张娜[1]2017年在《地黄饮子对AD的治疗作用及调节CREB/PGC-1α通路改善线粒体功能的机制研究》文中研究说明阿尔茨海默病(AD)是老年人常见的神经系统变性病。我国及世界各国的AD患者数量巨大,呈现迅速增长趋势,且其医疗开销巨大,是现代社会经济沉重的负担。但是现代医学对于AD的疗效不过限于一定程度上减轻症状,不能逆转神经元的衰退,所以无法延缓疾病的进展。然而,祖国医药具有多靶点、多途径的现代药理学活性,在AD治疗上展现出独特的优势。研究AD的发病机制,探索其有效防治方法具有重要的科学价值和现实意义。论文共分为文献综述、临床研究及实验研究叁部分。第一部分文献综述结合中西医相关文献资料,从AD的流行病学、发病机制、西医治疗以及中医对于AD的认知这四个方面探讨和论述AD。第二部分 临床研究目的:以安理申为西药对照,通过中西医量表评价地黄饮子治疗轻度AD的疗效,为地黄饮子治疗AD的优势提供客观依据。方法:纳入50例轻度AD患者,随机分为中药治疗组及西药对照组,中药治疗组给予地黄饮子加减并给予AD患者教育,西药对照组给予安理申并给予患者教育,两组疗期均为3个月,于治疗前后均行AD中西医量表,评价地黄饮子治疗轻度AD的疗效。结果:1中医症状疗效判定中药治疗组的AD中医证侯量化分级表总分、主症和次症总分较西药对照组有所下降,均有显着统计学差异(P<0.01)。主症中善忘、技能操作的分值较西药对照组有所下降,均有显着统计学差异(P<0.01)。次症中腰膝酸软、四肢欠温、倦怠思卧、头晕耳鸣、大便失禁的分值较西药对照组有所下降,均有统计学差异(P<0.05)。2MMSE中药治疗组的MMSE总分,其中单项条目中的计算力、回忆以及语言的分值较西药对照组有所提高,均有显着统计学差异(P<0.01)。3MoCA中药治疗组的MoCA量表总分,其中单项条目中的视空间与执行功能、注意力、语言以及延迟回忆的分值较西药对照组有所提高,有显着统计学差异(P<0.01),抽象思维较西药对照组有所提高,有统计学差异(P<0.05)。4ADL中药治疗组的ADL分值较西药对照组未见明显变化CP>0.05)。结论:1、AD中医证侯量化分级表可以评估AD患者中医症状病情程度,分值越高提示患者中医症状越多或者越严重。地黄饮子可以显着地改善轻度AD患者中医症状。特别是在善忘、操作技能、腰膝酸软、四肢欠温、倦怠思卧、头晕耳鸣、大便失禁这几项症状上,地黄饮子疗效突出。2、地黄饮子可以显着地提高患者高级智能水平。特别是在MMSE量表中的计算力、回忆、语言以及MoCA量表中的视空间与执行功能、注意力、语言、抽象思维、延迟回忆这些条目上,地黄饮子疗效突出。第叁部分实验研究实验一地黄饮子对AD模型大鼠学习记忆能力的改善作用目的:观察各组大鼠的行为学指标,探讨地黄饮子对AD大鼠学习记忆能力的影响。方法:120只雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、安理申组、地黄饮子高、中、低剂量组共六组,除假手术组外均以侧脑室注射Aβ1-42建立AD模型,各治疗组给予相应药物灌胃,假手术组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续30天。通过Morris 水迷宫实验、大鼠跳台实验、大鼠避暗箱实验、大鼠Y迷宫实验对大鼠行为学进行观察。结果:1大鼠Morris水迷宫实验在定位巡航实验第3天,与模型组大鼠相比,地黄饮子可显着缩短AD大鼠逃避潜伏期以及平均游泳距离(P<0.01)。在空间探索实验中,与模型组大鼠相比,地黄饮子可使AD大鼠穿越平台区次数、在目标象限停留时间显着增多(P<0.01),在相对象限停留时间显着减少(P<0.01)。2大鼠跳台实验与模型组大鼠相比,地黄饮子高、中、低剂量组可使AD大鼠停留潜伏期显着增加(P<0.01),错误次数减少(P<0.05)。3大鼠避暗箱实验与模型组大鼠相比,地黄饮子可使AD大鼠的潜伏期显着增加(P<0.01),错误次数显着减少(P<0.01)。4大鼠Y迷宫实验与模型组大鼠相比,地黄饮子可使AD大鼠的自发交替反应率显着升高(P<0.01)。结论:1 Morris水迷宫实验结果表明地黄饮子可以显着改善AD大鼠的空间学习记忆能力。2 地黄饮子可显着增加AD大鼠跳台实验和避暗箱实验中的停留潜伏期,减少错误次数,表现出良好的改善记忆功效。3 在大鼠Y迷宫实验中,地黄饮子可显着改善AD大鼠的工作记忆能力。实验二地黄饮子对AD大鼠及细胞模型能量代谢及线粒体结构功能的影响目的:通过对各组大鼠的脑组织中线粒体肿胀度、线粒体膜电位,呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性,ATP、ADP、AMP、EC、PCr,叁羧酸循环关键酶(PDH、KGDH)活性,MDA水平和SOD、GSH-PX活性,CREB和PGC-1α表达的检测,研究地黄饮子对AD模型大鼠脑细胞能量代谢以及线粒体结构功能的影响,探讨地黄饮子对AD大鼠脑线粒体功能的作用机制。方法:完成行为学实验后,随机从每组选取8只大鼠,A520光吸收值测定线粒体肿胀度;试剂盒检测线粒体膜电位,呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性,叁羧酸循环关键酶(PDH、KGDH)活性,MDA水平和SOD、GSH-PX活性;高效液相色谱法检测ATP、ADP、AMP、PCr;Western blot检测CREB和PGC-1α。结果:1地黄饮子对AD大鼠脑EC和PCr含量的影响与模型组大鼠相比,地黄饮子可使AD大鼠脑组织中ATP、ADP、PCr含量及EC显着增加(P<0.01),使AMP含量显着减少(P<0.01)。2地黄饮子对AD大鼠脑线粒体肿胀度的影响与模型组大鼠相比,地黄饮子可使AD大鼠脑线粒体A520显着增加(P<0.01)。3地黄饮子对AD大鼠脑组织线粒体膜电位的影响与模型组大鼠相比,地黄饮子可显着提高线粒体膜电位(P<0.01)。4地黄饮子对AD大鼠脑组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ活性的影响与模型组大鼠相比,地黄饮子可显着提高呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ的活性(p<0.01)。而对呼吸链复合物Ⅱ活性无明显改善作用(P>0.05)。5地黄饮子对AD大鼠脑组织线粒体叁羧酸循环关键酶活性的影响与模型组相比,地黄饮子可使大鼠脑组织PDH和KGDH活性显着升高(P<0.01)。6地黄饮子对AD大鼠脑组织MDA水平和SOD、GSH-PX活性的影响与模型组大鼠相比,地黄饮子可使大鼠脑组织MDA含量显着减少(P<0.01),SOD和GSH-PX活性显着提高(P<0.01)。7地黄饮子对AD大鼠CREB和PGC-1 α表达的影响与模型组相比,地黄饮子可使大鼠磷酸化CREB和PGC-1 α表达量显著上调(P<0.01)。结论:1地黄饮子可显着改善AD大鼠脑组织内能量代谢障碍,提高脑组织EC和PCr含量,增加脑内能量供给。2地黄饮子对AD大鼠脑组织线粒体结构和功能损伤有显着保护作用。地黄饮子通过保护线粒体膜完整性,提高线粒体呼吸链酶复合物活性,提高叁羧酸循环关键酶PDH和KGDH的活性,保护线粒体结构,改善线粒体功能。3地黄饮子可以减少AD大鼠脑组织线粒体损伤导致的氧化应激,脂质过氧化减少。同时通过增加机体抗氧化能力,减少氧自由基对线粒体的进一步损伤。4地黄饮子可以促进CREB磷酸化,上调PGC-1 α表达,从而增加线粒体生物合成。5综上所述,地黄饮子通过激活CREB/PGC-1α通路,促进线粒体生物合成,增加线粒体结构稳定性,改善线粒体功能,从而改善AD大鼠脑组织能量代谢,增加能量供应。
谢宁, 宋琳, 牛英才, 邹纯朴[2]2005年在《加减地黄饮子对Aβ_(1-40)所致AD大鼠学习记忆及抗氧化作用的影响》文中认为目的 观察加减地黄饮子对实验性痴呆大鼠的防治作用。方法 凝聚态 Aβ1-40直接定向注射右侧海马CA 区造成 AD 大鼠模型,以大鼠跳台实验检测各组大鼠学习记忆行为,测定脑组织中 SOD 活性、MDA 及脂褐素含量,光镜观察海马病理变化。结果 加减地黄饮子可以通过清除自由基,提高抗氧化能力,改善细胞的退化、变性程度,提高 Aβ致痴呆鼠的学习记忆能力。结论 加减地黄饮子通过降低自由基水平对老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。
牛英才[3]2005年在《地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠行为学及相关基因表达的影响》文中研究说明目的 探讨地黄饮子对D-gal致亚急性衰老合并海马注射Aβ_1-40建立的AD大鼠模型作用的分子机制。 方法:18月龄Wistar雄性大鼠120只随机分为地黄饮子预防组、地黄饮子治疗组、模型组、盐酸多奈哌齐组、假手术组和老年对照组,另以16只4月龄Wistar大鼠作为青年对照组。地黄饮子预防组、地黄饮子治疗组、模型组、盐酸多奈哌齐组先腹腔注射D-gal 28天,同时预防组给予地黄饮子灌胃给药,然后双侧海马注射Aβ_1-40,制备复合AD模型。注射后3天起,地黄饮子治疗组、盐酸多奈哌齐对照组给药28天后检测各项指标。通过Morris水迷宫试验测试大鼠的空间学习记忆能力的变化,光镜、电镜观察海马组织形态结构变化,化学比色法测定CAT、GSH-Px、MAO活性变化,免疫组织化学染色法检测NMDAR、NOS、ChAT的表达改变,核酸原位杂交法检测海马组织Tau蛋白mRNA表达变化,RT-PCR法检测APP mRNA、SOD1 mRNA和ICE mRNA的表达变化,以及地黄饮子对上述指标的影响。 结果:行为学结果显示模型组与老年对照组比较,潜伏期延长,穿过平台次数明显减少,有显着性差异;地黄饮子预防组、治疗组与模型组比较,潜伏期缩短,穿过平台次数明显增多,有显着性差异。电镜、光镜观察结果显示模型组大鼠海马神经元减少和变性;地黄饮子能改善AD大鼠海马病理改变。模型组与老年对照组比较,脑组织CAT、GSH-Px的活性明显降低,有显着性差异;地黄饮子预防组、治疗组与模型组比较,CAT、GSH-Px活性升高,有显着性差异。与老年对照组比较,模型组MAO活力升高,有显着性差异;地黄饮子预防组、治疗组与模型组比较,MAO活性降低,有显着性差异。与老年对照组比较,模型组大鼠脑组织中ChAT、NR2B、nNOS的面密度和PU值均明显降低,有显着性差异;预防组、治疗组与模型组比较,地黄饮子能提高ChAT、NR2B、nNOS的表达,有显着性差异。与老年对照组比
孙文贤, 安红梅[4]2014年在《熟地黄及其复方在老年性痴呆治疗中的作用》文中研究表明围绕老年性痴呆行为学、病理学、发病机制等环节综述了熟地黄及其复方防治老年性痴呆的研究现状,为补肾益精生髓中药在临床防治老年性痴呆中的使用提供了依据。
韩冉, 马涛, 张志辰, 高阔, 高俊峰[5]2018年在《地黄饮子治疗阿尔茨海默病的实验研究进展》文中研究指明地黄饮子出自《黄帝内经·素问·宣明论方》,其中君药肉苁蓉、巴戟天、熟地黄、山茱萸,温壮肾阳、滋补肾阴、填精益髓;臣药附子、肉桂、麦冬、石斛、五味子,保养真元、滋阴敛液;佐药远志、石菖蒲、茯苓,豁痰开窍;使药薄荷、生姜、大枣和其营卫。阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是神经退行性疾病,在中医学中属于呆病的范畴。AD发病机制复杂,涉及多个病理环节,且因其发病隐匿,进程不可逆,危害大、致死致残率高。基于中医理论的中药复方在治疗AD中具有独特优势。近年研究表明,地黄饮子临床治疗AD具有明确疗效,其药理作用机制包括保护线粒体结构与功能、改善能量代谢、抗氧化、调节β淀粉样蛋白前体蛋白(beta amyloid precursor protein,APP)加工和β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)代谢、抗神经元凋亡、调节神经递质、保护突触结构与功能及抗炎作用等多个方面。本文总结近年来地黄饮子治疗AD作用机制的实验研究进展做一综述。
谢宁, 宋琳, 牛英才, 邹纯朴[6]2005年在《加减地黄饮子对Aβ_(1-40)所致AD大鼠学习记忆及抗氧化作用的影响》文中研究指明目的 :观察加减地黄饮子对实验性痴呆大鼠的防治作用。方法 :凝聚态Aβ1 - 40 直接定向注射右侧海马CA1 区造成AD大鼠模型 ,以大鼠跳台实验检测各组大鼠学习记忆行为 ,测定脑组织中SOD活性、MDA及脂褐素含量 ,光镜观察海马病理变化。结果 :加减地黄饮子可以通过清除自由基 ,提高抗氧化能力 ,改善细胞的退化、变性程度 ,提高Aβ致痴呆鼠的学习记忆能力。结论 :加减地黄饮子可以通过影响自由基水平对老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。
谢宁, 刘艳丽, 宋琳, 井宏颖[7]2015年在《地黄饮子的实验研究进展》文中提出地黄饮子为古代经典方剂。近年来临床和实验研究表明,地黄饮子在防治阿尔茨海默病、血管性痴呆、中风及后遗症等疾病方面有一定疗效,并且对神经系统具有较好的保护作用,本文就近年来的实验研究进行论述。
宋琳[8]2005年在《地黄饮子改善痴呆大鼠学习记忆及其防治AD作用机理的实验研究》文中认为老年性痴呆是一种进行性退行性神经病,伴有认知及行为障碍,多发生在65岁以上老年人群。随着人口寿命的增加,本病的发病率也不断升高,给社会及患者家庭带来沉重的负担。如何防治本病已成为医务工作者亟待解决的课题。 地黄饮子治疗老年性痴呆以补肾填精为主,兼以祛痰化瘀,符合本病本虚标实的病机特点,在治疗上遵循“虚者补之,实者泻之,攻补兼施”的原则,是防治老年性痴呆的有效方剂。 本实验复制了D-gal腹腔注射合并Aβ_(1-40)海马定向注射AD动物模型,运用光、电镜技术及免疫组化、生物化学及分子生物学等先进检测方法,从行为学及细胞、分子水平探索地黄饮子对过氧化损伤、胆碱能损害、炎症损伤、细胞凋亡等相关调控因素影响的作用机制。动物实验结果表明:1.大鼠行为学实验显示地黄饮子能改善痴呆大鼠主动、被动回避反应能力及空间探索记忆能力,从而改善痴呆鼠的学习记忆障碍。2.地黄饮子可以通过增强痴呆鼠脑CAT抗氧化酶的活性、降低MAO活性以抑制过氧化反应,进而提高对自由基清除能力,减少自由基对海马神经元损伤。3.地黄饮子能够上调海马神经元NF-kβ、hsp70及下调caspase3基因mRNA的表达,抑制Aβ损伤时海马神经元的过度凋亡。4.地黄饮子能通过改善鼠脑神经元胆碱能损害,来上调海马和皮层神经元SYN蛋白的表达,使突触传递功能恢复。5.地黄饮子能够下调细胞因子IL-1α和TNF-α过度表达,抑制小胶质细胞活性,减轻海马神经元的炎症损伤。
周妍妍[9]2007年在《地黄饮子对Aβ致PC12细胞损伤影响的实验研究》文中研究表明老年性痴呆(Alzheimer's disease，AD)是一种中枢神经系统原发性退行性变性疾病，临床主要表现为进行性记忆、理解、判断、定向等认知功能障碍，精神行为异常以及生活能力减退。该病不仅是一种随年龄增长而发病率升高的疾病，而且是一种致残率、致死率很高的疾病，给家庭和社会带来巨大的精神和经济负担，因而深入探讨AD的发病机制，研究有效的治疗措施是世界瞩目的重大课题。本课题在以往地黄饮子防治AD系列研究的基础上，采用脑脊液药理学方法，通过建立β淀粉样蛋白诱导PC12细胞损伤的AD细胞模型，运用实时荧光定量PCR、Werstern blot、免疫细胞化学、生物化学及光、电镜技术等先进的检测方法和手段，从细胞及分子水平对地黄饮子防治AD的作用及其机制进行探讨。结果显示：一、地黄饮子可显着改善Aβ25-35损伤引起的PC12细胞形态的改变，减轻细胞膜损伤，增强细胞活力，减少损伤所致的细胞死亡。二、地黄饮子能提高PC12细胞培养液中SOD的活性，上调SODmRNA的表达，降低培养液中MDA的含量，提高自由基清除能力，减少自由基对PC12细胞的损伤。叁、地黄饮子能明显提高Aβ25-35损伤时PC12细胞ChAT的表达，通过减轻胆碱能系统的损害防治AD。四、地黄饮子能抑制Aβ25-35损伤时PC12细胞微管相关蛋白tau的表达，从而起到防治AD的作用。
关慧波[10]2005年在《地黄饮子对痴呆大鼠行为学及抗氧化作用影响的研究》文中认为老年性痴呆是一种进行性退行性神经病变,严重危害老年人的健康。由于社会人口老龄化和缺乏有效的早期诊断方法和治疗手段,阿尔茨海默病患者日益增多。中医对该病有丰富的理论和其独特的认识,积累了丰富的治疗经验,认为老年性痴呆是以肾虚为内在机理,以痰瘀阻窍为致病的重要因素。因此,我们运用古方地黄饮子进行防治老年性痴呆的实验研究。 本实验以D-半乳糖拟衰老合并大鼠脑海马注射β-淀粉样蛋白导致阿尔茨海默病模型,并以哈伯因、抗脑衰为阳性对照,对地黄饮子组从行为学,病理改变,生化酶学改变等方面进行了综合研究,结果表明地黄饮子具有: 1.可改善模型大鼠行为学功能。 2.可提高超氧化物歧化酶活性,降低丙二醛含量。 3.提高模型大鼠叁磷酸腺苷酶的含量。 4.地黄饮子能上调B细胞淋巴瘤2基因的表达 5.能改善模型大鼠的脑组织病理改变。 证明地黄饮子是一种预防老年痴呆的有效方药,为治疗阿尔茨海默病提供了部分实验依据。
参考文献：
[1]. 地黄饮子对AD的治疗作用及调节CREB/PGC-1α通路改善线粒体功能的机制研究[D]. 张娜. 北京中医药大学. 2017
[2]. 加减地黄饮子对Aβ_(1-40)所致AD大鼠学习记忆及抗氧化作用的影响[J]. 谢宁, 宋琳, 牛英才, 邹纯朴. 中国中医药信息杂志. 2005
[3]. 地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠行为学及相关基因表达的影响[D]. 牛英才. 黑龙江中医药大学. 2005
[4]. 熟地黄及其复方在老年性痴呆治疗中的作用[J]. 孙文贤, 安红梅. 中华中医药学刊. 2014
[5]. 地黄饮子治疗阿尔茨海默病的实验研究进展[J]. 韩冉, 马涛, 张志辰, 高阔, 高俊峰. 中国实验方剂学杂志. 2018
[6]. 加减地黄饮子对Aβ_(1-40)所致AD大鼠学习记忆及抗氧化作用的影响[J]. 谢宁, 宋琳, 牛英才, 邹纯朴. 中医药学刊. 2005
[7]. 地黄饮子的实验研究进展[J]. 谢宁, 刘艳丽, 宋琳, 井宏颖. 中华中医药学刊. 2015
[8]. 地黄饮子改善痴呆大鼠学习记忆及其防治AD作用机理的实验研究[D]. 宋琳. 黑龙江中医药大学. 2005
[9]. 地黄饮子对Aβ致PC12细胞损伤影响的实验研究[D]. 周妍妍. 黑龙江中医药大学. 2007
[10]. 地黄饮子对痴呆大鼠行为学及抗氧化作用影响的研究[D]. 关慧波. 黑龙江中医药大学. 2005