王瑞雪
河南省淮阳县疾病预防控制中心 466700
【摘 要】目的：对脂血与溶血两种因素对于HBV DNA 实时荧光定量PCR 方法的影响予以探讨。方法：随机选取我院2013 年1 月至2013年12 月间收集的临床HBV DNA 标本30 例，依据其浓度划分为I 水平、II 水平，收集正常人标准以及HBV DNA 阴性的重度乳糜状脂血标本，将这些标本按照不同的比例进行混合，将其制作成正常TG 浓度不同HBV DNA 水平：CI 组、CII 组；高TG 浓度不同HBV DNA 水平：BI 组、BII 组；极高TG 浓度不同HBV DNA 水平：AI 组、AII 组，并开展实施荧光定量PCR 扩增。并收集临床上的HBV DNA 标本，为每个人采集到3 份血液标本，将其中两份在零下20 度的环境中冷冻不同的时间，将其制成重度溶血DI、DII 组，无溶血对照组FI、FII 组，中度溶血EI、EII组，同样对其开展实时荧光定量PCR 扩增，对各个检测结果进行对比分析。结果：不同浓度的溶血与脂血的两种水平的HBV DNA 荧光定量PCR检测结果之间的差异不具备统计学意义。结论：溶血与脂血两种因素对于HBV DNA 实施荧光定量PCR 的结果没有影响。
【关键词】溶血；脂血；HBV DNA；实施荧光PCR
【中图分类号】R556.6【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2015）-07-363-01
临床上进行标本的采集与检测的过程中，不同类型的标本存在着各种不同的性质，对于血清标本来说，不同的血清标本通常会存在不同程度的脂血与溶血标本[1]，本文主要对溶血与脂血两种因素对于HBV DNA 实时荧光定量PCR 方法结果的影响予以探讨，现报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取我院2013 年1 月至2013 年12 月间收集的临床HBV DNA标本30 例，所有标本都没有血脂异常，没有溶血，每例采集3 毫升血液，依据HBV DNA 的浓度将浓度大于等于1×105的15 例标本设定为I 水平，将另外15 例临界浓度处于1.0×103~1.0×104的标本设定为II 水平，并要收集乙肝表面抗体为阳性或者是两对半为全阴性的没有溶血、肝功能正常的重度乳糜状脂血标本5 例，正常人血清标本5 例，都采集3 毫升血液，及时进行血清分离，并放于零下20 度的环境中保存。
1.2 方法
本次研究中需要用到的仪器与试剂有：三酰甘油生化试剂、紫外可见分光光度计、全自动生化仪、HBV DNA 试剂、荧光定量PCR仪等。收集正常人标准以及HBV DNA 阴性的重度乳糜状脂血标本，将这些标本按照不同的比例进行混合，将其制作成正常TG 浓度不同HBV DNA 水平：CI 组、CII 组；高TG 浓度不同HBV DNA 水平：BI组、BII 组；极高TG 浓度不同HBV DNA 水平：AI 组、AII 组，并开展实施荧光定量PCR 扩增。并收集临床上的HBV DNA 标本，为每个人采集到3 份血液标本，将其中两份在零下20 度的环境中冷冻不同的时间，将其制成重度溶血DI、DII 组，无溶血对照组FI、FII 组，中度溶血EI、EII 组，依据相关的试剂盒使用说明书，对待测标本及室内质控标本同时开展检测[2]。
1.3 统计学分析
本次研究中相关数据的处理应用统计学处理软件SPSS17.0 来开展，若P<0.05，表示差异具有统计学意义。
2 结果
不同TG 浓度对于HBV DNA 实施荧光定量PCR 的检测结果没有影响，具体数据如表1 所示：
3 讨论
实时荧光定量PCR 在开展标本检测的过程中，具有很高的特异性与灵敏度，这使得其在临床诊断中具有广泛的应用，这也有利于相关疾病诊断准确性的快速提升，但是临床上的标本具有多样性的特点，在药物、脂血、溶血等多种因素的影响之下，也很容易出现检测结果假阴性的情况发生[3-4]。有研究理论认为，不同脂血与溶血程度会对HBV DNA 定量检测结果产生影响，本次研究中，通过对不同脂血与溶血的标本同时开展实时荧光定量PCR 检测发现，不同溶血标本的HBV DNA 实时荧光定量PCR 检测结果的差异不具备统计学意义；同时不同脂血标本的HBV DNA 实时荧光定量PCR 检测结果的差异不具备统计学意义。由此可见，溶血与脂血两种因素对于HBV DNA 实施荧光定量PCR 的结果没有影响。
参考文献：
[1]张翠莉，刘萍，魏文波.脂血和溶血对HBV DNA 实时荧光定量PCR 检测的影响[J].武警医学，2012，15（22）：432-433.
[2]于倩，杜菁，王蓓.溶血和脂血两种因素对HBV-DNA 实时荧光定量PCR 方法的影响[J].中外医学研究，2015，25（2）：123-125.
[3]毛雄英，王卫华，王德扬，陈辉.模板提取方法对HBV DNA实时荧光定量PCR 检测的影响 [J].中国卫生检验杂志，2010，10（5）：678-679.
[4]边立忠，宋广辉，赵素芝，王清.LNA 探针实时荧光定量PCR检测HBV DNA 的研究[J].中华临床医师杂志（电子版），2013，15（11）：235-236.
论文作者:王瑞雪
论文发表刊物:《世界复合医学》2015年第7期供稿
论文发表时间:2015/9/17
标签：标本论文; 定量论文; 荧光论文; 浓度论文; 实时论文; 两种论文; 水平论文; 《世界复合医学》2015年第7期供稿论文;