丁大朋
(大连医科大学附属第一医院检验科 辽宁 大连 116011)
【摘要】 目的：探讨丙型肝炎病毒(HCV)基因型与肝脏损伤严重程度之间的关系。方法：采用PCR荧光探针法进行基因分型检测，并检测患者未治疗前丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、清蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)水平。结果：2a型患者ALT和AST明显高于1b型患者(P<0.05)，而ALB、Hb、PLT、APQI水平1b型和2a型两者间无显著性差异(P>0.05)。结论：HCV 2a型患者肝脏急性损伤程度较1b型严重，但肝脏纤维化严重程度两型未见差异。
【关键词】 丙型肝炎病毒基因型；丙氨酸氨基转移酶；天门冬氨酸氨基转移酶； 肝纤维化
【中图分类号】R512.6+3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）26-0024-02
Hepatitis c virus genotyping and liver damage index correlation studies
Ding Dapeng. The First Hospital Affiliated to Dalian Medical University, Liaoning Province, Dalian 116011, China
【Abstract】 Objective Hepatitis c virus (HCV) genotypes and the relationship between the severity of liver damage. Methods By PCR fluorescence probe method is used to detect the genotyping, patients before treatment and testing alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), albumin (propagated), hemoglobin (Hb), platelet count (PLT) level. Results 2 a type of ALT and AST were significantly higher than those in patients with type 1 b patients (P < 0.05), and propagated, Hb, PLT, APQI level 1 b and 2 a type between the two there was no significant difference (P > 0.05). Conclusions HCV patients with type 2 a type 1 b severe degree of acute liver injury, but the severity of liver fibrosis type two no difference.
【Key words】 Hepatitis c virus genotype; Alanine aminotransferase; Aspartate amino transferase; Liver fibrosis
我国约3800万人感染丙型肝炎病毒(HCV)，每年HCV感染者人数急速上升，丙型肝炎(丙肝)已成为乙型肝炎之后我国第二大类病毒性肝病，是进一步进展为肝硬化和肝癌的重要因素之一[1]。不同基因型的丙肝患者，病情严重程度不同。本研究通过检测分析慢性丙型肝炎患者的病毒基因型与肝脏功能损伤指标的相关性，为慢性丙型肝炎患者的临床诊断和治疗提供依据。
1.材料与方法
1.1 标本来源
2013年1月到2015年2月，大连医科大学附属第一医院就诊的慢性丙型肝炎患者205例，其中男性102例，女性103例，年龄21～89岁。血样标本均为外周血离心分离出的血清。标本是根据2004年《丙型肝炎防治指南》中的诊断标准做出慢性丙型肝炎的诊断。 所有血样均来自大连医科大学附属第一医院检验科。
1.2 主要试剂
HCV基因分型检测试剂盒(PCR-荧光探针法)Enzyme Mix(RT-PCR酶，Taq酶)，HCV内对照(IC)(体外转录RNA)。
1.3主要仪器设备及耗材
罗氏LightCycler480 实时荧光定量PCR仪，血细胞仪(Sysmex XE-2100)，日立7600生化分析仪
1.4 实验方法
1.4.1 HCV基因分型检测
HCV-RNA提取采用外周血离心后得到的血清，提取后的RNA通过逆转录PCR，扩增，荧光素设置所有孔均为FAM-TAMRA和HEX-TAMRA，荧光信号收集条件为60℃，反应体积是50微升。反应结束后，设定Baseline的Start值、End值以及Threshold值。结果判定：当检测样本呈典型S型曲线且Ct值<=25.1,则根据曲线标记的荧光素情况判断样本亚型。
1.4.2 相关指标检测
丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)水平检测通过检验科常规生化仪(日立7600生化分析仪；)和血细胞仪(Sysmex XE-2100)测量。
1.5 数据处理
所有数据均采用SPSS13.0软件进行统计分析。计量资料以x-±s表示，比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
1a型与2b型丙型肝炎患者肝功能指标比较结果
135例HCV 1b型患者与70例2a型患者相关指标的比较 两者在ALB、Hb、PLT、AST/PLT比值(APRI)无显著性差异(P>0.05)；1b型患者的ALT和AST水平明显低于2a型患者(P<0.05)(见表1)。
3.讨论
HCV基因型地区分布差异显著[2]，我国大部分地区主要流行的HCV基因型为1b型，其次是2a型。在城市，南方1b基因型感染率非常高，越往北则2a基因型越多。不同丙型肝炎病毒基因分型引起患者肝脏急性损伤和肝纤维化的程度可能存在差异。为了明确HCV基因型与肝脏损伤程度的相关性，本研究检测135例1b型和70例2a型丙型肝炎患者急性肝损伤的主要实验室指标，即丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)[3]。本研究证明HCV基因分型不同，肝脏急性损伤程度不同，2a型丙肝病毒感染者ALT、AST明显高于1b型，与乔斌[4]等报道的HCV基因型与肝脏损伤指标的关系基本一致。由此说明，丙型肝炎患者在2a型HCV病毒感染后肝脏急性损伤程度较1b型严重。
肝脏具有强大的合成、储备功能，可以通过Hb、PLT、ALB等反映出肝脏纤维化严重程度[5]。Kiyoshima等[6]研究发现HCV基因型并非引起肝脏纤维化严重程度的重要因素，而是年龄偏大、病程较长、不良嗜好等导致肝病更加严重。本研究证明不同HCV基因型的丙型肝炎患者Hb、PLT、ALB之间无显著性差异，同样说明HCV基因型不是引起肝脏纤维化严重程度的重要因素。
APRI由于其检测方便简单、无创等优点[7]可以用来反映慢性丙型肝炎患者肝脏纤维化及肝硬化程度。研究发现，APRI＞1.5时，肝脏呈严重纤维化改变，阳性预测值分别为96%；APRI＞2.0时，肝脏呈肝硬化改变，阳性预测值分别为75%，即APRI可预测肝脏纤维化程度[8]。本研究收集的205例丙肝患者中1b与2a型患者的APRI值之间未见显著性差异。然而，HCV基因型1b型患者APRI水平整体均值低于2a型，由此推测2a型患者肝脏纤维化可能更加严重。
综上所述，不同基因型丙型肝炎病毒感染引起的肝脏损伤程度存在明显的差异，其中2a型引起患者肝脏的急性损伤较1b型严重。因此，对丙型肝炎患者治疗前，进行HCV基因分型对评估患者病情，为患者制定合适的治疗方案及预测治疗效果有重要的临床意义。
【参考文献】
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[4]乔斌，汪明，袁乐永等.丙型肝炎病毒基因型与慢性丙型肝炎患者病情严重程度之间关系的研究.检验医学与临床[J]. 2015.12(1): 4-5.
[5]Thomas D,Zoulim F.New challenges in viral hepatitis. Gut[J],2012, 61(Suppl 1): i1-i5
[6]Kiyoshima H，Koike K，Yasuda K，et a1．Hepatitis C virus genotype and development of hepatocedu larcarcinoma．Cancer[J]，1995，76 r81：1352
[7]Yotsuanagi A，Kudo K，Hino Y，et sl．Sensitive and simple determination of mannitol in human brain tissues by gas chromatography-mass spectrometry．J Chromatogr B Biomed Sci Appl [J]，2001，758(1)：103-108．
[8]隗功贤，王志鹏.慢性乙型肝炎患者肝纤维化分级中AST/PLT比值指数的临床研究.中国肝脏病杂志[J].2013, 5(2):50-52.
论文作者:丁大朋
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第26期供稿
论文发表时间:2015/10/28
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