吕跃杰 蒋家龙 姜蕾 王坤
（六安市中医院药剂科 安徽 六安 237000）
【摘要】 目的：研究养阴清咽颗粒的含量测定限度确定方法。方法：采用高效液相色谱法对制剂中绿原酸进行含量测定并确定含量限度。结果：绿原酸进样量范围在0.236μg～2.360μg之间峰面积与进样量线性关系良好。平均加样回收率为97.786%，RSD%=1.17% (n=6)。并通过六批样品确定制剂绿原酸的含量限度为1.0mg/g。结论：该方法专属性强，灵敏度高，重复性好，可为该制剂质量标准的制定提供参考。
【关键词】 养阴清咽颗粒；绿原酸；HPLC
【中图分类号】R944.2+7 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）10-0384-02
The content limitation determined for Yangyinqingyan Granules Zheng Muyao,JiangLei.
1Institute for Drug control of Lu An ;2 Dept of Pharmacy;The Traditional Hospital of Luan;Anhui Luan 237000,China
【Abstract】Objective To establish the content limitation for Chlorogenic acid in Yangyinqingyan Granules. Methods The content of Chlorogenic acid was determinated by HPLC,and to decide the content limitation of Yangyinqingyan Granules. Results The experiment showed good linear relationship at the ranges of 0.236μg-2.360μg for natural logarithm of peak area and concentration. The average recovery rare of Chlorogenic acid was 97.79% ,RSD was 1.17% ( n = 6 ). The content limitation of Chlorogenic acid was determined at 1.0mg/g in Yangyinqingyan Granules by determinating six batch samples . Conclusion The established methods are not only practical but capable of effectively controlling the quality of Yangyinqingyan Granules, to give reference forformulating the quality standard for Yangyinqingyan Granules.
【Key words】Yangyinqingyan Granules;Chlorogenic acid ;HPLC
本实验对君药金银花的主要有效成分绿原酸含量限度进行了确定，为养阴清咽颗粒质量标准的建立提供依据。
1.仪器与试药
仪器：安捷伦1200高效液相色谱仪（安捷伦G1316A紫外检测器、安捷伦G1310A 泵）。
试剂：乙腈（色谱纯，TEDIA），甲醇、磷酸（分析纯），纯化水（自制）。
2.方法与结果[1]
2.1 色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Agilent TC-C18，4.6×250mm，5um）；乙腈∶0.1%磷酸（13∶87）为流动相；检测波长为327nm；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；进样量：10?l。
2.2 溶液的制备
对照品溶液的制备 精密称定绿原酸对照品11.80mg，置25ml棕色容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度即可，作为储备液，备用。
供试品溶液的制备 取本品适量，研细，取约2g，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，精密加入50%甲醇40ml，称定重量，超声处理（功率200W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
缺金银花阴性样品的制备 取缺金银花的阴性样品适量，研细，取约2g，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，精密加入50%甲醇40ml，称定重量，超声处理（功率200W，频率40kHz）30分钟，放冷称重，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
2.3 方法学的考察
2.3.1缺味金银花阴性对照试验 取供试品溶液、金银花对照品溶液和缺味金银花阴性样品溶液，依法操作，进行液相色谱分析，结果表明，绿原酸含量测定无干扰，专属性强。
2.3.2 线性关系的考察 精密移取绿原酸对照品储备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml至10ml容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀。照上述色谱条件，进样10?l，记录峰面积值。以绿原酸进样量为（μg）横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y= 2968.7X–22.077R2= 0.9999。表明绿原酸苷进样量在0.236μg -2.360μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。
2.3.3 稳定性试验 分别在0、2、4、6、8、12h精密吸取供试品溶液10?l注入高效液相色谱仪，记录峰面积，供试品溶液的峰面积RSD=0.38% (n=6)。结果表明供试品溶液在12小时内稳定性良好。
2.3.4加样回收率试验 取已知含量的供试品6份，每份约1g，精密称定，分别加绿原酸对照品约1.5mg，按供试品制备方法进行制备。分别进行测定，记录峰面积值，计算回收率（测得量－样品含量)/加入对照品量×%=回收率%），所得回收率平均值为97.786%，RSD%=1.17%。加样回收率试验结果见表1。
表1 加样回收率试验结果
结果：经过对3批小试样品、3批中试样品进行含量测定，结果表明，养阴清咽颗粒中绿原酸的含量为1.3333～1.4472mg/g。根据中国药典（2010年版一部第205页“金银花”项下规定。）规定：金银花药材中绿原酸的含量不得少于1.5%，制成制剂后相当于每克不得少于5.0mg，养阴清咽颗粒原药材金银花中绿原酸的含量为21.50mg/g，通过计算得出养阴清咽颗粒中绿原酸的转移率为18.6%，即制成制剂后绿原酸的含量每克不少于0.93mg。考虑到金银花药材的来源及加工方法，制成本品每克含金银花以绿原酸计，不得少于1.0mg。六批样品所测得含量，每克含绿原酸均高于1.0mg。
2.4 讨论
金银花为方中君药,故选择金银花中主要有效成分绿原酸为含量控制指标,由于绿原酸溶液性质不稳定,处理的样品溶液应在棕色容量瓶中保存,并在12小时内完成检测。在对绿原酸含量测定摸索时比较了不同类型色谱柱和流动相，最终选择了该实验中的方法，该方法稳定，重复性好。
论文作者:吕跃杰,蒋家龙,姜蕾,王坤
论文发表刊物:《医药前沿》2016年4月第10期
论文发表时间:2016/5/17
标签：含量论文; 溶液论文; 精密论文; 回收率论文; 甲醇论文; 样品论文; 颗粒论文; 《医药前沿》2016年4月第10期论文;