小标本的快速脱水程序应用实践论文_齐焕然

北京昌平中医医院 北京 102200

【摘 要】目的:探讨病理小标本的快速脱水程序。方法:根据不同厚度的小标本分别采用1h和2h脱水程序对组织进行快速脱水,从蜡块与切片染色质量两方面探讨快速脱水程序的可行性。 结果:对小标本按照不同厚度进行分类采用快速脱水程序可以制作出优良的病理切片。结论:小标本的快速脱水程序在脱水机中可以实现。

【关键词】小标本;厚度;快速脱水程序

【中图分类号】R322 【文献标识码】B 【文章编号】1764-8999(2015)7-0787-01

标本送至病理科,经过取材——脱水——包埋——制片——染色一系列程序后,才能到进行诊断,这个过程往往需要三到五天的时间。随着小标本的数量增加,一成不变的脱水程序,已经逐渐不适合临床对病理报告发放时间的要求。因此,小标本快速脱水程序应运而生。各种内镜活检及穿刺活检标本体积小、形状不规则、颜色不鲜明,在标本处理过程中容易发生组织块丢失、与其他组织碎屑相混淆、包埋不平、切片不全或全部切掉等问题[1]。本文就不同厚度的小标本实施各异的快速脱水程序进行探讨,对于在小标本的固定、脱水、包埋过程中应采取一些措施进行简介。

1 材料与方法

1.1材料

选取我院临床送检的乳腺、结肠等20余例手术大标本。全自动封闭式脱水机ASP200 ,10%福尔马林,其它试剂为国产分析纯,石蜡LEICA(58℃~60 ℃)。

1.2 方法

送检的大组织病理标本,在不影响病理诊断的基础上,模拟乳腺穿刺获得直径1.5mm以及结肠镜钳取直径小于3mm的小标本,分别放入ASP200全自动封闭式脱水机中运行1h和2h脱水程序。组织按照脱水程序(见表1,表2)进行固定,脱水,透明,浸蜡。程序完成后,各组组织分别进行石蜡包埋,3~4μm切片,常规HE染色,中性树胶封片。

表1 1h脱水程序

2 结果

2.1蜡块质量

经多次实验验证,快速脱水程序的小组织,透明效果较好,组织收缩少,硬度适中,蜡块容易切出3~4μm切片,切片完整无裂痕。

2.2 染色效果

常规HE染色优良的标准[2]:切片组织完整;切片厚薄均匀;切片染色对比清晰,红蓝分明;切片无刀痕、无裂隙、无颤痕 等,快速脱水程序处理的组织经HE染色后,符合优良片的标准(如图1,2所示)。

3 讨论

随着医药卫生事业的发展,微创手术的普及,病理科的标本构成已经不是简单的手术切除大标本,这就对标本处理提出了新的要求——个性化的标本处理,即:多样化的脱水程序以满足不同标本的脱水需求。同时,患者对病理报告时效性要求的提高,也逐步加速了对小标本快速脱水程序的产生。

近年来,现代医学发展速度越来越快,内镜活检及穿刺活检小标本的数量也越来越多,在当前的外检病理相关工作当中,小标本的切片制作已成为主要问题之一。相关研究通过抽查了大量的小标本切片,通过对小标本的固定、取材、脱水、透明.浸蜡,包埋、切片、染色等相关内容进行了研究以及总结分析,相关研究结果表明,如果小标本固定不及时的话,会大大影响切片的染色效果,另外如果酒精浓度选用不合理,选用95%浓度的酒精进行固定的话,也会大大影响切片染色效果[3]。同时采用95%酒精用在固定过程以及脱水过程当中,一旦透明、浸蜡操作不合适的话,也会导致组织变脆,严重影响切片的最终质量,而如果包埋操作不合理或者组织不切全的话,也会影响最终的诊断结果准确率,大量临床研究表明,使用10%中性福尔马林克分进行标本固定,然后使用脱水机进行小标本处理,且按照粘膜方向进行适当包埋的话,会利于后期脱水[4]。

根据标本的厚度选择不同的脱水程序,经我们大量验证后是可行的。目前,病理科主要应用福尔马林对标本进行固定。福尔马林固定组织,主要靠它的渗透力,它的渗透力强,对组织收缩小,但经酒精脱水时收缩很大,它能使组织硬化并提高组织的弹性。因此,根据标本的厚度,选择合适的酒精梯度时间,既要保证标本的脱水效果,又要避免组织过硬。在这次试验中,我们还采用了异丙醇作为透明剂。异丙醇相对于二甲苯,其收缩力更强[5]。为避免组织由无水乙醇入异丙醇造成的组织骤缩,本次实验特别设计了省去无水乙醇,采用两步80/20 酒精/异丙醇的混合液的方法。结果证明,组织没有出现明显的骤缩。甲状腺组织尤其是其胶质部分很容易在脱水过程中变脆,导致在切片中破裂,严重影响制片的美观,对甲状腺穿刺组织实施个性化的脱水程序,有效地避免了胶质破裂的情况出现。

总之,小标本快速脱水程序中是可行的,蜡块和HE染色质量优良,不影响病理诊断,且能够个性化处理病理标本,减少患者病理报告等待时间。

参考文献:

[1] 王德田,董建强,梁志勇. 实用现代病理学技术[M]. 北京:中国协和医科大学出版社,2012:61-62.

[2] 凌启波,梁英杰. HE制片质控要求[J]. 临床与实验病理学杂志,2005,16( 4) :333-334.

[3] 司明远. 基层医院如何制备优质病理切片[J].临床与实验病理学杂志,2012,28(2):221.

[4] Iesurum A,Balbi T, Vasapollo D , et al. Microwave processing and ethanol-based fixation in forensic pathology [J]. Am J Forensic Med Pathol,2006,27:178-182.

[5] 龙建洲. 异丙醇替代二甲苯在组织透明中的应用[J]. 检验医学与临床,2010:2(7):161-162.

论文作者:齐焕然

论文发表刊物:《中医学报》2015年7月

论文发表时间:2015/10/19

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