【关键词】无菌检查试验；先天缺陷；应对策略
1.前言
无菌检查试验是用于检查药典或其他品种是否无菌的一种检查方法。在我国，无菌检查法的历史已经超过数十年，但是它的质量检测问题因其先天缺陷，一直饱受争议。近年来，为了降低无菌检查试验先天缺陷对试验结果的影响，欧美和日本等国家对药典中的无菌检查试验做出了一些调整和改变。为规范我国的无菌检查试验方法，减少试验结果的失误率，下文将分析西方国家对无菌检查试验的做法，并探究我国应当采取的应对措施。
2.无菌检查试验的先天缺陷
2.1采样
无菌检查试验在进行样品采集的过程中，由于没能以统计学的角度进行采集，所以检测污染物的能力不足，以致于检测结果容易出现错误。根据相关的调查研究显示，污染率越低，污染物漏检的可能性越大，而产品的样品不可能进行一一检测，所以检测时不可避免地会出现漏检的情况[1]。
2.2培养条件
自然界中的真菌生长的环境温度为25℃-30℃左右，细菌的生长温度则为25℃-40℃左右，但是，药典中规定的微生物生长条件是在20℃-25℃左右，由此可见，药典中所要求的微生物培养条件，并非菌类最适宜的生长条件。药典中所规定的微生物培养温度之所以不同于微生物的适宜温度，是因为检测试验的目的是为了检测环境中的污染菌，而不是专门培养菌类。但是研究结果发现，使用不同的培养基检查不同的菌类，其结果总是存在缺陷，往往不尽人意。
3.西方国家对克服无菌检查试验缺陷的对应措施
3.1欧洲
欧洲药典中对无菌试验做出了相应的规定，在“5.1.9无菌试验使用指南”这一章节中明确规定，无菌试验的成功源自微生物的生长条件、采样方式以及批次是否一致等，所以，灭菌过程比无菌试验更为重要。另外，欧洲药典在2007年之时载入的“细胞产品的微生物控制”，可以用作无菌检查试验的替代方式。
3.2美国
美国药典经过2012年的修订，提出一种新型的无菌检查方法。这种方法能够满足美国具有权威性的检查机构的检测。修订法与以往药典的最佳区别，就是具有灵活性和先进性，它取消了无菌试验在细节上的硬性要求，鼓励检测方法的多样性，允许培养的检测方法的使用。
3.3澳大利亚
澳大利亚在2006年之时，就颁布了《治疗产品无菌检查指南》。《指南》指出，在进行无菌检测试验时，可以附加停滞试验，原因是要了解在微生物培育期间，培育基是否具备生长能力。《指南》中还明确指出了统计学对于无菌检测试验的重要性，以及取消培养过程中的细节操作。
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4.我国对克服无菌检查试验缺陷的应对策略
4.1应对无菌检查试验的解释
首先，我国部分药品生产企业，由于对无菌检测试验的知识原理和实际操作不娴熟，所以致使无菌检查试验操作不规范，存在微生物污染事件发生的隐患，因此，各药品检测机构应当进一步加强对药品生产企业的药品安全质量管控，并修订类似《无菌试验使用方法指南》的文件，提高无菌检测试验的质量安全。其次，我国药典详细规定了无菌检查试验的操作方法，却缺乏对其原理和先天缺陷的详解，重结果，轻质量，不利于无菌检测试验的成功。为此，我国药典应当对无菌检测试验做出一下几点要求：（1）保证在灭菌过程中，对受到过验证的方法提供支持，明确灭菌过程的证据比试验结果更为重要。（2）由于不能对所有产品进行试验检测，所有要明确无菌保证并没有绝对性。（3）明确同一批次的产品能够检测污染物的可能性很小。（4）产品的批次同一性、采样方法、生产条件等因素决定着无菌检查试验的结果。（5）在采集样本的过程中，需要通过统计学的角度，采用科学的采样方法。
4.2制定方法时考虑生物制品的特殊性
在西方国家的药典中，对无菌检查试验在生物制品中的应用都做出了一定的要求，而我国在2010年的药典修订中，也将无菌检查试验对生物制品的应用做出了具有针对性的规定，与西方国家在无菌检查法中的要求保持一致。生物制品具有生物活性的特点，其原料、生产方式等都具有特殊性，因此，普通的无菌检测方法具有风险性，在做无菌检测时需要在培养基和培养条件上对其做出特殊的要求。
4.3对无菌检查试验的抽样方案做出要求
我国的药典对无菌检查试验的原液、半成品、成品等抽样数量做出了相关规定，但却没有规定具体的抽样方式。经过对其他国家在无菌检查试验中的抽样方法的参考，规定药品无菌检查抽样应当包括以下几个方面：（1）在产品包装的开始、经过、结束三个时间段，都要进行抽样；如果生产设备在生产的过程中出现故障或者其他问题而导致抽样中断，应当在状况出现后及时进行抽样。（2）灭菌产品的不同部位都要进行抽样，包括灭菌因子难以到达之处。（3）在进行二次抽样时，应当考虑首次抽样中所出的位置和生产时间段。
4.4对培养基做出规定
我国药典中的无菌检查试验所用到的培养基一般有两种，一是硫乙醇酸盐流体培养基，二是改良马丁培养基。这两种培养基并不能对所有药品进行覆盖，西方国家的无菌检查试验中没有规定使用特定的培养基，但对其生长性能与污染物检验等问题做出了严格规定[2]。如今在我国，已经允许某些特殊药品中使用替代培养基。
5.结语
总而言之，无菌检查试验本身存在着先天性的缺陷，为此，我国正努力对试验进行修正和整改，并在参考其他国家药典的基础上，对无菌检查试验提出一些新思路。无菌检查试验的先天缺陷包括样品的采样和培养条件两个方面，针对这些问题，我国提出了相应的应对方案，以规范药品标准中无菌检查试验方法。
【参考文献】
[1]范文平, 赵宏大, 谢文. 生物制品无菌检查试验方法发展方向的探讨[J]. 中国药师, 2014(01):162-164.
[2]张铮. 无菌检查试验的先天缺陷及应对策略的思考[J]. 科技致富向导, 2015(9):125-125.
作者信息：徐婉婷，女，1982年10月，山东聊城，本科，药品检验，聊城市食品药品检验检测中心，主管药师。
论文作者:徐婉婷1 刘晋1 王芳芳1 孙茂坤2 通讯作者
论文发表刊物:《医师在线》2020年4期
论文发表时间:2020/4/9
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