叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究

叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究

李东海, 淦作松[1]2006年在《叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究》文中研究表明目的探讨叁氧化二砷(As2O3)及其联合地塞米松(DEX)诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡的作用。方法实验分为空白对照组、As2O3组、DEX组、As2O3+DEX组,经倒置显微镜观察、吖啶橙荧光染色、流式细胞计数、细胞DNA片段断裂率来检测As2O3及其联合DEX诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡的作用。结果As2O3以浓度依赖形式诱导BT-325细胞凋亡;DEX具有明显的协同效应。结论As2O3与DEX联合用药可能成为治疗胶质母细胞瘤的一条新途径。

淦作松[2]2004年在《叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究》文中指出胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤,其中胶质母细胞瘤恶性程度高、预后差。目前手术、放疗、化疗的疗效不理想。叁氧化二砷(Arsenic Trioxide,As2O3)是一种有效的肿瘤细胞凋亡诱导剂,对急性早幼粒细胞白血病(APL)临床疗效较为理想;地塞米松(Dexamethasone,DEX)是又一种常见的凋亡诱导剂,可以单独或与其他药物协同诱导细胞凋亡。目的:本实验通过观察As2O3在体外对胶质母细胞瘤细胞系BT-325的增殖抑制和诱导凋亡的作用及DEX的协同作用,探讨As2O3及其联合DEX治疗胶质母细胞瘤的可行性。方法:体外培养的BT-325细胞分为四组:A组为空白对照组,B组为地塞米松对照组(50umol/L),C组为As2O3作用组(含五个亚组C1.0、C2.5、C5.0、C7.5、C10.0,1.0-10.0 umol/L As2O3 ),D组为B组的浓度与C组各浓度联合作用组(含D1.0、 D2.5、 D5.0 、D7.5 、D10.0 五个亚组)。各组BT-325细胞分别进行以下检测:1.细胞形态学观察:倒置显微镜观察各组细胞的生长状况和形态上的改变;药物作用BT-325细胞24h、48h、72h后进行吖啶橙染色,观察各组细胞荧光染色状况。2.于 24h、48h、72h,对各组细胞进行台盼蓝染色细胞计数并绘制生长曲线。3.MTT实验:分别于24h、48h、72h对各组细胞进行MTT染色,酶标仪检测(波长490nm)各孔细胞的吸光度,计算细胞的增殖抑制率。 4.流式细胞计数:药物作用48h后,收集各组细胞进行EB染色,流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡率。5.细胞DNA片段断裂率分析:药物处理48h后,收集各组细胞进行裂解,离心分离出片段化的DNA和未断裂的DNA,分别测定DNA的吸光度,计算出DNA片段断裂率。结果:As2O3呈浓度和时间依赖性致BT-325细胞的增殖活性下降和形态学的改变,在倒置显微镜下可以观察到细胞由梭形生长逐渐演变成圆、椭圆形生长;通过荧光染色发现在高浓度组的BT-325细胞呈现核固缩黄绿色浓染,部分细胞核边聚, DEX具有协同作用可以使部分细胞核碎裂。各组细胞对台盼蓝拒染均在90%以上,1.0-10.0 umol/L As2O3使 BT-325细胞数递减,与对照组比较差异均有显着性意义(P<0.05),细胞的增殖抑制率随As2O3浓度的升高和作用时间的延长呈递增性改变,DEX具有协同抑制增殖的作用,D组的增殖抑制率高于C组(P<0.05)。FCM检测发现,As2O3使BT-325细胞周期阻滞于G2/M期,并以浓度依赖形式致细胞凋亡,C10.0组的细胞凋亡率为8.29%,与A组细胞凋亡率比较时差异有显着性意义(P<0.05);DEX协同作用明显,使G2/M期细胞比例增高,当As2O3的浓度≥2.5umol/L时,D组的细胞凋亡率高于C组(P<0.05)。经1.0-10.0 umol/L As2O3作用后BT-325细胞DNA片段断裂率从5.38%上升至28.9%,当As2O3的浓度≥5.0umol/L时,DNA片段断裂率与A组比较差异均有显着性意义(P<0.05),DEX具有协同致细胞DNA断裂,D组细胞DNA断裂率高于C组(P<0.05)。结论:在体外As2O3可以有效抑制BT-325细胞增殖,使BT-325细胞周期阻滞于G2/M期,并诱导细胞凋亡;DEX可以增强As2O3对BT-325细胞的增殖抑制、细胞周期阻滞、诱导凋亡的作用。As2O3与DEX联合用药可能成为胶质母细胞瘤的有效治疗方法。

参考文献:

[1]. 叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究[J]. 李东海, 淦作松. 中国临床神经外科杂志. 2006

[2]. 叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究[D]. 淦作松. 江西医学院. 2004

标签:;  ;  ;  ;  

叁氧化二砷诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡作用的研究
下载Doc文档

猜你喜欢