1例亲子鉴定中Y染色体基因座缺失案例分析
吕国权1 宋健文2 古小玉3
1. 广东公量司法鉴定中心，广东 中山 528403 ；2. 广东司法警官职业学院，广东 广州 510520 ；3. 广东康怡司法鉴定中心，广东 东莞 523000
摘 要： 在亲子鉴定实践中，常常遇到一些突变基因信息常见的位点的突变，这些突变信息需要格外注意，否则会导致结论或信息错误。本文报道1 例因Y 染色体基因座缺失影响检验结果。
关键词： 法医物证；亲子鉴定；等位基因缺失
一、案例
(一)案情
2017年6月委托人苏某(男性，可疑父)因其小孩尹某(男性)需要办理入户手续，故委托鉴定亲权关系。分别用DNA样品采集专用卡采集三名被鉴定人血液样本，并通风干燥保存。
(二)鉴定方法
三名被鉴定人的血痕均参照《法庭科学DNA实验室检验规范》(GA/T 383-2014)中FTA卡法提取检材的DNA。检材DNA用荧光标记STR复合扩增试剂盒MicroreaderTM21D进行10μL体系扩增，并设立阴性及阳性对照，应用ABI3130型基因分析仪对扩增产物进行电泳分离，用Gene Mapper基因座分型软件对电泳数据进行分析。
1.3STR检查结果
小孩尹某STR基因分型结果显示其性别与其外部信息不吻合，Amel基因座显示该检材性别为女性，但其检验结果证实小孩与其被检父母存在亲权关系且经过多次检验从而排除由于样本混乱导致错误的信息。为慎重起见通知其家属重新采集该小孩的毛发指甲作为鉴定检材，并经检验发现前后所采集的检材STR图谱分型一致。并通过不同实验室间不同仪器不同批号的试剂进行平行测定发现检验结果均显示该检材性别为女性。其变异情况如图1所示：
随着城市化进程的发展，城市中高大建筑物数量与日俱增，城市规划部门一方面要衡量现有建筑是否符合规划要求，另一方面又要对未来城市改造提供方案。传统日照分析方法主要是依据手工制表、手工计算、手工作图分析，耗时、费力、工作量大、效率低。随着数字城市的建设，在大量城市建筑数据的支持下，应用 GIS 空间分析方法就可以快速找出不符合GB 500096—2011《住宅设计规范》[1]要求的建筑，为城市规划与设计提供依据。
图1 委托人留下小孩的人口信息为男性但基因图谱信息为女性，Amel基因座中仅在X的BIN中出现峰型。
1.3 统计学处理 采用SPSS19.0统计学软件对研究数据进行分析和处理，计数资料以率表示，比较采用χ2检验；计量资料以表示，比较采用t检验，相关性分析采用Spearson相关系数，检验水准α=0.05，以P<0.05为差异有统计学意义。
图2 基因图谱可见该小孩的检材中含有Y染色体。
二、讨论
根据GA/T1163-2014《人类DNA荧光标记STR分型结果的分析及及应用》中4.6.1在STR分型图谱中，一个基因座检出一个等位基因，与纯合子的检测结果相似，但峰面积与信号强度与相邻的杂合子单峰面积值相当考虑为等位基因丢失。当扩增包含STR重复区域的DNA片段时，因重复区域内或侧翼序列或引物结合区发生单碱基突变，阻碍引物的结合，导致扩增失败，无法检测到模版DNA中本身存在的一个等位基因。在实际工作过程中这种情况一般在PCR过程中出现，DNA模版本应为杂合子在一系列外部因素的参与导致等位基因缺失。但该样本的情况与标准规定不符，在性别基因座中其X染色体峰的信号强度比相邻杂合子信号强度要高[1]。并且不同实验室不同仪器间的平行测试后排除其基因座在PCR过程中丢峰的情况。初步排除由于试剂或仪器的影响导致的假纯合子的情况。为了结果的准确性将该小孩检材用MicroreaderTM24Y试剂按操作说明书进PCR及电泳得出该男性Y染色体相关图谱(图2所示)其Y24-STR结果仅在DYS393、DYS19、DYS458、DYS481、DYS456基因座出现峰型，结合其常染色体STR分型中Amel基因座检验结果可以明确其因为自身的基因突变导致Y染色体大片段缺失从而引起性别基因座等位基因缺失。一般而言，等位基因丢失概括有两种情况，一种是由于PCR体系在扩增过程中本应存在的等位基因由于引物的设计、PCR的循环退火温度、PCR抑制物等因素影响下导致STR分型本应为杂合子而错误的显示为纯合子[2]，另一种情况在碱基(AUTG)配对过程中出现配对错误或者严重基因缺失[3]。在日常法医物证鉴定过程中Amel基因座检测结果与外部信息不符的情况不多见，作者在工作过程中曾遇到另一案例经两种不同厂家的试剂进行荧光扩增(阅微MicroreaderTM21D及中德美联AUCG EX20)检验结果一致，Amel基因座显示为女性，最后还是采用Y染色体试剂进行检测得出正确结论，该案例MRY24检测出完整的基因分型。
三、鉴定意见
该小孩常染色体STR基因座分型在Amel基因座中显示为女性与委托人提交的个人信息不符。通过对该小孩的血痕进行M24Y检测，并得出其Y-STR部分基因分型，确定该小孩性别为男性。结合MR21及M24Y DNA分型结果分析考虑该小孩自身的Y染色体出现变异部分缺失的情况。
传统观念认为中药安全无副作用，随着中药的广泛运用，国内外对一些中药的毒副作用也陆续有所报道，如千里光引起肝毒性并导致死亡的案例，并且研究表明，千里光所含吡咯西啶类生物碱（阿多尼弗林碱）是导致肝毒性的主要成分[3，4]。
[ 参 考 文 献 ]
[1][美]John M.Butler，著，侯一平，刘雅诚.译法医DNA分型专论：STR遗传标记的生物学、方法学及遗传学[M].北京：科学出版社，2007：99-106.
[2]余红丽，牛一平，王森，etal.亲子鉴定TH01等位基因“丢失”1例[J].中国法医学杂志，2011，26(1)：71-71.
[3]谢素梅，张贵芹，李学博.亲子鉴定中D18S51基因座等位基因丢失一例之原因分析[J].医学与法学，2014，6(1)：89-90.
中图分类号： D919
文献标识码： A
文章编号： 2095-4379- (2019 )16-0159-02
作者简介： 吕国权(1987- )，男，汉族，广东江门人，本科，任职于广东公量司法鉴定中心，研究方向：司法鉴定；宋健文(1982- )，男，汉族，广东人，硕士，广东司法警官职业学院，主检法医师，主要从事法医学研究及教学；古小玉(1991- )，女，广东恩平人，本科，任职于广东康怡司法鉴定中心，研究方向：司法鉴定。
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