腐败尸体提取物的DNA鉴定1例论文_张远海,,杨展森

腐败尸体提取物的DNA鉴定1例论文_张远海,,杨展森

(广西北流市公安局刑事科学技术室;广西北流537400)

1案例资料

1.1 案情与样本

2016年某日,在某地发现1具女性尸体,高度腐败,呈侧卧状,衣着整齐,双手反绑于身后,可见大量蛆虫,为机械性窒息死亡,推测死于1个月前。进行现场勘察,提取捆绑物、死者阴道试子、子宫口试子、阴道试子、子宫口试子,同时取肋软骨,据尸体所穿衣物,与近期通报的失踪人口父母进行对比,取4对可疑对象的父母血样送检,进行亲缘鉴定。从尸体指甲垢中提取TNA,保存。

1.1 DNA检验

主要试剂,二甲苯、蛋白酶K、SiO2、硫氰酸胍、异戊醇、DNA标准样本9947A(阳性对照)。仪器设备:紫外分光度计,DNA标准样本9947A,PCR仪等。采用有机法提取组织DNA。采用硅胶模法取软骨,进行骨密度DNA检查,去掉软骨附着覆盖组织,蒸馏水冲洗干净,自然晾干。70%乙醇消毒,锉取骨密质0.8g,15ml试管盛放,加入0.5ml/L的EDTA-Na2脱钙液8ml,震荡摇匀。56°℃水浴脱钙,持续48h,每隔24h更换1次脱钙液。1000r/min离心,2min,弃上清,蒸馏水洗涤2次,采用DNA Mini试剂盒,提取模板DNA。采用QIAGEN公司推荐的方法,按照试剂盒上说明书操作,进行16STR基因座复合扩增,采用遗传分析仪进行电泳分析,获得SR分型图与怀疑对象父母分型进行对比,确定亲缘关系。

2结果

扩增反应,证实其为刘某夫妇的女儿,认定亲缘关系,可靠性较高。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆死者肋软骨D8S1179为12/13,D21S11(24/31)、D7S820(10/12)、CSF1PO(11/12),D3S1358(15/18),TH01(7/9),D13S317(9/9),D16S530(10/12)。同时取得指甲垢中的基因座,备份,以待确认犯罪嫌疑人取样对比。

3 讨论

在分子生物学、基因生物学应用于法医学之前,高度腐败尸体的身份鉴定、死因分析、定性、破案存在许多难题[1]。DNA鉴定属于物证范畴,是指DNA同一认定,通过分子生物学,对犯罪现场遗留的生物物证DNA于犯罪嫌疑人NDA、尸体的DNA信息与怀疑为亲缘关系着进行对比。耦合概率是衡量同一认定的标准,NAD鉴定的耦合改良为1/1016之一,理论上NDA鉴定的可靠性极高,等同于100%的耦合概率。值得注意的是,有报道显示DNA已可进行人工改造进行改变,甚至进行伪造,或通过影响检测技术化学反应,影响检测结果,并不在此次研究讨论范畴。DNA的主要作用在于锁定犯罪嫌疑人、确定死者成分、打拐等,被广泛用于法医学。近年来,NDA检测技术飞速发展,技术所有的生物组织都可进行DNA鉴定。犯罪分子在犯罪过程中,不可避免会遗留生物学影响,如血迹、毛发、精液、痰液等,为DNA鉴定提供突破口。生物组织中的NDA保存时间也较长,在软组织保存时间相对较短,在骨中理论上可永久保存。对于无名尸体,若时间过久,或缺乏衣着等信息,或尸体被烧毁,确认死者较困难,可采集未被破坏的NDA进行鉴定。我国每年依靠DNA数据库对比确认被拐儿童超过200名,部分被拐儿童甚至被拐数十年。本例对象,留取的指甲垢便有死者与犯罪分子进行争斗留下的皮肤、血迹等组织,上报国家库,在今后若遇到串并得案件,便有助于快速确认犯罪分子,可大幅度的减少疑难案件。研究中,通过采集死者的肋软骨,与四对服夫妇对比,确认亲缘关系,最终确认的死者的身份。死者身份的确认对于犯罪嫌疑人的确认具有重要意义,有助于办案[2]。DNA鉴定除进行定性分析外,还可进行定量分析,不同组织不同时间组织生物学变化特征不尽相同,NDA物质含量也会发生变化,为死亡时间、死因推断提供了可能,目前已经有用于死亡时间推荐的DNA定量分析技术,但这些技术尚不成熟,同时存在较多的干扰因素[3]。

DNA鉴定并非外能灵药,特别是在进行犯罪嫌疑人确认时,可能会因为保存、取证不当,导致功亏一篑,著名的辛普森案便是典型的例子。随着我国居民文化水平的上升,网络的普及,高智商刑事犯罪明显增多。在进行DNA取样、处理、分析时,应规范操作,确保鉴定可靠性,合理合法。当前,我国在NDA鉴定的法律法规方面并无完善,也限制了DNA鉴定证据的使用[4]。实验室工作人员需要了解不同的NDA材料所提取、保存方法,避免造成难以挽回的损失。DNA鉴定本身也存在技术缺陷,本次研究采用8个位点,较之前的6个位点耦合率明显下降,但不排除出现鉴定出错,有必要采用多种鉴定技术结合,引入更先进的鉴定方法,降低耦合率,避免冤假错案,既是对社会的负责,也是法医工作者的责任与义务[5]。

在进行DNA鉴定需注意要点:①采集过程中,需要有明确的标准,穿防护服,带口罩、手套、帽子,避免污染,整体提取易携带品,以转至实验室提取,避免污染,避免交叉污染,在提取嫌疑人样本时,避免将现场提取的样本与犯罪嫌疑人的样本保存在一起;②在进行实验室操作时,严格按照技术规范操作,实验室本身需做好自身建设,以达到中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可。

【参考文献】

[1]公安机关刑事科学技术专业技术职位任职资格考试大纲法医专业部分[M].公安部人事训练局,2006 :208—228.

[2]杜文海,曾敏.实物证据引发的错案剖析与防范[J].中国检察官,2014(12);36-38.

[3]张伯旸,侯小燕,王希钢,等. 人体死后肝细胞 DNA 含量与死亡时间关系的研究[J].中国法医学杂志, 2009,24(4):220-223

[4] 陈尚坤.DNA 分析技术在刑事诉讼中的应用探讨[J].长白学刊,2009(5): 91 -94.

[5]稂志诚,陈如超.中国刑事错案中的鉴定问题——基于50例案件的实证研究[J].2016(3):8-19.

论文作者:张远海,,杨展森

论文发表刊物:《医师在线》2016年10月第20期

论文发表时间:2016/12/1

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