应用斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫抗体的研究

应用斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫抗体的研究

刘登宇, 胡文庆, 张鸿满[1]2001年在《斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫病患者血清抗体的研究》文中研究指明目的 建立一种检测华支睾吸虫病血清抗体的简便、快速、敏感和特异的新方法。方法 以华支睾吸虫成虫抗原为包被抗原 ,金标记葡萄球菌A蛋白 (SPA)为显色剂 ,建立检测华支睾吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以dot ELISA作平行对照。结果 DIGFA和dot ELISA分别检测 119例华支睾吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 96 6 %和 92 4% ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测正常人血清 40例、囊虫病患者血清 2 0例、日本血吸虫病患者血清 2 5例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 5 %和 4%。DIGFA与dot ELISA两法的符合率达 90 9%。结论 DIGFA的敏感性和特异性与dot ELISA相近 ,且具简便、快速及不需特殊设备等优点 ,是一种检测华支睾吸虫病患者血清抗体的新方法。

刘登宇[2]2000年在《应用斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫抗体的研究》文中指出目的:建立一种简便、快速、敏感、特异的检测华支睾吸虫抗体的新方法。方法:以华支睾吸虫成虫抗原为包被抗原,金标记SPA为显色剂,建立检测华支睾吸虫抗体的斑点金免疫渗滤法(DIGFA);并以Dot-ELISA作平行对照。结果:DIGFA和Dot-ELISA检测119例患者血清抗体阳性率分别为96.44%(115/119)和92.44%(110/119),两法无显著差异(P>0.05)。DIGFA对40例正常人血清阴性符合率为100%(40/40),与20例囊虫患者血清和25例日本血吸虫病人血清的交叉反应率分别为5.00%(1/20)和4.00%(1/25)。DIGFA与Dot-ELISA两者比较,符合率达90.91%(50/55)。结论:实验结果显示了DIGFA的敏感性和特异性与Dot-ELISA法相近,且具简便、快速、不需特殊设备等优点,是一项值得推广应用的检测华支睾吸虫抗体的新方法。

陈文碧, 张锡林, 王光西, 许颖, 张跃辉[3]2004年在《快速检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立和应用》文中提出目的 :建立一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的快速、敏感和特异的新方法。方法 :以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为上样抗原 ,胶体金标记羊抗人IgG为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以ELISA作平行对照。结果 :DIGFA和ELISA分别检测 83例斯氏狸殖吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 95 .2 % (79/ 83)和 91 .6 % (76 / 83) ,两法差异无显著性 (P >0 .0 5 )。DIGFA分别检测正常人血清32例、华支睾吸虫病患者血清 2 3例和日本血吸虫病患者血清 36例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4 .3% (1 / 2 3)和 8.3% (3/ 36 ) ;DIGFA和ELISA两法的总符合率达 92 .3% (36 / 39)。结论 :DIGFA的特异性和敏感性与ELISA相近 ,但方法快速、试剂稳定 ,且不需特殊设备 ,适用于各级医疗单位和血清流行病学调查

陈文碧, 张锡林, 王光西, 王敏, 杨兴友[4]2004年在《斑点金免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgG的研究》文中研究说明目的 为寻求一种简便、快速、可靠的方法 ,用于诊断斯氏狸殖吸虫病。方法 以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原为包被抗原 ,胶体金标记羊抗人 Ig G为显色剂 ,建立检测斯氏狸殖吸虫病患者血清 Ig G的斑点金免疫渗滤法 ( DIGFA) ,并以 dot-ELISA作平行对照。结果  DIGFA和 dot-ELISA分别检测 91例斯氏狸殖吸虫病患者血清 Ig G抗体 ,其阳性率分别为 96.7% ( 88/ 91 )和 92 .3 % ( 84/ 91 ) ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测健康者血清 3 5例、日本血吸虫病患者血清 2 5例和华支睾吸虫病患者血清 2 2例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 4.0 % ( 1 / 2 5 )和 4.5 % ( 1 / 2 2 ) ;DIGFA和 dot-ELISA两法的总符合率达 91 .7% ( 4 4/ 4 8)。结论  DIGFA的敏感性和特异性与 dot-ELISA相近 ,但方法简便、快速 ,是一种检测斯氏狸殖吸虫病患者血清 Ig G抗体的较好的免疫诊断方法。

王晓婷, 朱荫昌, 华万全[5]2009年在《组分抗原斑点金标免疫渗滤法检测血吸虫短程抗体的研究》文中研究表明目的建立一种可用于检测血吸虫病人短程抗体的斑点金标免疫渗滤法(dot immuno-gold filtration assay,DIG-FA)。方法将血吸虫可溶性虫卵组分抗原(107~121 kDa)包被于混纤膜上,以胶体金标记的抗人IgG为二抗,建立组分抗原-DIGFA。用该法检测慢性血吸虫病人、健康人、卫氏并殖吸虫病人和华支睾吸虫病人血清。同时与血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)-DIGFA比较。结果检测54份慢性血吸虫病人血清,组分抗原-DIGFA敏感性为94.4%,SEA-DIGFA敏感性为96.3%,两种方法检测50份正常人血清的特异性均为100%。检测19份卫氏并殖吸虫病人血清和30份华支睾吸虫病人血清,SEA-DIGFA敏感性分别为26.3%和10.0%,组分抗原-DIGFA均未检出阳性反应。结论应用组分抗原-DIGFA检测血吸虫短程抗体具有较高的敏感性和特异性,且与其他吸虫病几乎无交叉反应,特异性优于SEA-DIGFA。

蒋红[6]2004年在《斑点免疫金渗滤法快速检测磺胺甲噁唑残留》文中认为本研究制备了三种磺胺药的多克隆抗体,建立了快速检测磺胺甲噁唑的斑点免疫金渗滤法,为该技术在畜产品中磺胺药残留检测上的应用奠定了基础。研究结果如下:分别以HSA、RSA为载体用重氮化法合成人工免疫原SMZ-HSA、SN-HSA、SDM-HSA及SMZ-RSA,以OVA为载体合成相应的包被原;经紫外扫描和高效液相色谱分析,表明合成成功。用合成的SMZ-HSA免疫原免疫鼠和兔,SN-HSA、SMZ-RSA及SDM-HSA三种免疫原免疫兔,所得抗血清经琼脂扩散试验测定其效价分别为1:32、1:16、1:16、1:8、1:16;ELISA法测定其效价依次为1:512000、1:256000、1:256000、1:64000、1:320000。经ELISA法检测四种兔多抗与OVA均无交叉反应。间接竞争ELISA试验表明, SMZ-HSA兔多抗、SMZ-RSA兔多抗、SN-HSA兔多抗和SDM-HSA兔多抗检测相应药物的灵敏度分别为46.618ng/ml,22.442ng/ml,14.0086ng/ml,73.9970ng/ml;与7种同类药物的交叉反应率最高达6.9%。SMZ-HSA抗血清经饱和硫酸铵沉淀法粗提后,葡聚糖凝胶G200柱分子筛层析,收集主峰蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定,只有一条带,说明其为电泳纯。用SMZ-HSA鼠多抗包被硝酸纤维素膜(NC膜),用SMZ-HSA纯化兔多抗与柠檬酸钠法制备的胶体金标记,制备金标蛋白复合物,建立了检测SMZ残留的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法简便、快速,灵敏度可达2.5ng/点,方法的特异性、重复性都较好。DIGFA检测方法与高效液相色谱法的符合率为93.01%。说明该检测方法确定的灵敏度是可信的。

参考文献:

[1]. 斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫病患者血清抗体的研究[J]. 刘登宇, 胡文庆, 张鸿满. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2001

[2]. 应用斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫抗体的研究[D]. 刘登宇. 广西医科大学. 2000

[3]. 快速检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立和应用[J]. 陈文碧, 张锡林, 王光西, 许颖, 张跃辉. 泸州医学院学报. 2004

[4]. 斑点金免疫渗滤法检测斯氏狸殖吸虫病患者血清IgG的研究[J]. 陈文碧, 张锡林, 王光西, 王敏, 杨兴友. 寄生虫病与感染性疾病. 2004

[5]. 组分抗原斑点金标免疫渗滤法检测血吸虫短程抗体的研究[J]. 王晓婷, 朱荫昌, 华万全. 中国血吸虫病防治杂志. 2009

[6]. 斑点免疫金渗滤法快速检测磺胺甲噁唑残留[D]. 蒋红. 新疆农业大学. 2004

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