1.长沙医学院2013级本科临床6班 湖南长沙 410219
摘要：随着生活水平的提高，高脂与高酒精饮食已经日益成为人们的饮食习惯。近来的研究发现，高脂食物与高酒精摄入会导致肝纤维化的形成。随着肝纤维化的发病率的日益攀升，也引起了国内外大量学者的研究，因此本文为肝纤维化的相关研究进行探讨，以用于开展后续的项目活动。
关键词：高脂食物；乙醇；肝纤维化
肝纤维化是细胞外基质在肝内过度沉积的病理改变，是慢性肝病发展为肝硬化的重要中间环节。随着现在人们不合理的饮食习惯日益增多，使高脂食物和过量酒精导致的肝纤维化日益增多。经常过量的饮酒会增加患酒精性肝病的可能。度饮酒者中80％以上有一定程度的脂肪肝，10％-35％可发展成酒精性肝炎，8％-20％将发展为肝硬化。同时高脂食物摄入过多亦会肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积导致非酒精肝病，所以若两者同时经行，则会更加促使肝纤维化的发生。目前这一问题引起了国内外许多研究的关注。
一、酒精引起肝纤维化的相关研究
酒精性肝病（ALD）是由于长期大量饮酒导致的肝脏疾病。酒精肝的出现主要是以下几种原因引起的：1.乙醇、乙醛造成细胞膜损伤。2.肝细胞抗原改变引起自身免疫反应。3.乙醇高谢状态引起肝细胞缺氧，加重肝细胞损伤。4.遗传因素：家庭有嗜酒史的嗜酒者。
在国内，随着嗜酒人群的不断增加，由于酒精所引起的肝病日益攀升，引起了诸多专家学者的研究与讨论。河北医科大学的张宏伟经行了酒精对小鼠的CD4+CD25Toxp3+Treg的研究[1]，提到酒精可抑制LPS诱导的FOXP3的表达，而FOXP3是调节机体自身免疫自稳中其关键作用。而孙云帆等在酒精性肝硬化的研究中指出乙醛加合物通过HS表面的特异受体结合增加促纤维化分子（如纤粘蛋白）等的生成、加强参与瘢痕形成的生长因子的释放，直接推进肝组织纤维化的进程[2]。
在国外，Maria等[3]报道，长期摄人酒精可导致消化系统对维生素 A（VitaminA，Vit A）吸收障碍，并使肝脏内的VitA 以脂蛋 白结合视黄醛酯的形式从肝脏转移到其他脏器．因此 ALD 患者的肝脏 VitA 水平明显低于正常值。低水平的肝脏 VitA 可 导致HSC活化，转变为肌成纤维细胞，合成大量胶原维，引起肝纤维化，最终进展为肝硬化。Fsukamoto和LuNoJ报道[4]，长期摄人酒精可引起碱和多不饱和卵磷脂缺乏。胆碱缺乏可使谷胱甘肽（Glutathione，GSH）前体S一腺苷甲硫氨酸（SAM）少，破坏氧化与抗 氧化平衡体系；多不饱和卵磷脂的缺乏导致胶原酶活性降低，使其抑制胶原积聚的能力减弱从而导致肝脂肪变性和肝硬化。
二、高脂食物引起的肝纤维化的相关研究
除了酒精影响肝病的形成，近10年国内外的学者专家又将注意集中在高脂食物对肝脏的影响的研究。美国的HCC的发病率在近20年内增加了约80％，其原因中一半可用丙肝病毒的感染来解释，但仍约有15％-50％的新发HCC患者。未找到明确的病原学原因，这些证据提示可能存在其他危险因子导致了HCC患病率的增长[5]。目前发达国家中最常见的慢性肝病是非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）。我国随着经济的发展，生活水平的提高，非酒精性脂肪性肝病患者也日益增多。
目前NAFLD动物模型的建模方法可分为三种，一种是利用转基因技术来造模，其中大部分模型不符合人类NAFLD发病机制及演变过程；一种是利用药物或毒物、高脂饮食来诱导建模，药物或毒物建模法简易快速但与人类脂肪肝差异较大，高热量饮食建立的模型与人类较为接近但耗时；第三种则为复合模型（联合应用基因模型和营养模型[6]。三类模型的主要原理均集中在肝内脂肪代谢不平衡方面。徐磊，徐承富等人通过胆碱和蛋氨酸缺乏的饲料喂养小鼠，建立NAFLD的小鼠模型[7]。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆通过小鼠建模后的一般情况，肝脏病学，肝脏超微结构月血清肝功能4个方面观察饲养小鼠。发现的小鼠NAFLD模型在脂变性质上和大多数NAFLD患者的脂变性质一致，为研究NAFLD提供了宝贵的数据。
三、联合喂养的研究进展
在诸多的研究报道下，对于肝纤维化的动物模型研究仍有不足。杜施霖通过在大鼠饮水中加入酒精建立大鼠慢性肝损伤模型，虽然简单易行，但难以保持血中较高的酒精浓度，模型不够稳定；国外文献也有介绍通过给大鼠灌胃无水乙醇以观察酒精对肝脏的损伤，但没有同时研究结合灌胃高脂食物对肝脏影响，且与人类的饮食结构不大相似；另外也有通过采用胃瘘管灌注酒精性液体饲料的方法建立比较理想的酒精性肝损伤动物模型，但是动物死亡率较高，手术后恢复时间较长，而限制了这种方法的应用。
另外关于动物模型的建立，虽然杨华曾经尝试联合建模[8]，但是其重点依旧为酒精，对于高脂的数据很少。因此本研究将采用复合法，即高脂食物和乙醇喂养联合处理，情况更加紧贴实际，符合现代人饮食状况，探讨高脂饮食与酒精对肝纤维化的形成机制，制作新的肝纤维化动物模型。
筛选有效预防、治疗本病的药物及方法，建立与人类高脂食物以及乙醇导致肝损伤病变过程相似的动物模型具有积极的现实意义，旨在探索建立较为理想的小鼠高脂食物及酒精型肝纤维化模型，这也是本研究提供的相关数据更具有实际意义。并且肝纤维化是多数慢性肝病发展成为肝硬化的必经过程，因此建立一个合适的动物模型来研究肝纤维化的发生机制护肝药物的筛选是十分重要的。可缩短建模时间也避免了动物的死亡及其病理损伤更贴近临床肝纤维化的病因及发生发展，该模型可以为肝纤维化机制的研究以及护肝药物的筛选提供实验基础。
该项目主要研究的是酒精和高脂食物联合建模对大鼠肝纤维化的研究。通过将实验动物分为对照组，酒精组，低酒精高脂组，高酒精酒脂组4组，进行比较实验。从而进一步了解酒精和高脂食物这种现代常见的饮食习惯对肝纤维化的关联程度。
除去相关生化指标和组织学观察，同时笔者将引入B超机配合剂造影的方法，将造影剂打入建模动物体内，造影剂经大鼠尾静脉以团注方式注射0.06ml微泡混悬液，后推注1.5ml生理盐水。选择肝中叶的肝实质为感兴趣区（ROI），绘制相应的时间一强度曲线（TIC），并得出各项定量参数以用于分析肝实质时间一强度曲线及其参数，评估肝脏分级。
四、现在的进展情况
本实验组通过了一预实验，虽没有进行解剖以及相关生化检测，暂无相关的实验数据，但是实验白鼠与对照组的精神状态，皮毛颜色等相关外观已有明显的变化。进一步的实验结果还在进一步进行中。
参考文献：
[1]张宏伟.酒精性肝病小鼠CD4+CD25+Foxp3Freg的初步研究[D].河北医科大学，2013.
[2]孙云帆，汪皓晨，秦成坤，辛华，李霞.酒精性肝硬化的研究进展[J]中国普通外科进展2009，12（10）.884-887.
[3]Bugianesi E．Non-alcoholic steatohepatitis and eancer[J]Clin Liver Dis，2007，11191．207，x-xi．
[4]Lieber CS.Alcoholic fatty liver its pathogenesis and me chanism of progression Inflammation and f ibrosis[J].A lcohol，2004，34（1）：9-19．
[5]Chitturi S；Farrell GC Etiopathogenesis of nonalcoholi steatohepati- tis[J].2001.
[6]程靖，张宝，管石侠，侯丽丽，蒋建华.二甲双胍对非酒精性脂肪肝细胞模型PGC-1α及脂质表达的影响[J]安徽医科大学学报2014，49（3）：309-312.
[7]马芳.小鼠高脂性脂肪肝模型的建立及盐酸千金藤碱对其治疗作用的研究[D].郑州大学，2011.
[8]杨华，张丽军，冯艳玲，彭秀华，周文江.酒精复合性肝纤维化大鼠模型的建立及动态观察[J]实验动物与比较医学2008，28（4）：234-237.
作者简介：董迪烽（1994—），男，汉族，浙江杭州人，在读本科生，
通讯作者：郝一（1982—），男，讲师/医师，湖南长沙人，从事病理教学研究。
基金项目：长沙医学院2015年度校级立项大学生研究性学习和创新性实验计划项目，（2014年湖南省普通高等学校教学改革研究项目（554），长医教〔2015〕15号-83号，2014年湖南省教育厅科学研究一般项目14（0116））
论文作者:董迪烽,余平,彭泽鸿,郝一（通讯作者）
论文发表刊物:《健康世界》2015年18期
论文发表时间:2016/2/24
标签：酒精论文; 模型论文; 肝纤维化论文; 小鼠论文; 肝脏论文; 肝病论文; 食物论文; 《健康世界》2015年18期论文;