RT-PCR |
| 2.3.2 鹅TLR15基因的鉴定 |
| 2.3.3 鹅TLR15基因的生物信息学特征 |
| 2.3.4 鹅TLR15原核表达载体的鉴定 |
| 2.3.5 鹅TLR15重组蛋白的鉴定 |
| 2.3.6 抗血清的检测 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第3章 LPS诱导下鹅TLR15 在组织中的分布 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 酶及主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 雏鹅炎症模型的建立 |
| 3.2.2 引物设计 |
| 3.2.3 鹅不同组织总RNA的提取 |
| 3.2.4 总RNA的纯化及反转录 |
| 3.2.5 鹅TLR15 及相关免疫因子的荧光定量PCR |
| 3.2.6 鹅TLR15的免疫组织化学检测 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 鹅TLR15及免疫因子分析 |
| 3.3.2 免疫因子表达图谱构建 |
| 3.3.3 鹅TLR15的组织分布 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（9）细胞松弛素B诱导的细胞凋亡早期细胞力学特性改变研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 癌症治疗及癌细胞凋亡研究现状 |
| 1.2.1 细胞凋亡分子机制研究 |
| 1.3 细胞松弛素抗癌研究现状——微丝靶向抗癌试剂 |
| 1.3.1 细胞松弛素B抗癌研究 |
| 1.3.2 微丝靶向试剂抗癌的生物学基础 |
| 1.3.3 肌动蛋白解聚与线粒体损伤 |
| 1.3.4 肌动蛋白解聚与细胞膜死亡受体活化 |
| 1.4 细胞内分子拥挤的模拟研究 |
| 1.4.1 细胞内分子拥挤实验研究 |
| 1.4.2 约束空间内缓冲液拥挤模拟研究 |
| 1.4.3 计算机分子拥挤模型建立及其理论研究 |
| 1.5 研究动机 |
| 第二章 细胞松弛素B诱导细胞建立凋亡和分子拥挤实验模型 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.2.1 主要实验材料及设备 |
| 2.2.2 Hela细胞培养 |
| 2.2.3 BMSCs分离培养、鉴定和细胞冻存 |
| 2.2.4 细胞生长抑制率分析 |
| 2.2.5 细胞凋亡模型的建立 |
| 2.2.6 细胞内分子拥挤实验模型的建立 |
| 2.2.7 扫描电子显微镜观察 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 原代培养BMSCs形态及鉴定 |
| 2.3.2 CytB明显抑制Hela细胞生长 |
| 2.3.3 细胞凋亡率逐渐升高 |
| 2.3.4 细胞内分子拥挤度加剧 |
| 2.3.5 细胞表面超微结构观察 |
| 2.3.6 统计分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 CytB诱导Hela细胞凋亡早期的生物学和生物力学研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 实验材料与设备 |
| 3.2.2 CytB诱导的Hela细胞形态学的改变及细胞脱壁分析 |
| 3.2.3 Annexin V-FITC/PI细胞早期凋亡时间确定 |
| 3.2.4 肌动蛋白微丝骨架解聚荧光示踪分析 |
| 3.2.5 细胞膜死亡受体Fas/CD95和线粒体荧光探针标记 |
| 3.2.6 Western blot蛋白表达分析 |
| 3.2.7 AFM细胞表面扫描和纳米压痕实验 |
| 3.2.8 基于AFM的细胞表面微观形貌观察 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 CytB诱导Hela细胞脱壁 |
| 3.3.2 细胞形态学改变 |
| 3.3.3 肌动蛋白微丝骨架解聚 |
| 3.3.4 细胞早期凋亡时间确定 |
| 3.3.5 纽蛋白表达下降 |
| 3.3.6 细胞膜死亡受体Fas/CD95逐渐活化 |
| 3.3.7 线粒体随肌动蛋白解聚发生转运障碍 |
| 3.3.8 细胞表面形貌和几何学改建 |
| 3.3.9 细胞杨氏模量下降 |
| 3.4 统计分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 CytB对微丝骨架正常的BMSCs的毒性作用评价和生物力学研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 主要实验材料及设备 |
| 4.2.2 Annexin V-FITC/PI细胞早期凋亡时间确定 |
| 4.2.3 肌动蛋白微丝骨架解聚荧光示踪 |
| 4.2.4 AFM单个活细胞扫描与纳米压痕实验 |
| 4.2.5 细胞几何学分析 |
| 4.2.6 细胞杨氏模量分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 高浓度的CytB明显抑制BMSCs生长 |
| 4.3.2 细胞形态学改变 |
| 4.3.3 磷脂酰丝氨酸(PS)膜外翻 |
| 4.3.4 细胞微丝骨架解聚、断裂,细胞内拥挤度加剧 |
| 4.3.5 CytB引发细胞几何学的改建和表面粗糙度的增加 |
| 4.3.6 细胞杨氏模量不断减小 |
| 4.3.7 统计分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 讨论 |
| 第六章 结论 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 一、发表论文 |
| 二、主持和参与课题 |
| 致谢 |
（10）借助三维动态系统构建高活性BM-MSC复层细胞片治疗心肌梗死（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究框架 |
| 1.3 缩略语说明 |
| 2 实验材料与实验方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 DPP结构及成分分析 |
| 3.2 利用Asp在 DPP上建立VEGF缓释系统 |
| 3.3 BM-MSC的体外培养与鉴定 |
| 3.4 细胞片结构及干细胞活性分析 |
| 3.5 细胞片中BM-MSC的活性及超微结构 |
| 3.6 DCcs对 MI大鼠心肌结构及功能的保护作用 |
| 3.7 DCcs对梗死心肌血管再生促进作用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 DPP支架的制备与改性 |
| 4.2 动态培养系统对细胞片结构与BM-MSC活性的影响 |
| 4.3 DCcs对大鼠MI模型的保护作用 |
| 5 总结与展望 |
| 5.1 课题总结 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 在校期间研究成果 |
| 课题研究经费来源 |
| 致谢 |
四、山羊心脏中心纤维体内的骨髓组织（论文参考文献）
- [1]肾精亏虚对SD雄性大鼠骨髓造血功能的影响及其机制研究[D]. 吕建芳. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [2]低氧预处理增强间充质干细胞对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制研究[D]. 陈睿. 昆明医科大学, 2021(01)
- [3]贻贝仿生导电性苯胺齐聚物生物材料的制备及在组织工程中的应用[D]. 闫欢欢. 中国科学技术大学, 2020(01)
- [4]二甲基亚砜对急性放射病多组织器官损伤的防护作用及其机制研究[D]. 彭仁军. 军事科学院, 2020(02)
- [5]高原低氧大鼠骨髓微血管增生及基膜降解的分子机制研究[D]. 朱明明. 青海大学, 2020
- [6]滋肾益髓生血方对AA小鼠骨髓保护作用及T-bet/GATA-3影响的实验研究[D]. 刘运华. 北京中医药大学, 2020(04)
- [7]MYDGF对小鼠非酒精性脂肪肝的保护作用及其机制研究[D]. 丁燕. 南方医科大学, 2020(01)
- [8]东北白鹅TLR15基因基本特征及LPS诱导下的表达分析[D]. 邢波建. 哈尔滨师范大学, 2020(01)
- [9]细胞松弛素B诱导的细胞凋亡早期细胞力学特性改变研究[D]. 苏雪莲. 兰州大学, 2020(04)
- [10]借助三维动态系统构建高活性BM-MSC复层细胞片治疗心肌梗死[D]. 王颖薇. 暨南大学, 2019