葛欣[1]2000年在《香石竹抗衰老遗传转化主要影响因素的研究》文中研究指明以香石竹的愈伤组织和下胚轴为受体材料，分别采用农杆菌介导法和基因枪介导法进行遗传转化，探讨各个影响因子，建立了稳定高效的遗传转化体系，筛选出抗性愈伤组织和抗性芽，最终获得转化的再生植株。对转化体进行了Gus（B-Glurcuronidase）活性检测和PCR（Polymerase Chain Reaction）检测，结果均呈现阳性，证明外源基因EFE（Ethylene Formation Enzyme）已在抗性愈伤和植株中整合并表达。 本研究得出如下结论： 1.建立高效香石竹再生体系的最佳培养基为 诱导培养基MS_3：MSZ+2.4-D0.1mg/L+BA0.2mg/L； 分化培养基MS_5：MSZ+BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L； 生根培养基MSR_2：1/2MS+IBA1.0mg/L+GA_30.1mg/L+AC0.8mg/L。 2.适合的农杆菌转化因子 菌液浓度5X，共培养时间3d、受体材料为愈伤组织。 3.基因枪转化的优化参数组合 轰击压力1100Psi，轰击距离6cm的组合。 4.两种方法转化的受体都有卡那霉素抗性，在选择培养基上生长良好。并有抗性 不定芽的分化及再生植株的形成。 5.两种方法转化的转化体均检测出Gus基因活性，PCR检测结果呈阳性，从分子 水平证明外源基因已在转化体中整合。
李涵, 张婷, 张颢, 李树发, 姚有林[2]2007年在《香石竹ACC氧化酶基因的克隆及其正义反义表达载体的构建》文中进行了进一步梳理利用在Genebank上已报道的香石竹ACC氧化酶(ACO)基因的cDNA序列设计特异引物,以香石竹品种‘MASTER’的cDNA为模板进行PCR扩增,克隆香石竹ACC氧化酶(ACO)基因。测序结果显示,克隆基因的序列与报道序列完全一致。将克隆的ACC氧化酶(ACO)基因分别连接到植物表达载体PBI121启动子CaMV 35S的上游及下游,构建香石竹ACC氧化酶(ACO)基因的正义表达载体PBI121-ACO及反义表达载体PBI121-anti ACO。经PCR鉴定,基因已成功构建到表达载体上。为香石竹抗衰老基因工程育种奠定了基础。
参考文献：
[1]. 香石竹抗衰老遗传转化主要影响因素的研究[D]. 葛欣. 东北农业大学. 2000
[2]. 香石竹ACC氧化酶基因的克隆及其正义反义表达载体的构建[J]. 李涵, 张婷, 张颢, 李树发, 姚有林. 北方园艺. 2007