邢健
（北京化工大学300110）
【摘要】液相色谱与质谱（LC/MS）的联用技术将质谱的高选择性、高灵敏度和高效液相色谱的高分离能力集中于一体。已经成为现代药学领域中最强大的分析工具之一，包括分析体内药物及其代谢产物、研究其结构和药代动力学、药物定性研究、药物定量研究等方面，本文对以上内容进行一一阐述。
【关键词】高效液相色谱- 串联质谱法；药物分析；应用
【中图分类号】R2 【文献标号】A 【文章编号】2095-7165（2015）10-0189-02
高效液相色谱法（HPLC或LC）是将高效液相色谱与质谱串联成为一个整机使用的检测技术，以液体溶剂作为流动相的色谱技术,具有高效、快速、高灵敏度、色谱柱可反复使用、分离出的组分易收集、适用范围广等特点[1]，该方法在药物的分析的应用主要是鉴别、有效成分及含量的测定、有关物质的检查,串联质谱(MS)是将一个质量选择的操作接到另一个质量选择的后面，当单极质谱给出化合物相对分子量的信息后，对准将对准分子离子进行多极裂解，进而会获得丰富的化合物碎片信息，对目标化合物进行确认，并定量等[2]。
现阶段，质谱技术被越来越多的应用到物质元素的检测领域中来，高效液相色谱- 串联质谱法又名气质联用仪（GC-MS），其原理是混合物首先在气相色谱中气化并分离，被分离的各种组分再进入质谱仪中被检测。液相色谱与质谱（LC/MS）的联用技术将质谱的高选择性、高灵敏度和高效液相色谱的高分离能力集中于一体。已经成为现代药学领域中最强大的分析工具之一，包括分析体内药物及其代谢产物、研究其结构和药代动力学、药物定性研究、药物定量研究等方面。
1 HPLC-MS在药物定性分析中的应用
现阶段，随着化学检测技术的发展，HPLC在天然药物的合成、检测等方面意义重大，尤其在药材的有效成分的测定方面被广泛利用[3]。药物成分内部结构的组分与其保留时间、结构、性质之间之间有着直接的关系，不同的药物由于其结构和性质上的差异，导致其在质谱图上的峰值存在明显的差异；通过药物定性分析可以消除以上检测中存在的差异，在进行药物定性分离时首先得到多极质谱图（MSn），通过与已知标准化合物的多极质谱对照分析，从而可以确定被分析混合物中的已知和未知成分的结构，达到定性分析的目的[4]。药物在体内代谢的方式包括氧化、水解、还原等转化过程，代谢产物在结构和功能上并没有发生太大变化，基本保持着药物本身所具有的结构，通过质谱检测到代谢产物与药物本身在裂解过程中形成的相同的碎片离子或丢失的中性分子，进而分析出代谢产物的可能结构[5]。Pang[6]利用这一方法对血浆中足叶乙苷和它的代谢产物儿茶酚进行分析。谷利伟[33]用少数的大豆胚芽样品，对其中的异黄桐的所有结构进行了很好的定性。
2 HPLC-MS/MS在药物定量分析中的应用
高效液相色谱法具有高效、快速、高灵敏度等特点，且可以分类大多数化合物，且分利率高等特点，定量分析结果的准确性和可靠性可以通过标准偏差和日内，日间精密度来衡量。Delavenne[7]检测了人体血液中氨甲丙二酯的浓度，并将测得的结果应用于临床毒理学研究。Bassan[8]对人体血清中可能含有的43种常见药进行了定量分析。周红华等[9]用LC-MS 联用技术对血药中的米氮平浓度进行测定，在测定的过程中发现该方法快速、准确、灵敏，经常被用来作为米氮平的药物动力学研究。陈勇等[10]利用HPLC-MS/MS法对苦参碱在大鼠体内的主要代谢产物进行研究。
3 HPLC-MS/MS在药物代谢中的应用
药物进入人体后，在体液、酶等作用下会进行生化反应，人体内药物的代谢主要包括药物及代谢物的分离、鉴定、体内外代谢物的比较、代谢途径的追踪、痕量分析测定等，利用液质联用技术可以很好的分离纯化鉴定代谢样品，并且可以对难以辨识的痕量药物代谢物进行鉴定和定量分析[11]。美国学者M.Jemal[12]研究发现LCMS-MS 可以进行快速液相萃取，检测人体血中、尿中的药物原形及其代谢产物。该法带来了快速和高灵敏度的定量生物分析。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆张郁葱等人研究发现[13]用LC-ESI-MS 测定人体血浆中的咖啡因及代谢物（1,7- 二甲基黄嘌呤、咪哒唑仑及代谢产物1-羟咪哒唑仑）,结果发现，该方法可以对上述成分进行检测并纯化，同时在试验中还对其应用于中药橘红颗粒对CYP3A4和CYP1A2的抑制作用进行了研究。
4 HPLC-MS/MS在药物分离与鉴定中的应用
质谱是一种强有力的结构解析工具，具有较高的检测灵敏度，而串联质谱能明显改善信号的信燥比，具有较高的灵敏度与选择性，将上述两者结合起来，可以集高分离能力与高敏感度为一体的的检测工具，随着各种离子化技术的不断出现，可以用来对药物进行分离和鉴定，史向国等[14]人用LC-MS 法对抗生素新药必特螺旋霉素中的多组分进行测定,研究结果发现，该组分中含有10种螺旋霉素类衍生物,目前HPLC-MS/MS在大环内酯类抗生素的分析中意义重大，该方法能够快速获取化学组分结构信息，制定质量标准并对其内部组分进行分离鉴定。张皓冰等[15]用HPLC-MS法对麝香酮中的含量进行测定，进而实现了麝香酮的定性和定量分析，同时观察到了[M+H]+峰及其特征碎片峰。
综上所述，HPLC-MS/MS是一门综合的检测技术，集高分离能力与高灵敏度为一体的检测工具，通过该技术可以对不挥发性化合物、极性化合物、大分子化合物进行分离，进而得到更多的化合物的结构信息，对药物的检测及分析意义重大。
参考文献
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论文作者:邢健
论文发表刊物:《医师在线》2015年5月第10期供稿
论文发表时间:2015/7/10
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