湖南省宁乡县巷子口中心卫生院 湖南长沙 410629
摘要：目的：分析白芍与川乌配伍前后急性毒性，为合理配伍提供依据。方法：制得川乌、白芍单煎剂以及配伍剂，预试验，评价不同单煎剂与合煎剂一次性灌胃引起小鼠死亡界限，计算全死量与全活量，据此设定灌胃量，取小鼠300只，随机分为川乌组、白芍组、合并组（1：1）、合并组2（1：2）、合并组3（2：1），每组又分为5个剂量组，阶梯比1：1.36，按40ml/kg灌服，常规饲养14日，逐日观察小鼠毒性反应。结果：川乌、白芍给药后出现症状时间、中毒表现、解剖表现、死亡高峰存在一定差异；合并组1、2、3，给药后出现症状时间、中毒表现、解剖表现、死亡高峰与川乌组基本相同，合并组1、2、3的LD50分别为川乌12.19g/kg、12.20g/kg、13.10/kg，95%CI分别为（10.18～14.68）g/kg川乌、（10.18～14.67）g/kg、（12.18～15.17）g/kg，合并组1、2、3各剂量组小鼠死亡率差异不显著（P＞0.05）。结论：白芍与川乌配伍可减少川乌毒性，提高小鼠耐受川乌剂量水平，但仍需大规模实验证实。
关键词：白芍；川乌；配伍；毒性
中医药是我国的瑰宝，在现代临床医学中也具有重要应用价值、发展潜力，科学试验挖掘中医药潜力的重要方法。白芍与川乌配伍常用于风湿性关节炎治疗，川乌具有抗炎、镇痛等多种药理作用，白芍具有抗血小板凝聚、清除氧自由基等多重功效，两者配伍可增进疗效，有研究称配伍后，乌头碱煎出量下降，芍药苷煎出量增加[1]。但川乌具中主要成分二萜类生物碱具有较强的毒性，一定程度上限制了白芍与川乌配伍应用。本次研究实进行实验研究白芍与川乌配伍前后急性毒性变化。
1材料与方法
1.1仪器与试剂
白芍与川乌均从市场购得，经实验室鉴定。昆明种实验用小白鼠，体重（20±5）g，雌雄各半，数量不限。仪器主要包括电子天平、高速离心机、冰箱、各种过目筛等。大鼠均常规实验1周后引入实验。
1.2方法
1.2.1 煎剂制备
川乌水煎剂：取生川乌以粉碎机粉碎，依次过10、40目筛，取之间颗粒，称取300g＋1500ml纯水浸泡1h，文火煮沸，煎煮1h，取上清液，4层纱布过滤，加水2倍，反复后煎30min，取上清液，4层纱布过滤，合并2次滤液，离心浓缩至每毫升含有1g川乌的煎剂，4℃冰箱保存。白芍水煎剂：同法取过筛颗粒300g＋1500ml蒸馏水浸泡30min，加水10倍煎煮，煮沸后煎6h，取上清液，过滤，浓缩至每毫升1g白芍的白芍单煎剂。川乌与白芍配伍剂：按照比例需要，取川乌与白芍颗粒，按照同法，取得每毫升含1g川乌与白芍（1：1、1：2、2：1）合煎剂。取煎剂，以蒸馏水配置不同比率药液实验。
1.2.2 分组实验
预试验，评价不同单煎剂与合煎剂一次性灌胃引起小鼠死亡界限，计算全死量与全活量。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆经实验发现，川乌全死量14.125mg/kg、全活量3.606mg/kg，白芍全死量537.581g/kg、全活量322.548g/k。在以上范围内，设定灌胃量。取小鼠300只，饲养1周引入实验，随机分为川乌组、白芍组、合并组（1：1）、合并组2（1：2）、合并组3（2：1），每组又分为5个剂量，相邻剂量组间剂量比1：1.36。实验前，禁食自由饮水12h，按40ml/kg灌服。常规饲养14日，逐日观察小鼠毒性反应。
1.3统计学处理
数据资料以SPSS18.0软件进行计算处理，比较采用 检验，以P＜0.05表示检验水平。
2结果与讨论
川乌组，给药后5min即出现呼吸急促、口吐白沫等症状表现，死前出现跳跃、肢体抽搐、角弓反张等异常症状，15min～2h出现死亡高峰，解剖见胸腔出血、心尖部缺血、胃内残留药液、肠内少许残留，存活小鼠活动减少、行为异常、精神状态差。半数致死量（LD50）6.918g川乌/kg，95%CI（5.87～8.14）川乌/kg。第1、2、3、4、5小组死亡0、2、5、7、9只。
白芍组，小鼠给药后，活动减少，饮食饮水减少，精神状态差，部分行走不稳，12～48h出现死亡高峰，死亡小鼠解剖见胃肠脏器，少部分肝脏颜色变淡，存活小鼠可正常饮食，部分饮食减少，大小便、皮肤、呼吸、口腔、鼻等均未见异常，半数致死量451.184g白芍/kg，95%CI（471.68～498.0）白芍/kg。第1、2、3、4、5小组死亡0、2、3、6、8只。
合并组1，给药5min即出现呼吸急促、口吐白沫等症状，15min～2h内死亡，解剖与川乌组基本相同，LD50为川乌12.19g/kg，95%CI（10.18～14.68）g/kg川乌，1、2、3、4、5组分别死亡0、4、6、8、10只。
合并组2，给药5min即出现呼吸急促、口吐白沫等症状，15min～2h内出现死亡高峰，解剖与川乌组、合并组1基本相同，LD50为川乌12.20g/kg，95%CI（10.18～14.67）g/kg川乌，1、2、3、4、5组分别死亡0、2、4、8、10只。
合并组3，给药5min即出现症状，与川乌组、合并组1、合并组2基本相同，15min～2h内死亡高峰，存活患者表现与川乌组、合并组1基本相同，LD50为13.10/kg川乌，95%CI（12.18～15.17）g/kg川乌，各组死亡0、2、6、9、10只。川乌组、白 芍组与合并组1、2、3各剂量组小鼠死亡率差异不显著（P＞0.05）。
川乌配伍白芍后毒性仍主要来源于川乌，如何控制川乌毒性是川乌配伍白芍需关注的焦点，川乌致死可能与心脏毒性有关，川乌配伍白芍可减少川乌毒性，提高小鼠对川乌毒性的耐受剂量，但小鼠死亡率组间比较差异不显著，有必要开展更大规模实验研究。此外，因川乌配伍白芍煎出有效成分变化差异，配伍减毒作用与那种有效成分变化有关尚有待深入研究[2]。
参考文献：
[1]汪星，孙卫，张铁军.乌头类有毒中药配伍减毒增效的研究进展[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（18）：327-331.
[2]毕云枫，郑重，皮子凤，等.川乌与白芍片配伍对CYP450酶活性影响及其代谢指纹的研究[J].药学学报，2014，49（12）：1705-1710.
论文作者:彭秉刚
论文发表刊物:《健康世界》2015年23期
论文发表时间:2016/2/26
标签：白芍论文; 小鼠论文; 毒性论文; 剂量论文; 给药论文; 口吐白沫论文; 差异论文; 《健康世界》2015年23期论文;